帕提古麗·托乎提

（新疆巴州動物疾病控制與診斷中心，新疆庫爾勒 841000）

新疆巴州地區(qū)生鮮牛乳中β﹣內酰胺酶殘留狀況調查

帕提古麗·托乎提

（新疆巴州動物疾病控制與診斷中心，新疆庫爾勒 841000）

為了解巴州地區(qū)的生鮮牛乳中β-內酰胺酶（解抗劑）殘留狀況，保證生鮮牛奶衛(wèi)生質量安全，2014年4月至10月，在巴州轄區(qū)內16個生鮮乳收購站、5個規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖小區(qū)、8個機械化擠奶廳、12個生鮮乳運輸車輛和庫爾勒市城郊周邊的29個散生鮮乳銷售點的范圍內抽取了54份生鮮乳混合樣品，采用SNAP快速檢測試劑盒進行檢測。結果檢測出β-內酰胺酶陽性的樣品2份，樣品陽性率為3.7%。這說明仍需要加強對奶牛飼料和投入品的監(jiān)督管理。此外，經實際測試，SNAP檢測試劑盒具有攜帶方便、檢測快速的特點，適用于奶站、乳制品企業(yè)、畜產品安檢等部門對大批量奶樣的檢測。

生鮮牛乳；β-內酰胺酶；解抗劑；SNAP檢測試劑盒

1 牛乳中的β﹣內酰胺酶（解抗劑）的來源

β-內酰胺酶是一種抗生素分解劑，可水解β-內酰胺類抗生素。目前，在奶牛養(yǎng)殖業(yè)中，抗生素常被用來治療奶牛各種感染性疾病，有時養(yǎng)殖戶對患乳房炎的牛用抗生素直接注射乳房部位進行治療，或在飼料中添加大劑量抗生素。青霉素作為β- 內酰胺類藥物，是治療牛乳腺炎的首選藥物，是牛奶中最常見的殘留抗生素。

由于國內多數乳品企業(yè)對抗生素殘留超標的牛乳采取降價收購的原則，出于經濟利益的驅動，一些不法奶站使用β-內酰胺酶來降解牛乳中殘留的抗生素，生產人造“無抗奶”，致使抗生素酶解后的殘留物進入乳制品，對人體健康造成傷害，同時也可能造成病菌的耐藥。

2009年2月，衛(wèi)生部等九部門組成的全國打擊違法添加非食用物質和濫用食品添加劑專項整治領導小組在公布的《食品中可能違法添加的非食用物質名單（第二批）》中，將β-內酰胺酶列入乳與乳制品掩蔽抗生素的違法添加的非食用物質，規(guī)定嚴厲禁止添加于食品中，并要求各相關部門嚴格檢測。

2 檢測原理

在奶樣中添加一定量的β-內酰胺抗生素，采用免疫層析技術，在一定溫度下，經一定時間的反應。如果樣品中含有β-內酰胺酶，那么奶樣中的抗生素會被β-內酰胺酶催化分解，造成抗生素消失或濃度降低。再采用SNAP抗生素快速檢測試紙盒配備專用β-內酰胺酶西林瓶試劑快速檢測奶樣，如未檢出抗生素，則奶樣中含有β-內酰胺酶；如檢出抗生素，則奶樣中不含β-內酰胺酶（基于本法檢出限）。利用β-內酰胺酶可分解奶及奶制品中的β-內酰胺類抗生素的原理，通過測定β-內酰胺酶降解后的β-內酰胺類抗生素的殘留量，定性判定奶及奶制品中有無β-內酰胺酶。

3 材料

3.1 儀器和試劑

美國安普生化科技有限公司生產的（45±5）℃專用SNAP配套加熱器、SNAP讀數儀、SNAP抗生素快速檢測試劑盒、SNAP試劑盒專用β-內酰胺酶西林瓶、1mL移液器。

3.2 檢測基質

新鮮混合牛奶樣品。

3.3 樣品的采集

2014年4月至10月，在巴州轄區(qū)內16個生鮮乳收購站、5個規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖小區(qū)、8個機械化擠奶廳、12個生鮮乳運輸車輛和庫爾勒市城郊周邊的29個散生鮮乳銷售點范圍內共抽54份生鮮乳混合樣品，按規(guī)定進行冷藏保存運輸，送巴州動物疾病控制與診斷中心畜產品實驗室，當天采用SNAP快速檢測試劑盒進行β-內酰胺酶殘留檢測。

