潘紅炬胡 美董 禮吳建國(guó)李 蓉胡 敏衛(wèi)天喜史琳莉

（1.廣東省佛山市華潤(rùn)順?lè)逅帢I(yè)有限公司，廣東 佛山 528000；2.雅安三九藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625000）

·實(shí)驗(yàn)報(bào)告·

用于紅花注射液生產(chǎn)的紅花藥材吸光度的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

潘紅炬1胡 美2△董 禮2吳建國(guó)2李 蓉2胡 敏2衛(wèi)天喜2史琳莉2

（1.廣東省佛山市華潤(rùn)順?lè)逅帢I(yè)有限公司，廣東 佛山 528000；2.雅安三九藥業(yè)有限公司，四川 雅安 625000）

目的建立適用于紅花注射液生產(chǎn)的紅花原料吸光度的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用紫外分光光度法，追蹤紅花注射液生產(chǎn)過(guò)程吸光度指標(biāo)的變化趨勢(shì)，同時(shí)建立紅花原料吸光度檢測(cè)方法，并追蹤多批2012年至2014年紅花原料吸光度質(zhì)量情況，建立紅花原料的吸光度控制標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中檢測(cè)的吸光度指標(biāo)，在工藝過(guò)程中不斷下降；近3年紅花原料吸光度波動(dòng)較??；當(dāng)紅花原料吸光度大于0.35時(shí)，可用于紅花注射液的生產(chǎn)。結(jié)論紅花原料吸光度標(biāo)準(zhǔn)的建立，可從原料源頭控制質(zhì)量，從而保證紅花注射液成品吸光度質(zhì)量穩(wěn)定。

紅花注射液 藥材 吸光度

紅花注射液具有活血化瘀、消腫止痛的功效，主要用于治療閉塞性腦血管疾病、冠心病、心肌梗死、脈管炎，臨床上對(duì)高脂血癥、糖尿病并發(fā)癥、月經(jīng)不調(diào)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病，有良好的輔助治療作用［1］。2012年11月7日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布執(zhí)行了紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［2］（WS3-B-3825-98-2012）。該標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量控制項(xiàng)目中，有吸光度控制項(xiàng)，要求成品在（267± 1）nm下檢測(cè)，吸光度不低于0.5。為控制該指標(biāo)質(zhì)量穩(wěn)定，需要對(duì)該指標(biāo)在生產(chǎn)工藝中的變化以及原料本身的質(zhì)量進(jìn)行認(rèn)識(shí)，并制定相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。紅花注射液原料為菊科植物紅花（Carthamus tinctorius L.）。紅花藥材為活血化瘀的主要中藥之一，用于治療冠心病、腦血栓等心腦血管疾?。?］。紅花藥材國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中也對(duì)吸光度進(jìn)行了控制［4］，但該標(biāo)準(zhǔn)控制的吸光度波長(zhǎng)為518 nm，與紅花注射液吸光度波長(zhǎng)不一致，不能直觀反映用于紅花注射液的紅花藥材質(zhì)量。本文將從紅花注射液工藝過(guò)程吸光度變化進(jìn)行跟蹤，建立紅花藥材吸光度檢測(cè)方法，從而制定適合紅花注射液生產(chǎn)的紅花藥材吸光度標(biāo)準(zhǔn)，為企業(yè)的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)制定提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 中藥中試平臺(tái)提取自動(dòng)化系統(tǒng)（浙遠(yuǎn)自動(dòng)化工程技術(shù)有限公司）、安瓿聯(lián)動(dòng)灌封中試系統(tǒng)（楚天科技股份有限公司）、紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（島津UV-2600）、電子天平（Satarius，BS244S）、高速中藥粉碎

