麗麗 紅梅 王青春 白長(zhǎng)喜

【摘要】目的：對(duì)蒙藥吉如很新-2號(hào)復(fù)方（簡(jiǎn)稱新2號(hào)）組分治療缺血性心臟病的藥效進(jìn)行闡釋，明確復(fù)方的“主藥”和“佐藥”來(lái)優(yōu)化配伍組合，提高療效、安全性和針對(duì)性，繼而對(duì)新-2號(hào)的推廣應(yīng)用及研發(fā)新藥提供科學(xué)依據(jù)。方法：①蒙醫(yī)基礎(chǔ)理論及臨床指導(dǎo)下，利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，用寒涼性蒙藥冰片、木棉花、白檀香等制成的水煎劑灌胃大鼠，同時(shí)采用控食、驚勞等綜合方法建立心“氣虛”型心肌缺血的大鼠模型。②在上述模型上，用新-2號(hào)主要成分兔心、紫硇砂等分別進(jìn)行干預(yù)，通過(guò)檢測(cè)心電圖、血清一氧化氮（NO）、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）等指標(biāo)評(píng)價(jià)新-2號(hào)組分兔心、紫硇砂等對(duì)心“氣虛”型心肌缺血的治療作用。結(jié)果：①用上述方法制作SD大鼠心“氣虛”型心肌缺血模型成功。在上述模型上，新-2號(hào)復(fù)方的組分阿魏、白檀香、紫硇砂、白云香、木香均有改善心“氣虛”心肌缺血引起的S-T段位移的作用;新-2號(hào)組分兔心明顯改善心電圖T波、ST段改變、心率減慢（P<005），明顯升高已降低的血清NO（P<005），明顯降低已升高的血清LDH、CK含量（P<005）。結(jié)論：新-2號(hào)組分對(duì)心“氣虛”型心肌缺血有一定的治療作用，其中兔心的作用優(yōu)于上述其他組分;對(duì)新-2號(hào)的推廣應(yīng)用及研發(fā)新藥提供科學(xué)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】蒙藥;新-2號(hào);缺血性心臟病心“氣虛”證;藥理作用

【中圖分類號(hào)】R29【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2014）07-0005-03

Abstract：

Keywords：

缺血性心臟?。↖HD）包括冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（冠心病，CHD），是最常見(jiàn)、最危險(xiǎn)的一種心血管病。世界許多國(guó)家，尤其是發(fā)達(dá)國(guó)家人們的首要死因。在我國(guó)，CHD是目前主要的健康殺手之一，統(tǒng)計(jì)數(shù)字顯示，每年每105例死亡患者中有42例患者死于CHD，值得關(guān)注的是我國(guó)的CHD發(fā)病率近年來(lái)呈逐年增長(zhǎng)趨勢(shì)，且呈年輕化傾向，已成為全球性的重大的社會(huì)公共衛(wèi)生問(wèn)題，因而診斷和防治本病備受重視[1]。目前，尚缺乏療效、安全性及毒性等方面較理想的治療CHD的藥物。研制多環(huán)節(jié)、多層次、多靶點(diǎn)協(xié)同治療CHD新藥物來(lái)提高療效、安全性及減少毒副作用是世界醫(yī)藥科技研究的一個(gè)熱點(diǎn)和發(fā)展趨勢(shì)，但這種多靶型新藥尚未問(wèn)世而成為亟待解決的課題[2、3]。

蒙藥吉如很-新2號(hào)復(fù)方（簡(jiǎn)稱新2號(hào)）是目前治療心血管病的蒙藥中療效較好的典型方藥，是國(guó)醫(yī)大師蘇榮扎布教授在50多年的治療心血管病的臨床實(shí)踐中創(chuàng)造出來(lái)的驗(yàn)方，由廣棗、阿魏、沉香、野牦牛心、肉豆蔻、丁香、藏紅花、白云香、牛黃等16味藥組成，對(duì)一些心血管病包括CHD有獨(dú)特、顯著的療效，且綠色、安全、廉價(jià)，很有推廣應(yīng)用價(jià)值。但目前尚未對(duì)新2號(hào)治療缺血性心臟病包括CHD的藥理作用及其機(jī)理，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)（有效成分）等進(jìn)行現(xiàn)代科學(xué)研究和闡釋，從而嚴(yán)重影響著科學(xué)地推廣應(yīng)用新2號(hào)治療CHD及以新2號(hào)為基礎(chǔ)研發(fā)更有效、安全的治療CHD的新藥。

