王凱英 鮑 坤 徐 超 劉晗璐 劉學(xué)慶 李光玉*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，長(zhǎng)春 130112;2.特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130112)

烏蘇里貉(Nyctereutes procyonoides gtray)為雜食動(dòng)物，人工養(yǎng)殖條件下多以海雜魚(yú)、碎肉、動(dòng)物下雜等與谷物混合配制鮮料飼喂。鮮料有利于貉消化吸收，但是夏季氣溫較高，易發(fā)生飼料酸敗，引起采食量下降、營(yíng)養(yǎng)吸收利用率降低、動(dòng)物免疫機(jī)能減弱和疾病頻發(fā)，使生長(zhǎng)發(fā)育、皮張質(zhì)量等生產(chǎn)性能受到嚴(yán)重影響。傳統(tǒng)解決方法是添加抗氧化劑和抗生素等獸藥，然而藥物濫用不僅增加養(yǎng)殖成本，還會(huì)在畜體殘留累積，誘發(fā)細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性，對(duì)環(huán)境污染、動(dòng)物福利及生物安全隱患極大，已被漸漸叫停。飼料酸化技術(shù)能夠調(diào)節(jié)飼料pH，改善其適口性，調(diào)控消化道pH，提高消化酶活性，實(shí)現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率提高;且能夠降低飼料氧化酸敗程度，促進(jìn)消化道有益微生物生長(zhǎng)，抑制有害細(xì)菌增殖，改善動(dòng)物機(jī)體免疫狀況，提高畜禽生產(chǎn)性能，是替代傳統(tǒng)方式進(jìn)行動(dòng)物健康養(yǎng)殖的首選［1－6］。野生烏蘇里貉分布于中國(guó)東北、俄羅斯遠(yuǎn)東和北朝鮮，人工養(yǎng)殖主要在我國(guó)且馴養(yǎng)歷史較短，貉飼料酸化技術(shù)尚屬空白，有待深入研究。本試驗(yàn)以磷酸、檸檬酸、乳酸為研究對(duì)象，研究酸化劑對(duì)烏蘇里貉生產(chǎn)性能及血清生化指標(biāo)的影響，篩選酸化劑的適宜添加種類及水平，為飼料酸化技術(shù)在養(yǎng)貉業(yè)中的應(yīng)用提供支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)于2011年7月13日至2011年11月15日進(jìn)行，在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動(dòng)物試驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)期125 d。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

選擇健康、體重相近、60日齡的雄性烏蘇里貉100 只，體重平均為(2 585.34±419.19)g，隨機(jī)分成10組，每組10只，組間體重?zé)o顯著差異(P＞0.05)，單籠飼養(yǎng)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以膨化玉米、海雜魚(yú)、雞肝、雞腺胃、食鹽、預(yù)混料等配制基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧;Ⅱ～Ⅹ組為試驗(yàn)組，分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加 0.4%、0.6%、0.8%磷酸(濃度≥85%)，0.5%、1.0%、1.5%檸檬酸(濃度≥99.5%)，0.5%、1.0%、1.5%乳酸(濃度≥85%)的試驗(yàn)飼糧。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.4 飼養(yǎng)管理

鮮飼料每日07:00統(tǒng)一加工，試驗(yàn)動(dòng)物由專人飼養(yǎng)，08:00、15:00各投喂1次，自由采食，保證飲水。

1.5 樣本收集

采集剛配制好的鮮料，30 min內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行pH測(cè)定;在貉生長(zhǎng)發(fā)育旺盛期于2011年9月10—13日進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)，依據(jù)消化代謝試驗(yàn)期干物質(zhì)采食量(DMI)分析飼糧適口性;2011年11月8日進(jìn)行空腹、靜脈無(wú)菌采血，14℃下4 000 r/min離心獲得血清，－20℃保存以備血清指標(biāo)檢測(cè);結(jié)合11月18日屠宰取皮獲得體長(zhǎng)、皮長(zhǎng)、體重、皮重、胴體重等生產(chǎn)性能指標(biāo)。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

采集好樣本30 min內(nèi)應(yīng)用Sartorius PB－10 pH計(jì)精確測(cè)定各組水貂飼料及胃、腸道食糜pH。應(yīng)用相關(guān)血清生化指標(biāo)測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)測(cè)定水貂血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、免疫球蛋白 G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量。體重按空腹體重計(jì)算;胴體重按剝皮后包括內(nèi)臟尸體重量計(jì);鮮皮重為剛剝下未烘干皮張凈重，應(yīng)用精確到0.1 g電子天平精確測(cè)量;體長(zhǎng)、皮長(zhǎng)均按鼻尖至尾根長(zhǎng)度，用直尺精確測(cè)量，精確到毫米。

