吳琪珍，張朝鳳，許翔鴻，張 勉

(中國(guó)藥科大學(xué) 生藥學(xué)研究室， 江蘇 南京 211198)

款冬花化學(xué)成分和藥理活性研究進(jìn)展

吳琪珍，張朝鳳，許翔鴻，張 勉*

(中國(guó)藥科大學(xué) 生藥學(xué)研究室， 江蘇 南京 211198)

款冬花是菊科植物款冬TussilagofarfaraL. 的干燥花蕾，為傳統(tǒng)止咳藥物。近幾年來(lái)關(guān)于款冬花的研究重點(diǎn)是倍半萜、酚酸和款冬多糖，在抗腫瘤、抗結(jié)核及神經(jīng)保護(hù)等活性研究方面有了新的進(jìn)展。本文就近年來(lái)款冬花化學(xué)成分與藥理活性的研究進(jìn)行了簡(jiǎn)要綜述。

款冬花；化學(xué)成分；藥理活性

款冬花為菊科植物款冬(TussilagofarfaraL.) 的干燥花蕾。每年12月或地凍前當(dāng)花尚未出土?xí)r采挖，除去花梗及泥沙，陰干[1]?？疃ㄐ?、甘而溫，無(wú)毒；主治潤(rùn)肺下氣，化痰止嗽。治咳逆喘息，喉痹[2]?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》稱款冬花為“治嗽之最”，尤其是款冬有甘溫清補(bǔ)的功效，因此古今常用。隨著現(xiàn)代研究的發(fā)展，從款冬花中分離得到了各種化學(xué)成分，包括倍半萜、黃酮、有機(jī)酸等，款冬花的一些新的藥理作用也漸漸發(fā)掘，為傳統(tǒng)中藥的現(xiàn)代應(yīng)用提供了廣闊的前景。本文主要對(duì)款冬花的化學(xué)成分及近年來(lái)的藥理研究進(jìn)行綜述，為款冬花的深入研究和開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1 萜類

款冬花中的萜類主要有三萜和倍半萜類成分。三萜如山金車(chē)二醇、款冬二醇，款冬巴耳新二醇(bauer-7-ene-3,16-diol)，巴耳三萜醇(bauenenol)和異巴耳三萜等[3]。

倍半萜有：tussilagonone (1)、tussilagone (2)、 7β-(3-ethyl-cis-crotonoyloxy)-1alpha-(2-methylbutyryloxy)-3,14-dehydro-Z-notonipetranone (3)、8-angeloylxy-3,4-epoxy-bisabola-7(14),10-dien-2-one (4)[4]、1α,5α-bisacetoxy-8-angeloyloxy-3β,4β-epoxy-bisabola-7(14),10-dien-2-one(5)、7β-(4-methylsenecioyloxy)oplopa-3(14)E,8(10)-dien-2-one(6)、7β-senecioyloxyoplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(7)、1α-7β-di(4-methulsenecioyloxy)oplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(8)、(3R,4R,6S)-3,4-epoxybisabola-7(14),10-dien-2-one (9)、(1R,3R,4R,5S,6S)-1-acetoxy-8-angeloxoyloxy-3,4-epoxy-5-hydroxybisabola-7(14),10-dien-2-one(10)、14(R)-hydroxy-7β-isovaleroyloxyoplop-8(10)-en-2-one(11)、1α-(3″-ethyl-cis-crotonoyloxy)-8-angeloyloxy-3β,4β-epoxy-bisabola-7(14),10-diene(12)、 7β-angeloyloxy-14-hydroxy-notonipetranone(13)[5]、1α-hydroxy-7β-(4-methylsenecioyloxy)-oplopa-3(14)Z,8(10)-dien-2-one(14)[6]等。

1.2 黃酮類

款冬花中含有大量黃酮類化合物，如：槲皮素，異槲皮素苷(isoquercitrin)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素4′-O-β-D-葡萄糖苷、金絲桃苷、蘆丁、山柰酚和山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、柯伊利素(chryserol)、木犀草素(Luteolin)、橙皮苷、芹菜素-7-甲醚、芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷(apisenin-7-O-β-D-glucopyranoside)等[7-8]。

