沙 瑩，方 鑒，趙玉培，林明琴

（1．海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥理學(xué)教研室，海南海口 571101；2．?？谑兄扑帍S，海南?？?570311；3．中國藏學(xué)研究中心北京藏醫(yī)院，北京 100029）

注射用多尼培南體外抗菌活性研究

沙 瑩1，2，方 鑒3，趙玉培3，林明琴1

（1．海南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥理學(xué)教研室，海南?？?571101；2．?？谑兄扑帍S，海南?？?570311；3．中國藏學(xué)研究中心北京藏醫(yī)院，北京 100029）

Antibacterial activity of doripenem in vitro

SHA Ying1，2，F(xiàn)ANG Jian3，ZHAO Yu-pei3，LIN Ming-qin1
（1．Dept of Pharmacology，Pharmacy School，Hainan Medical U-niversity，Haikou 571101，China；2．Haikou Pharmaceutical Factory Co．Ltd．，Haikou 570311，China；3．Tibetan Studies Center of Beijing Tibetan Hospital，Beijing 100029，China）

網(wǎng)絡(luò)出版時間：2015－7－22 10：42 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20150727．0901．033．html

多尼培南為碳青霉烯類抗生素，目前在國內(nèi)尚未上市，其注射劑臨床用于治療復(fù)雜性腹內(nèi)感染和泌尿道感染［1］。對注射用多尼培南進(jìn)行體外抗菌活性研究，可為其進(jìn)一步的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。

1　材料與方法

1．1藥品 注射用多尼培南，批號：20120101，規(guī)格：0．25 g，?？谑兄扑帍S有限公司提供；注射用美羅培南，批號：120101，規(guī)格：0.25 g，海口市制藥廠有限公司生產(chǎn)；注射用亞胺培南西司他丁鈉，批號：110302，規(guī)格：1．0 g，浙江海正藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；注射用頭孢曲松鈉，批號：B110337415，規(guī)格：1.0 g，哈藥集團(tuán)制藥總廠生產(chǎn)。

1．2培養(yǎng)基 瓊脂培養(yǎng)基、MH營養(yǎng)肉湯、MH瓊脂培養(yǎng)基為北京三藥科技開發(fā)公司產(chǎn)品；HTM藥敏瓊脂培養(yǎng)基為英國OXOID公司產(chǎn)品；干酵母為英國OXOID公司產(chǎn)品；牛血清為北京元亨金馬生物科技有限公司產(chǎn)品。

1．3實(shí)驗(yàn)菌株 北京地區(qū)醫(yī)院2012～2013年臨床分離菌株，G＋菌120株，G－菌380株。標(biāo)準(zhǔn)菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、ATCC35218、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC29212。

1．4最低抑菌濃度（MIC）測定［2］采用瓊脂平皿倍比稀釋法，用多點(diǎn)接種儀點(diǎn)種，接種量為104CFU，35℃培養(yǎng)18～24 h后觀察結(jié)果。無菌生長的平皿所含藥物的最小濃度為MIC。

1．5最低殺菌濃度（MBC）測定［3－4］采用肉湯稀釋法測定MIC，再將未見細(xì)菌生長的各管培養(yǎng)液分別吸取0.1 mL，轉(zhuǎn)種到不含藥物的瓊脂平皿中，35℃培養(yǎng)18～24 h后觀察結(jié)果，菌落數(shù)小于5個的平皿所對應(yīng)的藥物濃度為MBC。

1．6MIC影響因素試驗(yàn)［5－6］以大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌為實(shí)驗(yàn)菌，分別測定不同pH值、不同細(xì)菌接種量及不同血清含量，多尼培南對實(shí)驗(yàn)菌的MIC。

1．7誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)［7］以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為實(shí)驗(yàn)菌，分別接種到含1／2 MIC多尼培南的MH肉湯中，在MH肉湯中傳代培養(yǎng)，每隔3 d轉(zhuǎn)種1次，共5次，15 d后采用瓊脂二倍稀釋法測定多尼培南對各菌株的MIC，觀察藥物對受試菌的誘導(dǎo)耐藥情況。

2　結(jié)果

2．1抗菌活性 多尼培南對MSSA及MRSA抗菌活性略優(yōu)于美羅培南，明顯優(yōu)于亞胺培南西司他丁和頭孢曲松；對MSSE略優(yōu)于美羅培南和亞胺培南西司他丁，優(yōu)于頭孢曲松；對MRSE均優(yōu)于各對照藥；對化膿性鏈球菌的活性與美羅培南和亞胺培南西司他丁相當(dāng)，優(yōu)于頭孢曲松；對糞腸球菌和屎腸球菌抗菌活性弱，與各對照藥相當(dāng)；對G－菌的抗菌活性優(yōu)于或相當(dāng)于美羅培南和亞胺培南西司他丁，明顯優(yōu)于頭孢曲松。

2．2MIC影響因素 當(dāng)pH值在5.0～9.0時，多尼培南對受試菌的MIC值變化均在2倍以內(nèi)，pH值為5．0時抗菌活性較好；當(dāng)細(xì)菌接種量為106～1010CFU·L－1時，MIC值變化均在1～2倍，接種量為106CFU·L－1時抗菌活性較好；當(dāng)MH肉湯培養(yǎng)基的血清體積分?jǐn)?shù)為0.50或0.75時，受試菌的MIC值比血清體積分?jǐn)?shù)為0.00及0.25時增加一倍。

2．3誘導(dǎo)耐藥 誘導(dǎo)前后，多尼培南對大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌MIC變化不明顯。

3　討論

多尼培南對G－及G＋致病菌株均有強(qiáng)的抑菌或殺菌作用，其抗菌活性不易受pH值、細(xì)菌接種量及誘導(dǎo)耐藥影響。

結(jié)果提示，?？谑兄扑帍S有限公司研制的注射用多利培南對北京地區(qū)醫(yī)院近兩年臨床分離的致病菌株有良好的體外抗菌活性，其抗菌作用均衡，可進(jìn)一步開展體內(nèi)藥效研究。

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中國圖書分類號：R944．11；R978．11

關(guān)鍵詞：多尼培南；抗菌活性；體外抗菌；MIC；MBC；碳青霉烯類

Key words：doripenem；antibacterial activity；in vitro antibiotic；MIC；MBC；carbapenems

作者簡介：沙 瑩（1968－），女，高級制藥工程師，研究方向：新藥開發(fā)，E-mail：sha-ying＠126．com；林明琴（1972－），女，碩士，副教授，研究方向：藥理學(xué)，通訊作者，E-mail：lin-mingqin＠163．com

基金項(xiàng)目：海南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 813186）

收稿日期：2015－05－14，修回日期：2015－06－12

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001－1978（2015）08－1179－02

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．08．030