1.7 數(shù)據(jù)整理和分析

試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，用SAS 6.12軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 酸化劑對(duì)貉飼料、胃液、腸液 pH及DMI的影響

由表2可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，添加磷酸、檸檬酸、乳酸對(duì)貉飼料、胃液pH影響極顯著(P＜0.01)，Ⅳ組飼料pH最低，Ⅶ組胃液pH最低;添加磷酸、檸檬酸、乳酸對(duì)貉腸液pH無(wú)顯著影響(P＞0.05);貉DMI隨酸化劑添加水平增加呈先上升后下降趨勢(shì)，但與對(duì)照組相比酸化劑促進(jìn)DMI增加明顯。

表2 酸化劑對(duì)貉飼料、胃液、腸液pH及干物質(zhì)采食量的影響Table 2 Effects of acidifier on the pH of diet，gastric juice and intestine juice and dry matter intake of racoon dogs

2.2 酸化劑對(duì)貉生產(chǎn)性能的影響

由表3可見(jiàn)，與對(duì)照組相比，添加磷酸、檸檬酸、乳酸對(duì)貉體重、平均日增重、胴體重、體長(zhǎng)、皮長(zhǎng)及皮重?zé)o顯著影響(P＞0.05)，但酸化促進(jìn)生產(chǎn)性能提高作用明顯，各生產(chǎn)性能指標(biāo)均伴隨酸化劑添加水平增加呈先上升后下降的變化趨勢(shì)。

表3 酸化劑對(duì)貉生產(chǎn)性能的影響Table 3 Effects acidifier on performance of racoon dogs

2.3 酸化劑對(duì)貉血清生化指標(biāo)的影響

由表4可見(jiàn)，血清TP含量與磷酸添加水平呈負(fù)相關(guān)，隨檸檬酸和乳酸添加水平增加則呈先下降后升高趨勢(shì)，Ⅳ組極顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)，Ⅲ組顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。血清ALB含量隨檸檬酸和乳酸添加水平增加呈而下降趨勢(shì)，Ⅲ、Ⅳ組極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)。各組血清UN和GLU含量無(wú)顯著差異(P＞0.05)，但隨酸化劑添加水平升高而呈先升高后降低趨勢(shì)。血清IgG含量與磷酸和檸檬酸添加水平呈負(fù)相關(guān)，隨著乳酸添加水平增長(zhǎng)呈現(xiàn)先升高后下降趨勢(shì)。各組血清IgM、T3、T4含量無(wú)顯著差異(P＞0.05)，血清 T3、T4含量變化趨勢(shì)一致，均隨磷酸添加水平增加呈先升高后降低趨勢(shì)，隨檸檬酸添加水平增加呈升高趨勢(shì)，隨乳酸添加水平增加呈先降低再升高趨勢(shì)。

表4 酸化劑對(duì)貉血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of acidifier on serum biochemical indices of racoon dogs

3 討論

3.1 酸化劑對(duì)貉飼料、胃液、腸液 pH及DMI的影響

酸化劑給飼料帶來(lái)酸性物質(zhì)，隨著其添加水平的增長(zhǎng)，酸濃度也直線提高，這就使得飼料pH與酸化劑添加水平呈負(fù)相關(guān)，且與酸化劑添加水平及酸本身特點(diǎn)如強(qiáng)度成正比，所以1.5%乳酸組pH為各組最低;胃內(nèi)容物pH受到食物因素和動(dòng)物胃液分泌水平的雙重影響，本試驗(yàn)1.5%乳酸組飼料pH最低，而胃液pH不是最低，可能是因?yàn)槿樗岢哂兴峄瘎┑奶卣魍?，還直接參加機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)循環(huán)，更容易被吸收利用，導(dǎo)致濃度降低，而檸檬酸是3種酸化劑中唯一的固態(tài)酸，緩慢溶解延后釋放，可能是其胃液pH最低的另一原因。腸道是機(jī)體進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的主要場(chǎng)所，其基本環(huán)境為堿性，如其基本平衡未被打破，其對(duì)外界影響的緩沖作用是強(qiáng)大的，所以各組間腸液pH均為近中性，組間差異不顯著。DMI是動(dòng)物狀態(tài)、環(huán)境和飼糧條件綜合作用的結(jié)果，本研究中動(dòng)物體況無(wú)差異并在相同環(huán)境下養(yǎng)殖，所以DMI差異是由飼糧條件即適口性造成的，適宜水平酸化劑使飼料適口性更佳，刺激動(dòng)物味蕾，促進(jìn)采食，而酸化劑添加水平過(guò)高，則影響適口性，DMI隨之下降。以上結(jié)果與王凱英等［7］在水貂、Zhu等［8］和兔上的研究結(jié)果一致。

