時 光

（吉林警察學(xué)院，吉林 長春130117）

在命案現(xiàn)場上，常留下作案人的血手印。目前，國內(nèi)外對血潛手印顯現(xiàn)方法，在客體適用范圍、靈敏度及操作工藝等方面還存在一定不足，即對滲透性客體上的血手印具有較好顯現(xiàn)效果，而對非滲透性客體上的血手印，由于試劑極易擴(kuò)散，顯現(xiàn)效果不好。針對這個問題，將曙紅和TMB兩種顯現(xiàn)試劑顯現(xiàn)血潛手印的方法，從不同濃度和PH值對顯現(xiàn)效果的影響，以及兩種顯現(xiàn)方法的時效等方面在不同客體上做大量顯現(xiàn)實驗，然后進(jìn)行比較研究，遴選出兩種最佳顯現(xiàn)方法工藝。

一、理論基礎(chǔ)

（一）血液成分分析

人體的血液由40%～ 45%的血細(xì)胞和55%～60%的血漿組成。血細(xì)胞由紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板組成。血漿是由8%～9%的固體成分和91%～92%的水分所組成。蛋白質(zhì)占血漿中固體成分的6.5%～8.5%。蛋白質(zhì)主要有血細(xì)胞中的血紅蛋白和血漿中的白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原等。蛋白質(zhì)最主要的化學(xué)性質(zhì)就是具有酸堿兩性，而影響蛋白質(zhì)究竟呈現(xiàn)酸性還是堿性的關(guān)鍵因素就是：蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（PI）和溶液環(huán)境PH值的關(guān)系。在等電點(diǎn)時，蛋白質(zhì)的溶解度最小，最容易凝聚而沉淀，這就是用四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)時用乙醇來固定血痕的原理。

（二）曙紅顯現(xiàn)血手印基本原理

曙紅，分子式C6H8Ba14O5，分子量647.9，有藍(lán)色光澤，結(jié)晶為棕紅色粉末，易溶于水，稍溶于醇，不溶于醚。濃的水溶液為深棕紅色，淡的溶液（l∶500）為黃紅色，有綠色熒光。當(dāng)溶液的PH值小于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，蛋白質(zhì)質(zhì)子化而帶正電。蛋白顯色法的顯現(xiàn)原理，是血液中的蛋白質(zhì)在酸性染色液中呈帶正電的陽離子，能與酸性染色溶液中的負(fù)離子化合成鹽將蛋白染上顏色，從而將血手印染色。

（三）TMB試劑顯現(xiàn)血手印基本原理

四甲基聯(lián)苯胺（英文縮寫 TMB），分子式C16H20N2，是一種脂溶性較強(qiáng)的基因，反應(yīng)產(chǎn)物為深藍(lán)色。當(dāng)四甲基聯(lián)苯胺顯現(xiàn)液與血手印接觸時，新鮮血痕中的過氧化氫酶能使過氧化氫（H2O2）放出初生態(tài)的氧（O）；陳舊血痕中（血酶已失去活性）血液卟啉環(huán)上的鐵離子能起觸媒作用，使過氧化氫放出初生態(tài)氧（O）；而初生態(tài)氧則能氧化四甲基聯(lián)苯胺，使之成為四甲基聯(lián)苯胺藍(lán)，從而使血手印呈藍(lán)綠色顯出。

二、實驗材料及方法

（一）實驗器材和試劑

1．實驗器材

燒杯，量筒，玻璃棒，試劑瓶，滴管，托盤天平，表面皿，鑷子，吹風(fēng)機(jī)，數(shù)碼照相機(jī)，三角架，橡膠手套，醫(yī)用口罩。

2．化學(xué)藥品

曙紅，無水乙醇，乙酸，丙酮，蒸餾水，甲醛，巴比妥，巴比妥鈉，四甲基聯(lián)苯胺，過氧化氫。

3．試劑配方

（1）曙紅試劑配方

曙紅 0.2g，乙醇 100ml，乙酸 10ml，甲醛 5ml，巴比妥緩沖液9ml。

（2）曙紅試劑洗滌液配方

乙醇 70ml，丙酮 20ml，蒸餾水 15ml，乙酸 5ml。

（3）TMB試劑配方

甲液：TMB(四甲基聯(lián)苯胺)1g，無水乙醇100ml。

乙液：3%過氧化氫100ml。

（二）制作實驗樣本

1.收集客體

結(jié)合實際和實驗允許條件，收集10種客體：

（1）5種滲透性客體：報紙，白紙，本色木，紡織物，硬紙殼。

（2）5種非滲透性客體：玻璃，瓷磚，硬塑料片，人造革，鋁合金。

2.準(zhǔn)備實驗樣本

為了保證實驗的客觀性，捺印人在相同條件下進(jìn)行捺印，即捺印時的沾血量，捺印至顯現(xiàn)的時間間隔，以及血手印的保存條件等必須盡量一致。由于需要比較研究兩種顯現(xiàn)方法的時效，從實驗開始之前，每天捺印一部分血手印作為實驗樣本。