△通信作者（電子郵箱：humei@ya999.com）機(jī)（XFB-200，吉首市中誠(chéng)制藥機(jī)械廠）；水為純化水。

1.2 藥材 紅花藥材（新疆，吉木薩爾，雅安三九藥業(yè)紅花GAP基地），每年樣品各取5批。2012年至2014年紅花（7月采收），曬干，凈選后真空包裝，放于4℃冰箱冷藏保存。標(biāo)本存放于雅安三九藥業(yè)有限公司，標(biāo)本存放室。

1.3 工藝過(guò)程吸光度變化 監(jiān)測(cè)點(diǎn)根據(jù)2012年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3825-98-2012）中制法，選擇10個(gè)關(guān)鍵質(zhì)量監(jiān)測(cè)點(diǎn)，見(jiàn)表1。

表1 紅花注射液生產(chǎn)過(guò)程關(guān)鍵監(jiān)控點(diǎn)

1.4 檢測(cè)方法 取監(jiān)控加工藥液，用純化水將藥液稀釋至0.5 g/mL生藥量濃度，再用1%鹽酸調(diào)pH至（7.0±0.1），過(guò)濾，取續(xù)濾液，作供試品。按照紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（WS3-B-3825-98-2012）吸光度檢測(cè)項(xiàng)下方法，檢測(cè)供試品吸光度，記錄，即得。

1.5 藥材吸光度方法建立 1）檢測(cè)法。取紅花藥材置硅膠干燥器中干燥24 h，研成細(xì)粉［4］。取藥粉約2.50 g，分別置三角燒瓶中，精密加水50 mL，稱定質(zhì)量。連接冷凝管，置沸水浴中，加熱2 h，取出放冷，稱定質(zhì)量，以水補(bǔ)足減失質(zhì)量。過(guò)濾，精密量取續(xù)濾液2 mL置500 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液。照紫外-可見(jiàn)分光光度法，以水為空白，（267±1）nm下，測(cè)定供試品（267±1）nm處吸光度，記錄，即得。2）重復(fù)性實(shí)驗(yàn)。取紅花藥材細(xì)粉6份，照1）項(xiàng)下第1步檢測(cè)法測(cè)定吸光度，計(jì)算RSD為1.87%，表明方法重復(fù)性良好。3）穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。取重復(fù)性試驗(yàn)后樣，于0 h、2 h、4 h、8h、24 h照1）項(xiàng)下第1步檢測(cè)法測(cè)定吸光度，計(jì)算RSD為0.4%，表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

1.6 藥材質(zhì)量檢測(cè) 見(jiàn)圖1。取紅花藥材，照1.6第1步檢測(cè)法測(cè)定吸光度，267 nm處為紅花中黃酮類成分特征吸收峰。

圖1 紅花藥材提取液紫外吸收光譜（200~300 nm）

2 結(jié) 果

2.1 工藝過(guò)程吸光度變化 見(jiàn)圖2。在中試平臺(tái)，按紅花注射液標(biāo)準(zhǔn)制法生產(chǎn)3批紅花注射液，檢測(cè)10個(gè)工藝點(diǎn)樣品吸光度，以工藝點(diǎn)為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖。結(jié)果示紅花注射液生產(chǎn)過(guò)程，吸光度逐漸下降，未出現(xiàn)上升，說(shuō)明工藝過(guò)程不會(huì)造成對(duì)（267±1）nm吸光度有貢獻(xiàn)的化學(xué)成分增加；要保證產(chǎn)品吸光度質(zhì)量，控制紅花藥材吸光度是關(guān)鍵控制點(diǎn)之一。

圖2 紅花注射液工藝過(guò)程吸光度變化規(guī)律（n=3）

2.2 3年內(nèi)紅花藥材質(zhì)量檢測(cè) 見(jiàn)表2。結(jié)果示2012年、2013年、2014年 3年內(nèi)紅花藥材吸光度值在0.37～0.40之間，吸光度批間波動(dòng)較小。