3.2 酸化劑對(duì)貉生產(chǎn)性能的影響

體重、平均日增重、胴體重、體長(zhǎng)、皮長(zhǎng)、皮重等是貉生產(chǎn)性能的主要考核指標(biāo)，本試驗(yàn)結(jié)果顯示酸化劑促進(jìn)貉體重增長(zhǎng)，獲得更大尺碼皮張趨勢(shì)明顯，這可能是因?yàn)樗峄瘎└纳骑暳线m口性，提高了采食量;另外，適宜的酸化劑水平可優(yōu)化消化道酶活性，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率;研究表明酸性環(huán)境可有效抑制飼料中有害微生物生長(zhǎng)，機(jī)體健康狀況得以改善［9］。因此可確認(rèn)酸化劑可促進(jìn)生產(chǎn)性能提高，同時(shí)酸化劑水平超過(guò)機(jī)體適宜范圍就會(huì)導(dǎo)致飼料適口性降低、采食量及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化利用率下降等一系列副作用，這與Gunal等［10］、Valencia 等［11］、王凱英等［12－13］之前在肉雞、仔豬、貂上研究的變化趨勢(shì)一致。可見(jiàn)酸化劑對(duì)貉生產(chǎn)性能提高作用是明顯的，而無(wú)論磷酸、檸檬酸還是乳酸，均有其適宜使用范圍。

3.3 酸化劑對(duì)貉血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是動(dòng)物關(guān)鍵的指標(biāo)體系，是機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)狀況、健康水平、生產(chǎn)性能的反饋，是以上關(guān)鍵指標(biāo)的有力印證。TP、ALB含量升高可能是飼糧蛋白質(zhì)水平或利用率提高的結(jié)果，也可能是動(dòng)物健康狀況惡化，如機(jī)體大量失水導(dǎo)致的，綜合分析本試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平、營(yíng)養(yǎng)動(dòng)物健康狀況等，可知本研究結(jié)果的直接原因是營(yíng)養(yǎng)利用率提高。Borg 等［14］和 Malmlof［15］研究指出，UN 含量可以準(zhǔn)確反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況，較低的UN含量表明氨基酸平衡良好，機(jī)體蛋白質(zhì)合成率較高，本研究中UN含量隨酸化劑添加水平增加呈先降低后升高的變化趨勢(shì)，正好印證了在適宜的添加范圍內(nèi)酸化劑能夠促進(jìn)蛋白質(zhì)的消化率用，超過(guò)適宜水平則會(huì)影響機(jī)體消化、代謝機(jī)能，導(dǎo)致機(jī)體蛋白質(zhì)合成下降。GLU含量可反映營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化吸收及合成代謝水平，酸化劑水平適宜時(shí)GLU含量升高，超過(guò)適宜水平時(shí)合成代謝下降，GLU含量降低，這與TP、ALB、UN含量變化特點(diǎn)是相符的。T3、T4是甲狀腺主要分泌成分，能促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育，適宜水平的酸化劑能提高采食量，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)消化利用，改善機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況，促進(jìn)甲狀腺素分泌水平提高，但當(dāng)酸化劑添加水平過(guò)高造成不良影響時(shí)，T3、T4含量隨之下降，印證了刁慧等［16］在仔豬上的研究結(jié)果。本研究中IgG、IgM含量結(jié)果表明，適宜水平的酸化劑有益機(jī)體健康水平的提高，其變化規(guī)律有效的印證了Griminge［17］關(guān)于血清中高球蛋白含量意味著機(jī)體具有更強(qiáng)的疾病抵抗能力和免疫應(yīng)答功能的論述。

4 結(jié) 論

酸化劑可顯著降低貉飼料及胃液pH，對(duì)腸液pH無(wú)顯著影響;可明顯改善貉飼料適口性，促進(jìn)DMI增長(zhǎng);可顯著提高貉生產(chǎn)性能，提高機(jī)體免疫力。分析可知，貉飼糧添加1.0%乳酸綜合效果最佳。

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