4 檢測方法

4.1 取出適量SNAP抗生素快速檢測試紙盒鋁箔袋和裝有β-內酰胺酶試劑的西林瓶，待其恢復至室溫（25±2）℃。打開SNAP快速檢測溫育器，設置溫度為（45±5）℃，溫度穩(wěn)定后待用；待西林瓶溫度恢復到正常室溫后，打開西林瓶，將牛奶樣品搖勻后慢慢吸取3mL加入到裝有β-內酰胺酶試劑西林瓶中，搖晃西林瓶使試劑溶解。將含有試劑和奶樣的西林瓶放置到預熱的SNAP加熱器的加熱板上，確保溫度在（45±5）℃，保持30 min；孵育完成后，將西林瓶放入0～8℃的冰箱中冷藏至少6 min；打開SNAP抗生素快速檢測試劑盒鋁箔袋，從鋁箔袋中取出試劑盒，置于桌面上。從冰箱中取出奶樣，用移液器吸?。?50±50）μL加入到內含藍色顆粒的樣品管中，充分振蕩；將樣品管中的樣品倒入SNAP抗生素快速檢測試劑盒的樣品孔，樣品流過結果顯示窗并流向藍色激活環(huán)。

4.2 當樣品流動到試劑盒上的藍色激活環(huán)，但藍色激活環(huán)尚未完全消失時，立即將試劑盒上的按鍵按至底部，直至激活鍵與SNAP試劑盒保持齊平。

4.3 激活6分鐘后，用專門SNAP試劑盒快速讀數儀讀取結果，在1分鐘內判定結果。

4.4 結果判讀。SNAP讀數儀判定：讀數儀讀數＞1.05為陰性；讀數儀讀數≤1.05為陽性；

讀數儀陰性，判定β-內酰胺酶陽性；讀數儀陽性，判定β-內酰胺酶陰性。

4.5 目測判定。樣品點比對照點的顏色淺：β-內酰胺酶陰性；樣品點比對照點的顏色深或相同：β-內酰胺酶陽性；如果對照點未顯色，重新檢測樣品。

5 檢測結果

在54份混合生鮮乳樣品中檢測出β-內酰胺酶陰性樣品52份，陽性樣品2份，生鮮乳樣品的β-內酰胺酶陽性率為3.7%。

6 結論

6.1 從2014年抽的54份生鮮乳混合樣品中檢測出2份β-內酰胺酶陽性樣品，說明必須加強對巴州轄區(qū)內的奶站、養(yǎng)殖小區(qū)、機械化擠奶廳、生鮮乳運輸車輛和牛奶散售點的生鮮乳檢測力度，以及奶牛養(yǎng)殖業(yè)中奶牛飼料和投入品的監(jiān)督管理，杜絕在這些環(huán)節(jié)的生鮮牛乳中違法添加違規(guī)藥品和違禁物品。

6.2 SNAP檢測試劑盒便于攜帶且裝置完備，對奶站、奶牛養(yǎng)殖小區(qū)、奶糟、奶缸、運輸車輛、零售點的生鮮牛奶，均可立即檢測。SNAP檢測試劑盒能夠在10分鐘內提供結果，無需測量試劑，是大批量檢測的理想選擇。SNAP檢測試劑盒可適用于奶站、乳制品企業(yè)、畜產品安檢部門。

Investigation of β-Lactamase Residue in Fresh Milk in Bazhou，Xinjiang

Patiguli·Tuohuti
（Bazhou Animal Disease Control and Diagnostic Center，Kurle，Xinjiang 841000）

In order to understand the β-lactamase（solution antagonist）residuein fresh milk in Bazhou，Xinjiang，and to ensure the fresh milk safety，54 milk composite samples were collected from the 16 fresh milk collecting stations、5 scale dairy farming districts，8 mechanized milking halls，12 fresh milk transportation vehicles and 29 bulk milk sales points around Korla suburbs from April to October 2014 for detection of β-lactamase residue with rapid SNAP detection kit.The results showed that 2 samples were β-lactamase positive in 54 samples with a positive rate of 3.7%，suggesting that the supervision and management of dairy cattle feed and inputs need to be strengthened.

fresh milk；β-lactamase；solution antagonist；SNAP detection kit

S851.2

B

1005-944X（2015）10-0019-02

[1]高延玲，劉宏偉，班付國，等. 生鮮奶中β-內酰胺酶殘留情況調查及來源分析[J]. 上海畜牧獸醫(yī)，2010，（6）：20-21.

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朱迪國）