1.3 酚酸類

酚酸類成分主要有咖啡酸衍生物，如咖啡酸、咖啡酸甲酯、咖啡酸乙酯、(E)-2,5-二羥基桂皮酸、綠原酸、3-O-咖啡?；鼘幩帷?-O-咖啡?；鼘幩峒柞?、3,4-二咖啡酰基奎尼酸、3,5-二咖啡?；鼘幩?、4,5-二咖啡酰基奎尼酸、3,4-O-二咖啡?；鼘幩峒柞ァ?,5-O-二咖啡?；鼘幩峒柞?、4,5-O-二咖啡?；鼘幩峒柞7-9]。此外，Liu Yufeng等[10]從款冬花中分離得到反式阿魏酸、異阿魏酸、反式咖啡酸、鄰苯二甲酸、對(duì)羥基苯甲酸、沒(méi)食子酸等。

1.4 生物堿類

款冬花主要含有腎形千里光堿(senkirkine)和千里光寧(senecionine)，二者均為有毒的吡咯里西啶類生物堿[11]。濮社班等[12]從款冬花中分離得到tussilagine、tussolaginine、isotussilagine和isotussolaginine。

1.5 揮發(fā)油類

余建清等[13]對(duì)款冬花揮發(fā)油進(jìn)行了研究，通過(guò)GC-MS鑒定了52種化合物，占揮發(fā)油總量90.20%，化合物類型主要是倍半萜及鏈狀烯烴，主要含有的揮發(fā)油有：α-十一烯(12.93%)、β-紅沒(méi)藥烯(9.12%)、1,10-十一二烯(7.56%)、環(huán)十一烯(5.66%)、斯巴醇(5.26%)、二表-α-香松烯環(huán)氧化物(4.99%)、欖香烯(4.32%)及反-10-甲基-內(nèi)-三環(huán)[5.2.1.0(2.6)]癸烷(3.36%)。

1.6 甾體及其他

劉可越等[14]從款冬花中分離得到常見(jiàn)的甾體類化合物，如：β-谷甾醇、麥角甾醇、豆甾醇、α-菠甾醇、豆甾醇-β-D-葡萄糖苷、胡蘿卜苷和α-菠甾醇-β-D-葡萄糖苷。此外，款冬花中還含有其他類型成分，比如核苷酸、葡萄糖、氨基酸等。

2 藥理活性

2.1 止咳、祛痰和平喘作用

傳統(tǒng)中藥方劑中，款冬花主要功效為“潤(rùn)肺下氣，止咳化痰，用于新久咳嗽，喘咳痰多，勞嗽咳血”[1]。東歐一些地區(qū)亦用款冬花或葉的制劑治療氣管炎、咽炎及支氣管哮喘[15]。吳笛等[16]通過(guò)豚鼠離體氣管條實(shí)驗(yàn)表明，款冬酮和克氏千里光堿具有一定的解痙作用，這或許和款冬的平喘作用有關(guān)。Li Zhenyu 等[17]通過(guò)款冬花蕾和花梗的代謝組學(xué)分析和藥效比較發(fā)現(xiàn)，款冬花中含有大量的綠原酸、3,5-二咖啡酰奎寧酸、蘆丁，可能為款冬花止咳藥效成分。

2.2 抗炎作用

Lim等[18]發(fā)現(xiàn)，倍半萜類化合物款冬酮能抑制LPS刺激BV-2小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞引起的 iNOS及 COX-2表達(dá)，從而抑制炎癥因子的釋放。Cheol Hwangbo等[19]則研究了款冬酮的抗炎機(jī)制，發(fā)現(xiàn)款冬酮是通過(guò)誘導(dǎo)血紅素氧合酶-1(HO-1)的釋放從而產(chǎn)生抗炎效果。此外，體外抗炎實(shí)驗(yàn)研究表明，款冬花中分離得到的三種新的倍半萜類化合物能夠抑制LPS誘導(dǎo)的 RAW 264.7細(xì)胞NO釋放，進(jìn)一步證實(shí)了款冬花具有抗炎作用[6]。