前期研究表明，在缺血性心臟病的大鼠模型上，新2號(hào)復(fù)方通過(guò)改善心電圖S-T段、T波改變，明顯升高已降低的血清一氧化氮（nitric oxide，NO）濃度，明顯降低已升高的血清乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）含量等藥理作用，有明顯保護(hù)缺血引起的心肌損害和心功能的作用。本研究為了進(jìn)一步探討新2號(hào)復(fù)方中各組分對(duì)治療缺血性心臟病的藥效，進(jìn)一步闡明新2號(hào)復(fù)方中的“主藥”和“佐藥”，在新2號(hào)基礎(chǔ)上研發(fā)有更好療效、安全的新蒙藥甚至多靶型分子配方創(chuàng)新藥提供線索和依據(jù)。

1材料與方法

11實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組健康SD大鼠（SPF級(jí)），體重200±20g，70只，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。分別雌雄各半，飼養(yǎng)環(huán)境為清潔級(jí)，隨機(jī)分為10組，即給藥組：新2號(hào)復(fù)方組、白云香組、兔心組、紫硇砂組、阿魏組、木香組、白澶香組、梔子組，正常組和模型組。

12實(shí)驗(yàn)儀器Sapphi re 600 全自動(dòng)生化分析儀（愛(ài)爾蘭），TU-1901紫外分光光度計(jì)（北京），GBV2258-90 離心機(jī)（河北）， JA503電子天平（上海），HH-601超級(jí)恒溫水浴鍋（江蘇），毛吸細(xì)管，BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，大鼠灌胃器。

13藥品及試劑冰片、地丁、梔子、白澶香、黃伯、木棉花、兔心、白云香、紫硇砂、阿魏、木香、梔子（呼和浩特藥品公司提供），蒙藥新2號(hào)（批號(hào)：980446，內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院提供），09%生理鹽水（批號(hào)：101101，安微雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司制），一氧化氮試劑（批號(hào)：32516181016，南京建成科技有限公司提供）。

14實(shí)驗(yàn)方法

141造模方法寒涼性蒙藥冰片、梔子、地丁、木棉花、白檀香、黃柏等按15∶15∶1∶25∶15∶1比率取出。然后粉碎成粉末，過(guò)100目篩。在60度的恒溫水浴鍋上制成30mg/ml的水煎劑[4]。除了正常組以外每組60mg/200g，每日2次/鼠，灌胃給藥4周（分別早上9點(diǎn)和下午四點(diǎn)），同時(shí)采用控食、驚勞等（時(shí)間不固定）綜合方法建立心“氣虛”型心刺痛SD大鼠模型。

142空食方法通過(guò)觀察，正常組每天30g/每只，實(shí)驗(yàn)組15g/每只。

143驚勞方法實(shí)驗(yàn)組大鼠每天固定時(shí)間游泳下沉10分鐘，以最大限度的耗竭動(dòng)物的體能。游泳標(biāo)準(zhǔn)為動(dòng)作明顯失調(diào)、慌張，鼻部在水面上下游動(dòng)10分鐘。同時(shí)采用不同時(shí)間段驚嚇的方法[5]。

144給藥方法兔心組、白澶香組、白云香組、紫硇砂組、梔子組、木香組、阿魏組從第五周開(kāi)始按體重比率分別0005g/200g、0004g/200g、0002g/200g、0002g/200g、0002g/200g、0003g/200g、07mg/200g量每天（上午10點(diǎn)和下午五點(diǎn)）給藥兩次，持續(xù)兩周。正常組給予等量的09%生理鹽水，其它組模型藥不能間斷，跟原來(lái)一樣照常給。

15觀察指標(biāo)

151心電圖分別是實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的第四周和第六周，用少量乙醚把大鼠麻醉后，仰臥位固定，將針狀電極插入四肢皮下，分別記錄20S、40S、60SⅡ?qū)?lián)心電圖。并觀察T波高度、S-T段位移和心率變化，并比較心電圖變化差異[6]。結(jié)果均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。

152血清一氧化氮含量實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的第四周和第六周，給藥完空腹12小時(shí)后眼眶取血3-5ml血液放入塑料管中靜置2-3h，待血凝后以3500 r/min離心10min，分離血清01ml，放入離心管中，置于零下80度冰箱貯藏備用。采用分光光度計(jì)比色法檢測(cè)NO含量。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明的操作程序測(cè)定大鼠血清NO。

153乳酸脫氫酶和肌酸激酶實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的第4周和6周，給藥完空腹12小時(shí)后眼眶取血3-5ml血液放入塑料管中靜置2-3h，待血凝后以3500r/min離心10min，分離血清01ml，放入離心管中，置于零下80度冰箱儲(chǔ)藏備用。

