朱秀梅，李樹鋒，王 軍，張順仁，蘇碧玉，彭智娥

（大理州農(nóng)業(yè)科學推廣院藥植所，云南大理671600）

瑪咖組培苗生根培養(yǎng)基的篩選研究

朱秀梅，李樹鋒，王 軍，張順仁，蘇碧玉，彭智娥

（大理州農(nóng)業(yè)科學推廣院藥植所，云南大理671600）

2012年開始對瑪咖進行了組培探索性試驗，就影響瑪咖組培苗生根培養(yǎng)基配方中活性炭、MS配方的無機鹽濃度及蔗糖用量對生根的影響進行試驗分析研究。結(jié)果表明，在瑪咖組培苗生根配方系列試驗中以不加活性炭為宜，MS培養(yǎng)基中加入蔗糖30 g/L對平均生根率誘導效果最佳。從而為瑪咖優(yōu)質(zhì)種苗的快速繁殖提供很好的技術(shù)支撐，為瑪咖產(chǎn)業(yè)的更好發(fā)展做好技術(shù)后盾。

瑪咖；組培生根；研究

瑪咖主產(chǎn)于南美洲秘魯海拔3 500～4 000 m的安弟斯高原，屬十字花科獨行菜屬一年生草本植物，現(xiàn)主要分布在秘魯中部的Puno生態(tài)區(qū)和秘魯東南部城市Puno[1]。對增強人體免疫力，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、抗衰老、抗疲勞等方面具有一定的藥用功效[2]。2002年以來，相繼在麗江和迪慶試種成功，到2011年示范推廣種植面積達400多hm2，但種子價格高，種性易退化，為了加快全州高寒山區(qū)種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的步伐，擴大山區(qū)農(nóng)民群眾增收致富的途徑，在多點試種觀察優(yōu)選瑪咖種植適宜區(qū)域的基礎(chǔ)上，開展瑪咖組培試驗研究。迄今為止，對瑪咖的研究主要集中在田間栽培技術(shù)研究、成分分析和藥理學作用等方面，對組織培養(yǎng)的系統(tǒng)研究少見報道。僅有王亞麗等研究了光質(zhì)對瑪咖愈傷組織生長、分化的影響[3]，程華等以瑪咖無菌苗的子葉為外植體進行愈傷組織誘導及形態(tài)發(fā)生研究[4]。本試驗研究目的是篩選適宜培養(yǎng)基和純化瑪咖良種特性，避免種性退化，加快瑪咖組培苗快繁工作，提供瑪咖生產(chǎn)基地組培苗，為瑪咖產(chǎn)業(yè)發(fā)展做好技術(shù)后盾。

1 材料與方法

1.1 供試材料

該試驗于2013年1-4月在大理州農(nóng)科院藥植所組培室進行，供試材料為本室的瑪咖組培瓶苗。在增殖培養(yǎng)基MS+6-BA1.0～3.0 mg+NAA0.1～2.0 mg+蔗糖30 g+瓊脂6.8 g，pH值5.8，每天光照11～12 h，光強1 000～2 000 Lx，溫度19～22℃下培養(yǎng)30～40 d。接種時剪凈苗叢枯莖葉，然后分剪成2～3 cm壯苗作接種材料。

1.2 試驗設(shè)計

本試驗分兩組，第1組：培養(yǎng)基中活性炭用量試驗。試驗采用單因素隨機區(qū)組設(shè)計，設(shè)4個處理，3次重復，即加活性炭0 g/L、0.5 g/L、1 g/L、2 g/L 4個處理。

第2組：培養(yǎng)基配方中的無機鹽濃度及蔗糖用量試驗。試驗采用2因素3水平隨機區(qū)組設(shè)計，重復3次（r=3）。培養(yǎng)基配方的無機鹽濃度（A因素）：A1（MS）、A2（1/2 MS）、A3（1/4 MS）；蔗糖用量（B因素）：B1（20 g/L）、B2（30 g/L）、B3（40 g/L）。