2.3 抗腫瘤作用

款冬多糖和款冬酮具有抗腫瘤的作用。細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，款冬粗多糖能誘導(dǎo)人白血病K562細(xì)胞的凋亡[20]，且對(duì)人非小細(xì)胞肺癌A549生長(zhǎng)及凋亡實(shí)驗(yàn)證明，款冬花多糖劑量依賴性地抑制A549細(xì)胞24h增殖(P<0.05)，并可誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡，同時(shí)上調(diào)p53基因表達(dá)、下調(diào)bcl-2基因表達(dá)[21]。余濤等對(duì)款冬多糖抗腫瘤進(jìn)行了小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，以小鼠鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(H22)瘤株及小鼠網(wǎng)狀細(xì)胞白血病(L615)瘤株造模，結(jié)果發(fā)現(xiàn)款冬花多糖對(duì)S180、H22小鼠的抑瘤率分別為55.76%、45.61%；對(duì)L615白血病小鼠生命延長(zhǎng)率>55.76%[22]。這些研究表明款冬多糖具有抗腫瘤的效果。

Li等[23]發(fā)現(xiàn)款冬酮有抗抗結(jié)腸癌的作用，降低β-catenin活性，同時(shí)能夠降低 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路目標(biāo)基因 cyclin D1 和 c-myc的表達(dá)，從而抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖。此外，從500個(gè)天然產(chǎn)物的ELISA系統(tǒng)活性篩選發(fā)現(xiàn)，款冬花對(duì)TRAIL具有增敏作用[24]。TRAIL 通路是未來(lái)發(fā)展抗癌藥的一個(gè)非常重要的通路，因?yàn)樗苓x擇性地誘發(fā)癌細(xì)胞凋亡，對(duì)抗腫瘤研究具有重要意義。

2.4 抗結(jié)核作用

款冬的正己烷部位和乙酸乙酯部位顯示有抗結(jié)核的作用。其中，對(duì)香豆酸單獨(dú)給藥或?qū)ο愣顾崤c對(duì)羥基苯甲酸混合給藥表現(xiàn)出最強(qiáng)的抗結(jié)核作用[25]。

2.5 神經(jīng)保護(hù)作用

款冬提取物具有神經(jīng)保護(hù)作用，有可能用于神經(jīng)退行性疾病的治療[26]。Lim等[27]從款冬花中分離得到4個(gè)倍半萜化合物，能抑制LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞NO、PGE2及活性氧(ROS)的釋放，并且通過(guò)抑制NF-κB通路及清除ROS而抑制LPS誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞死亡。馮延瓊等[28]利用熒光光譜法初步分析發(fā)現(xiàn)款冬提取物與“節(jié)點(diǎn)蛋白”P(pán)ICK1的結(jié)合位點(diǎn)位于PDZ結(jié)構(gòu)域，款冬提取物能有效抑制PDZ結(jié)構(gòu)域與GluR2的相互作用。在GluR2下調(diào)引起興奮性毒性而產(chǎn)生的多種神經(jīng)性疾病中，PICK1的PDZ結(jié)構(gòu)域是一個(gè)潛在的藥物靶標(biāo)。

2.6 減肥作用

大鼠肝臟肝微粒體和HepG2 細(xì)胞肝微粒體的體外 DGAT (甘油酰基轉(zhuǎn)移酶)實(shí)驗(yàn)篩選結(jié)果表明，款冬酮能有效抑制DGAT1 的產(chǎn)生，同時(shí)能顯著抑制甘油三脂的合成，預(yù)示款冬酮可能成為治療肥胖或二型糖尿病的先導(dǎo)化合物[29]。Gao Hong等[30]從50個(gè)傳統(tǒng)中藥中篩選發(fā)現(xiàn)款冬花甲醇提取物具有抗α-葡萄糖苷酶活性，并且從中分離得到四個(gè)化合物，其中3,4/3,5/4,5/-二咖啡酰奎寧酸具有明顯的抑制麥芽糖酶活性，其構(gòu)效關(guān)系表明連接在奎寧酸母核上的咖啡?；鶊F(tuán)對(duì)活性十分重要。

