劉　丹，武　燁，劉　鑫，劉慧榮△(首都醫(yī)科大學，北京00069)

小鼠Omi/HtrA2基因啟動子螢光素酶報告載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)錄活性分析*

劉丹1，武燁1，劉鑫1，劉慧榮1△
(首都醫(yī)科大學，北京100069)

目的:通過構(gòu)建小鼠Omi/HtrA2基因啟動子螢光素酶報告載體并進行轉(zhuǎn)錄活性分析，深入研究小鼠Omi/HtrA2轉(zhuǎn)錄調(diào)控發(fā)生的機制。方法:本實驗構(gòu)建覆蓋小鼠Omi/HtrA2基因5’側(cè)翼區(qū)(－1 205 bp～+93 bp)區(qū)域的一系列啟動子螢光素酶報告基因載體，將其轉(zhuǎn)染至小鼠成纖維細胞NIH3T3、大鼠心肌細胞H9c2和人胚腎細胞HEK293，并進行螢光素酶活性檢測。結(jié)果:小鼠Omi/HtrA2啟動子在－1 205 bp～－838 bp和－146 bp～+93 bp區(qū)域活性最高，生物信息學分析這些啟動子區(qū)域可能存在HSF1、SP1、AP、p53等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。結(jié)論:初步證實－1 205 bp～－838 bp和－146 bp～+93 bp區(qū)域為CFL2啟動子的活性區(qū)域。

國家自然科學基金資助項目(No.81270283)

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