2.3 近3年藥材吸光度質(zhì)量控制分析 見(jiàn)圖3。結(jié)果示最近3年藥材吸光度質(zhì)量穩(wěn)定，均在平均值±2δ范圍內(nèi)；表明GAP基地生產(chǎn)的紅花藥材吸光度質(zhì)量穩(wěn)定。

表2 3年紅花藥材吸光度檢測(cè)結(jié)果

圖3 近3年紅花藥材吸光度質(zhì)量控制圖

3 討 論

關(guān)于（267±1）nm處吸光度質(zhì)量控制的意義，王常銘等［5］在紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究中通過(guò)紅花注射液對(duì)ADP誘導(dǎo)家兔血小板聚集影響的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)——紅花注射液在 （267±1）nm處吸光度能夠反映紅花注射液的內(nèi)在質(zhì)量，因此選擇（267±1）nm處吸光度作為紅花藥材的控制標(biāo)準(zhǔn)，具有質(zhì)量控制意義。

紅花注射液中的黃酮類成分為有效成分［6］。大多數(shù)黃酮類化合物分子中存在桂皮?；捅郊柞；M成的交叉共軛體系，其紫外光譜200~400 nm的區(qū)域內(nèi)存在兩個(gè)紫外吸收帶，峰帶Ⅰ （300~400 nm）和峰帶Ⅱ（220~300 nm）［7］。說(shuō)明紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中 （267± 1）nm吸光度控制，實(shí)際是控制的黃酮類及其他具有苯甲?；牡幕瘜W(xué)成分含量。

研究以 （267±1）nm吸光度追蹤工藝過(guò)程中化學(xué)成分的變化，發(fā)現(xiàn)在整個(gè)工藝過(guò)程中，未出現(xiàn)吸光度的升高，說(shuō)明在工藝過(guò)程中對(duì)（267±1）nm吸光度有貢獻(xiàn)的化學(xué)成分無(wú)顯著產(chǎn)生，提示原料的吸光度質(zhì)量將決定紅花注射液成品的吸光度質(zhì)量，因此控制原料的吸光度穩(wěn)定和質(zhì)量下限，將有助于保證紅花注射液成品質(zhì)量。

檢測(cè)2012年至2014年紅花藥材吸光度，顯示紅花藥材年內(nèi)批間波動(dòng)較??；比較最近3年藥材吸光度水平，顯示近3年藥材吸光度無(wú)顯著性差異 （P＞0.05）；根據(jù)近3年的15批紅花藥材吸光度質(zhì)量作質(zhì)量控制圖，發(fā)現(xiàn)15批原料質(zhì)量波動(dòng)都在質(zhì)量警戒范圍（±2δ）；結(jié)合工藝過(guò)程吸光度的損失率，認(rèn)為原料吸光度應(yīng)不低于0.35，能保證紅花注射液成品吸光度質(zhì)量合格。

綜上研究和討論，本研究建立紅花藥材吸光度檢測(cè)方法及控制限度，可作為企業(yè)生產(chǎn)紅花注射液的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，也可作為評(píng)價(jià)紅花藥材質(zhì)量的依據(jù)。

［1］ 田代華.實(shí)用中藥辭典［M］.上卷.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：812.

［2］ 中國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局.WS3-B-3825-98-2012紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［S］.2012.

［3］ 武永剛，李雪瑩，王蘇麗，等.紅花黃色素化學(xué)成分及對(duì)心腦血管作用研究進(jìn)展［J］.齊魯藥事，2011，30（8）：481-484.

［4］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010版一部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：141.

［5］ 王常銘，竇愛(ài)蘭，王天玲，等.紅花注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究［J］.中成藥研究，1982，5（1）：17-19.

［6］ 劉倩，陳晨，戴忠，等.紅花注射液有效成分的確定及不同廠家中量效關(guān)系的比較［J］.藥物分析雜志，2012，32（7）：1158.

［7］ 姚新生.天然藥物化學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：184-186.

R289.5

A

1004-745X（2015）07-1197-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.07.026

2015-01-05）