2.7 抗菌作用

Luká? Hleba等[31]對(duì)斯洛伐克幾種野生藥用植物進(jìn)行了抗菌活性篩選，發(fā)現(xiàn)款冬花提取物具有最強(qiáng)烈的抗菌活性。從款冬花提取物中鑒別出槲皮素、山奈酚及幾種酚酸類化合物，其中槲皮素和咖啡酸含量最高，可能為抗菌有效成分。

3 安全性評(píng)價(jià)

款冬花中含有西啶生物堿，可引起肝臟毒性，這是人們對(duì)款冬花存在質(zhì)疑的最主要原因。張燕等[32]探討了款冬花提取物、總生物堿部位、非生物堿部位和克氏千里光堿(senkirkine)對(duì)小鼠肝臟的毒性作用。結(jié)論在所給劑量下，水提液無(wú)肝臟毒性，用藥安全；總生物堿、克氏千里光堿有明顯的肝臟毒性。

然而多年的臨床應(yīng)用中，款冬花復(fù)方并未發(fā)現(xiàn)有不良反應(yīng)。在中國(guó)藥典中，款冬花為“無(wú)毒”，并沒(méi)有特別規(guī)定；在Australian SUSMP 中，款冬花屬于不在違禁物質(zhì)的范疇，可以使用。現(xiàn)代藥理研究顯示，款冬花水提液口服給藥，小鼠的LD50為124 g/kg，人體理論等效劑量為603.2 g/60kg；乙醇提取物腹腔注射LD50為112 g/kg，人體理論等效劑量為544.9 g/60 kg；醚提取物靜脈注射LD50為43 g/kg，人體理論等效劑量為209.2 g/60 kg[33]。這些LD50值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中國(guó)藥典規(guī)定的款冬常用劑量5～10 g，因此，正常范圍內(nèi)使用款冬用藥是安全的。不過(guò)，在款冬花制劑工藝過(guò)程中，要注意加強(qiáng)對(duì)肝毒性生物堿含量的監(jiān)測(cè)，確保用藥安全。

4 結(jié)語(yǔ)與展望

款冬花為傳統(tǒng)止咳化痰良藥，臨床常與紫菀配伍使用，《本經(jīng)疏證》曰：“《千金》、《外臺(tái)》，凡治咳逆久咳，并用紫菀、款冬者十方二九?！彪S著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)款冬花的質(zhì)量評(píng)價(jià)和藥效評(píng)估有了更為嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)手段，同時(shí)，從款冬花中分離得到了各種化學(xué)成分，浸膏與植物單體的共同研究讓款冬花走出了傳統(tǒng)用藥的局限，不再是單一的止咳平喘藥物，而是在抗腫瘤，抗氧化，神經(jīng)保護(hù)等多個(gè)方面顯示出了良好的藥理活性。希望款冬花的這些作用能夠得到更深入的研究，與臨床相結(jié)合，為傳統(tǒng)中藥的現(xiàn)代化應(yīng)用做出貢獻(xiàn)。

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Advances in the Chemical Constituents and Biological Activitiesof the Flower Buds ofTussilagofarfara

Wu Qizhen, Zhang Chaofeng, Xu Xianghong, Zhang Mian*

(Research Department of Pharmacognosy, China Pharmaceutical University, Nanjing 211198, China)

The flower buds ofTussilagofarfaraL. is one of traditional Chinese medicines for the treatment of cough, phlegm, bronchitic and asthmatic conditions. The recent researches were focused on sesquiterpene, phenolic acids and polysaccharide, which had various new pharmacological activities such as antineoplastic, antituberculotic and neuroprotection effects. This review devoted to illustrate the recent progresses on the chemical constituents and biological activities ofTussilagofarfara.

Tussilagofarfara; chemical constituents; biological activities

2014-07-19

吳琪珍(1990-)，女，在讀碩士研究生。研究方向：中藥活性成分與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail：wuqizhen2012@163.com

*通訊作者：張勉(1962-)，女，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥活性成分與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail：mianzhang@126.com

10.3969/j.issn.1006-9690.2015.02.009

R284;R285

A

1006-9690(2015)02-0033-04