3.操作工藝

通過查閱曙紅和TMB顯現(xiàn)法的操作過程，加上多次實驗的經(jīng)驗教訓(xùn)，遴選出以下顯現(xiàn)操作工藝，從而提高了顯現(xiàn)效果。

（1）曙紅試劑顯現(xiàn)血潛手印的操作工藝

對滲透性客體上的血潛手印顯現(xiàn)工藝：

①用無水乙醇反復(fù)滴在血手印上進(jìn)行固定（全揮發(fā)后再滴）；

②用滴管將少量曙紅試劑滴在血手印上；

③用玻璃棒或用滴管的圓柱面輕輕在客體上滾壓使試劑分布均勻；

④將客體晾干；

⑤如果乳突紋線和客體反差不大，則用洗滌液清洗客體，可增大反差。

對非滲透性客體上的血潛手印顯現(xiàn)工藝：

①用無水乙醇反復(fù)滴在血手印上進(jìn)行固定（全揮發(fā)后再滴）；

②用滴管將少量曙紅試劑滴在血手印上；

③用流水對客體表面進(jìn)行沖洗；

④用吹風(fēng)機(jī)將剩余液體吹干；

⑤如果乳突紋線和客體反差不大，則用洗滌液清洗客體，可增大反差。

（2）TMB試劑顯現(xiàn)血潛手印的操作工藝

對滲透性客體上的血潛手印顯現(xiàn)工藝：

①用無水乙醇反復(fù)滴在血手印上進(jìn)行固定（全揮發(fā)后再滴）；

②將TMB試劑用滴管均勻地滴在被顯現(xiàn)的客體上；

③將過氧化氫溶液用滴管滴在被顯現(xiàn)的客體上；

④使兩種試劑充分混合并均勻蓋在血手印上；

⑤反應(yīng)進(jìn)行一段時間后倒掉多余試劑晾干。

對非滲透性客體上的血潛手印顯現(xiàn)工藝：

①用無水乙醇反復(fù)滴在血手印上進(jìn)行固定（全揮發(fā)后再滴）；

②用滴管將少量TMB試劑滴在血手印上；

③用玻璃棒或用滴管的圓柱面，輕輕在客體上滾壓使試劑分布均勻；

④用滴管將過氧化氫溶液滴在被顯現(xiàn)的客體上；

⑤用玻璃棒或用滴管的圓柱面輕輕在客體上滾壓，使兩種試劑充分混和均勻蓋在血手印上；

⑥反應(yīng)進(jìn)行一段時間后倒掉多余試劑晾干。

三、實驗結(jié)果及討論

（一）在滲透性客體上作兩種顯現(xiàn)方法比較

在5種滲透性客體上，用兩種顯現(xiàn)方法進(jìn)行多次顯現(xiàn)實驗。實驗結(jié)果統(tǒng)計見表1。

表1 兩種顯現(xiàn)方法在滲透性客體上顯現(xiàn)血潛手印效果比較表

對報紙、白紙和硬紙殼上的血潛手印,用TMB試劑的顯現(xiàn)效果好于曙紅試劑的顯現(xiàn)效果。用 TMB方法顯現(xiàn)雖然對血痕的固定不理想，但對白紙和硬紙殼上的血手印顯現(xiàn)盡管出現(xiàn)血痕擴(kuò)散現(xiàn)象，而顯出的血潛手印乳突紋線依然清晰連貫（圖1-2、1-4、1-10），且與客體反差較大，利于拍照固定。用曙紅方法雖然能有效地固定血手印，顯出乳突紋線的效果較好（圖1-1、1-3、1-9），可是試劑極易將客體的本底一起染色，反差不大，不利于拍照固定。

對紡織物和本色木上的血潛手印，用曙紅試劑的顯現(xiàn)效果好于TMB試劑顯現(xiàn)效果。因曙紅試劑對血液的靈敏度較高，對血痕固定效果較好，顯出的乳突紋線清晰連貫，反差大，利于拍照固定（圖1-5、1-7）。而用TMB試劑雖然對血痕固定效果不理想，出現(xiàn)擴(kuò)散現(xiàn)象，對顯現(xiàn)效果有一定影響，但顯出的乳突紋線仍然具有良好鑒定價值（圖1-6、1-8）。