16統(tǒng)計(jì)方法學(xué)采用SPSS15統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間使用t檢驗(yàn)方法，多組間使用F檢驗(yàn)方法。P<005為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

21心“氣虛”型心肌缺血大鼠模型的建立按上述方法制作心“氣虛”型心肌缺血大鼠模型，第四周造模成功，主要依據(jù)為：模型大鼠心電圖T波、ST段改變、心率減慢，血清NO明顯降低，血清LDH、CK明顯升高，模型組上述檢測(cè)指標(biāo)第一周與第四周比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001），說(shuō)明造模成功并穩(wěn)定，模型組上述檢測(cè)指標(biāo)第四周與第六周比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005）結(jié)果見(jiàn)表1。表1心“氣虛”型心肌缺血大鼠模型建立指標(biāo)結(jié)果

檢測(cè)指標(biāo)第一周第四周第六周T波0099±00120190±0033**022±0014ST波0146±00190211±0024**0220±0025心率320±46312841±168**287±147LDH（U/L）9264±306010231±4396**10199±6694CK（U/L）6306±186791814±1368**92443±1300NO（umol/L）7500±11704117±1301**6524±1266注：與第一周比較，**P<001。22新2號(hào)組分對(duì)心“氣虛”型心肌缺血大鼠心電圖改變的影響在上述模型的基礎(chǔ)上，第四周對(duì)給藥組動(dòng)物給藥后，第6周檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)均有明顯改善心“氣虛”型心肌缺血引起的心電圖S-T段位移的作用。在第六周，模型組與正常組比較在心電圖T波、ST段改變、心率減慢（P<001），給藥組與模型組的比較新2號(hào)組、阿魏組、兔心組、白云香組、木香組心電圖T波、ST段位移差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001）。組分組與新2號(hào)組比較白澶香組與白云香組心電圖S-T段位移有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001）。經(jīng)七個(gè)新2號(hào)組分組倆倆之間比較，阿魏組、云香組、兔心組、木香組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005），均有減少心“氣虛”型心肌缺血引起的ST段位移的作用。結(jié)果見(jiàn)表2。表2新2號(hào)組分對(duì)心“氣虛”型心肌缺血

大鼠心電圖改變的影響（n=7，x±s）

組別T波ST波心率阿魏0111±0084●●**0136±0016**321±5111兔心0103±0032**0171±00421★*318±469白澶香0172±0059●●★★0187±0041288±1140●●紫硇砂0135±0046●●0195±0068★295±1130●梔子0179±0059●●★0208±0064●★285±1382●●白云香0143±0022●●**★★0158±0033**★296±885●●木香0140±0022●●**0147±0027**296±795●●模型0190±0033●●0211±0024●●287±147●●新2號(hào)01065±0016**01268±0010**3222±36**正常組00804±0015**01362±0058**3179±189**注：與模型組比較*P<005，**P<001;與正常組比較●P<005，●●P<001;與新2號(hào)組比較★P<005，★★P<001。下同。表3新2號(hào)組分對(duì)心氣虛型心肌缺血

大鼠血清NO含量的影響（n=7，x±s）

組別第六周血清NO（umol/L）阿魏3555±1120★★●●兔心 6328±798**●●白澶香4023±1101★★●●紫硇砂 3711±1075★★●●梔子 ? 3907±1070★★●● ?白云香 4396±906★★●●木香 ? 3867±1015★★●●模型 ?4059±1017●●新2號(hào)7153±2734**正常組7461±1062**注：同上。23新2號(hào)組分對(duì)心“氣虛”型心肌缺血大鼠血清一氧化氮含量的影響在上述模型的基礎(chǔ)上，第四周對(duì)給藥組動(dòng)物給藥后，第六周檢測(cè)血清NO指標(biāo)，模型組與正常組比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001），給藥組與模型組比較兔心組與新2號(hào)組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001），七個(gè)組分組跟新2號(hào)組比較跟兔心組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005）。經(jīng)七個(gè)組分組倆倆比較，兔心組改善心“氣虛”型心肌缺血引起的血清NO降低的作用。結(jié)果見(jiàn)表3。

24新2號(hào)組分對(duì)心“氣虛“型心肌缺血大鼠血清乳酸脫氫酶和肌酸激酶含量的影響在上述模型的基礎(chǔ)上，第四周對(duì)給藥組動(dòng)物給藥后，第六周檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，正常組與模型組比較血清LDH、CK含量有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001）。給藥組與模型組比較兔心組與新2號(hào)組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<001），七個(gè)組分組跟新2號(hào)復(fù)方組（簡(jiǎn)稱新2號(hào)組）比較跟兔心組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>005）。經(jīng)七個(gè)組分組倆倆比較，兔心組改善心“氣虛”型心肌缺血引起的血清LDH、CK含量升高的作用。結(jié)果見(jiàn)表4。表4新2號(hào)組分對(duì)心氣虛型心肌缺血