1.3 試驗指標及調(diào)查

生長激素選用NAA 0.2 mg/L，每個處理制作0.5 L培養(yǎng)基，每瓶接種5苗，每個處理共12瓶，在相同培養(yǎng)條件下培養(yǎng)40 d，隨機取6瓶觀察記錄，調(diào)查統(tǒng)計組培苗平均生根率，進一步作方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 培養(yǎng)基配方中活性炭對瑪咖組培苗生根的影響

由表1可見，在MS培養(yǎng)基中不加活性炭瑪咖組培苗平均生根率最高為74.7%，隨著活性炭用量的增加瑪咖組培苗平均生根率呈明顯下降趨勢，當活性炭用量為2 g/L時，所接種的瑪咖組培苗最先枯死。

表1 培養(yǎng)基配方中添加活性炭對瑪咖組培苗平均生根率的影響

表2 不同無機鹽濃度（A）和蔗糖用量（B）組合的瑪咖組培苗平均生根率

2.2 培養(yǎng)基的無機鹽濃度及蔗糖用量對瑪咖組培苗生根的影響

表2、表3分析表明，培養(yǎng)基的無機鹽濃度對瑪咖組培苗平均生根率影響差異不顯著，各水平之間沒有實質(zhì)性差異。

由表2、表3分析表明，不同蔗糖用量的瑪咖組培苗平均生根率差異顯著，培養(yǎng)基中用30 g/L蔗糖時瑪咖組培苗平均生根率最高，為64.07%，與培養(yǎng)基中用40 g/L蔗糖處理的平均生根率差異達顯著水平、與培養(yǎng)基中用20 g/L蔗糖處理的平均生根率差異達極顯著水平；培養(yǎng)基中用40 g/L蔗糖處理的平均生根率為50.79%，與培養(yǎng)基中用20 g/L蔗糖處理的平均生根率差異達顯著水平。

表3 無機鹽濃度（A）和蔗糖用量（B）不同水平下的生根率

由表4分析表明，無機鹽濃度和蔗糖用量組合A1B2、A2B2、A3B2、A2B1、A3B3、A2B3、A1B3等7個組合之間無顯著性差異，無機鹽濃度和蔗糖用量組合A1B2的生根率（74.70%）與無機鹽濃度和蔗糖用量組合A3B1的生根率（38.89%）及無機鹽濃度和蔗糖用量組合A1B1的生根率（17.22%）差異達極顯著水平。

3 討論

（1）試驗表明，在瑪咖組培苗生根培養(yǎng)基配方中隨著活性炭用量的增加瑪咖組培苗平均生根率呈明顯下降趨勢，甚至會致組培苗過早枯死。說明在瑪咖組培苗生根培養(yǎng)基配方中不宜加入活性炭。

（2）培養(yǎng)基配方的無機鹽濃度主效無顯著差異，蔗糖用量主效有顯著差異，以培養(yǎng)基加入蔗糖30 g/L對平均生根率誘導效果最佳，與加入蔗糖40 g/L有顯著差異，而與加入蔗糖20 g/L有極顯著差異。說明培養(yǎng)基加入蔗糖30 g/L對瑪咖組培苗平均生根率誘導效果最佳。

（3）影響瑪咖組培苗生根的因素很多，本試驗僅從活性炭、無機鹽濃度、蔗糖用量對平均生根率的影響進行了探索，其它相關(guān)因素及對策還有待進一步試驗完善。

[1]Quiros CF，R.Aliaga R.Maca.Andean roots and tubers：ahipa，a-acacha，maca and yacon[A].Hermann M.Heller J（Eds）.Promoting conservation and use of unde rutilized and neglected crops[C].21.Rome（Italy），1997：175-195.

[2]Ya liWang，Yuc hunWang，BrianMcNeil，et a1.Maca：Andeancrop with multi-pharmacologicalfunctions[J].FoodResearchInternational，2007，40：783-792.

[3]王亞麗，王曉東，趙兵，等.光質(zhì)對瑪咖愈傷組織生長、分化的影響[J].過程工程學報，2007，7（4）：782-785.

[4]程華，余龍江，胡瓊月，等.不定芽培養(yǎng)建立瑪咖微繁殖[J]. Agricultural science&technology，2004，5（4）：18-22.

2015－01－14

朱秀梅（1974－），女，漢族，農(nóng)藝師，主要從事藥用植物組織培養(yǎng)技術(shù)研究等工作。