圖1-1白紙上曙紅顯現(xiàn)效果

圖1-3報紙上曙紅顯現(xiàn)效果

圖1-5紡織物上曙紅顯現(xiàn)效果

圖1-7本色木上曙紅顯現(xiàn)效果

圖1-2白紙上TMB顯現(xiàn)效果

圖1-4報紙上TMB顯現(xiàn)效果

圖1-6紡織物上TMB顯現(xiàn)效果

圖1-8本色木上TMB顯現(xiàn)效果

圖1-9硬紙殼上曙紅顯現(xiàn)效果

圖1-10硬紙殼上TMB顯現(xiàn)效果

（二）在非滲透性客體上作兩種顯現(xiàn)方法比較

在5種非滲透性客體上，用兩種顯現(xiàn)方法進(jìn)行多次實驗。實驗結(jié)果統(tǒng)計見表2。

表2 兩種顯現(xiàn)方法在非滲透性客體上顯現(xiàn)血潛手印效果比較表

對瓷磚、人造革和玻璃上的血潛手印，用曙紅試劑的顯現(xiàn)效果好于 TMB試劑的顯現(xiàn)效果。曙紅試劑對血液的靈敏度很高，染色效果明顯好，和本底的反差很大，顯出的乳突紋線清晰連貫，具有很高的鑒定價值（圖2-1、2-3、2-7）。TMB試劑顯現(xiàn)血手印效果則非常不理想，試劑對血的靈敏度很低，幾乎不發(fā)生反應(yīng)。另外，血痕極易產(chǎn)生擴(kuò)散，顯出的乳突紋線不連貫，即使顯現(xiàn)之前非常明顯的血手印依舊無法顯出，沒有鑒定價值（圖 2-2、2-4、2-8）。

對硬塑料上的血潛手印，用曙紅試劑的顯現(xiàn)效果較好，但要稍差于在其他幾種客體上的顯現(xiàn)效果。試劑的靈敏度不高，顯出的乳突紋線較淡，不過依然具有鑒定條件（圖2-5）。用TMB試劑的顯現(xiàn)效果很差，不具有鑒定條件（圖2-6）。

對鋁合金上的血潛手印，用曙紅試劑的顯現(xiàn)效果依然很好，紋線清晰連貫，反差大，具有很高的鑒定價值（圖2-9）。TMB試劑的顯現(xiàn)效果一般，雖然有乳突紋線顯出，但反差小，對血液的固定效果不理想，擴(kuò)散現(xiàn)象嚴(yán)重(圖2-10)。

圖2-3人造革上曙紅顯現(xiàn)效果

圖2-5硬塑料上曙紅顯現(xiàn)效果

圖2-9鋁合金上曙紅顯現(xiàn)效果

圖2-2瓷磚上TMB顯現(xiàn)效果

圖2-4人造革上TMB顯現(xiàn)效果

圖2-6硬塑料上TMB顯現(xiàn)效果

圖2-10鋁合金上TMB顯現(xiàn)效果

四、結(jié)論

第一，對非滲透性客體上的血潛手印，一般可使用濃度0.2%的曙紅試劑顯現(xiàn)，因該試劑靈敏度高，操作簡單，保存時間長。還可根據(jù)底色的不同酌情增加曙紅試劑的濃度能達(dá)到增大反差的效果。在配置曙紅試劑時，選擇PH為8.6的緩沖液。對于本底染色嚴(yán)重的客體，降低緩沖液的PH值，能增大反差。

第二，對不同顏色滲透性客體上的血潛手印，可根據(jù)具體顏色選擇顯現(xiàn)方法。對淺色滲透性客體上的血手印，使用TMB試劑顯現(xiàn)，需選擇0.6%的濃度試劑，顯現(xiàn)后需立即拍照固定。若用曙紅試劑顯現(xiàn)時，需選擇0.2%的濃度試劑。對遺留時間較長的血手印，必須用曙紅試劑顯現(xiàn)法。

第三，用曙紅溶液顯現(xiàn)非滲透性客體上的血手印時，顯現(xiàn)前用酒精對血手印進(jìn)行多次固定，然后將試劑滴到客體上后，立即用流水對客體表面進(jìn)行沖洗，并用吹風(fēng)機(jī)把余液吹干，能增強(qiáng)顯現(xiàn)效果。

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