大鼠血清LDH和CK含量的影響（n=7，x±s）

第六周組別LDH（U/L ）CK（U/L ）阿魏10036±1901●●★★9100±748●●★★兔心 9636±1069 **●●★6619±1610●●**★白澶香10019±969●●★★9209±1210●●★★梔子10209 ±969●●★★9146±909●●★★紫硇砂10147±983●●★★9246±1147●●★★白云香10016±793●●★★ 9083±680●●★★木香10084 ±1223●●★★9161±944●●★★模型10199±6694 ●●★★92443±1300●●**正常組9236±16986360±1047新2號(hào)9476±1523●●**6377±1600●●**注：同上。3討論

蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為冠心病心絞痛屬蒙醫(yī)“心刺痛”（吉如很-哈特拉嘎）之范疇，以冠心病中的穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死可歸入心刺痛各型?！端牟酷t(yī)典》[7]、《哲對(duì)寧諾爾》[8]將心刺痛分為赫依性（或心氣虛型）心刺痛、齊素性心刺痛?！睹舍t(yī)內(nèi)科學(xué)》[9]分為赫依偏盛型、齊素偏盛型、黏性心刺痛 3 種。

為了明確新2號(hào)復(fù)方的“主藥”和“佐藥”，以蒙醫(yī)藥與現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)結(jié)合的思路與方法，用寒涼性蒙藥冰片、梔子、地丁、木棉花、白檀香、黃柏等制成的水煎劑灌胃大鼠與控食、驚勞大鼠等結(jié)合的綜合方法建立心“氣虛”型心刺痛模型，用新-2號(hào)復(fù)方的組分單味藥進(jìn)行干預(yù)并觀察了藥理作用。蒙藥方劑一般有主（君藥）、輔藥（臣藥）、佐藥、使藥等四部分組成。主藥是指對(duì)某種疾病或病變部位起到重要治療作用的方劑組份藥物;臣藥是指協(xié)同君藥增強(qiáng)其功效，對(duì)主癥和其他癥狀有治療作用的方劑組分藥物;佐藥是指具有協(xié)同君藥治療附加癥作用的方劑組分藥物;使藥是指對(duì)君、臣藥間起到橋梁作用且協(xié)調(diào)方劑各組分的藥物，它可減少劇毒藥物的毒性，緩和其烈性[12]。結(jié)果新-2號(hào)復(fù)方的組分阿魏、白檀香、紫硇砂、白云香、木香均有改善心“氣虛”型心肌缺血引起的S-T段位移的作用;新-2號(hào)組分兔心明顯心電圖T波、ST段改變、心率減慢，明顯升高已降低的血清NO，明顯降低已升高的血清LDH、CK含量。上述新-2號(hào)組分對(duì)心“氣虛”型心肌缺血有一定的治療作用，其中兔心的作用優(yōu)于上述其他組分，阿魏雖然入藥量小，但心電圖效果明顯，有待進(jìn)一步研究。蒙醫(yī)藥學(xué)認(rèn)為：兔心有鎮(zhèn)赫依，鎮(zhèn)靜，止痛等功效。為諸藥先導(dǎo)，用于治療氣喘，心刺痛，心悶、心神不安、失眠、心悸等癥。阿魏可抑赫依（理氣），祛巴達(dá)干（化痰），調(diào)胃火，消食開(kāi)胃，殺蟲，止痛。主治赫依（氣滯）引起的呵欠頻作，寒栗，腰膝關(guān)節(jié)疼痛，游走性疼痛，干嘔，心悸，心慌意亂，頭暈耳鳴，失眠，心臟赫依病，肝臟赫依病，頭赫依病及頭蟲病等。《無(wú)誤蒙藥鑒》載：“驅(qū)蟲，治寒性病，心臟赫依病”[13]。白澶香具有清搏熱、滋養(yǎng)、止痛的作用，主治心肺搏熱、熾熱、疫熱等癥。紫硇砂溫中，祛巴達(dá)干赫依，潤(rùn)腸通便，解痙，止痛。主治赫依（氣滯），刺痛。白云香祛黃水消腫、止痛、治瘡傷等功效。木香有祛巴達(dá)干、調(diào)依血相搏、活血化瘀、調(diào)和體素、止痛、化痰等功效。本研究對(duì)新-2號(hào)的推廣應(yīng)用及研發(fā)新藥提供了一些科學(xué)依據(jù)。 參考文獻(xiàn)

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（收稿日期：20140216）