韓蘭秀，王　瓊，茅衛(wèi)東(綜述)，張學(xué)光(審校)

(1.東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬江陰醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室，江蘇 江陰 214400； 2.江蘇省臨床免疫研究所，江蘇 蘇州 215000)

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細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞在胃癌治療中的作用及臨床應(yīng)用

韓蘭秀1△，王瓊1，茅衛(wèi)東1(綜述)，張學(xué)光2※(審校)

(1.東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬江陰醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室，江蘇 江陰 214400； 2.江蘇省臨床免疫研究所，江蘇 蘇州 215000)

摘要：細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK細(xì)胞)被稱為自然殺傷T細(xì)胞，其殺傷腫瘤的作用不受主要組織相容性復(fù)合體的限制，是過繼細(xì)胞免疫治療的代表類型。CIK細(xì)胞通過分泌細(xì)胞毒顆粒及細(xì)胞因子、調(diào)節(jié)癌基因表達(dá)、活化NKG2D受體等發(fā)揮抗腫瘤作用。CIK細(xì)胞聯(lián)合化療，不僅可以延長胃癌患者的無病生存期和總生存期，改善生活質(zhì)量，而且不良反應(yīng)少，治療耐受性較好。雖然CIK細(xì)胞治療已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，但仍有很多問題需要進(jìn)一步探討。

關(guān)鍵詞：胃癌；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞；過繼細(xì)胞免疫治療

近年來，隨著膳食習(xí)慣的變化及幽門螺桿菌的定植，胃癌的發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重危害了人民的健康。目前，手術(shù)、化療及放療仍是治療胃癌的主要措施，但是復(fù)發(fā)率和病死率依舊很高，5年生存率仍不甚理想[1]。過繼細(xì)胞免疫治療已經(jīng)成為繼手術(shù)、放化療后治療惡性腫瘤的一種新型手段，在抗腫瘤治療和提高患者免疫力及生存質(zhì)量方面發(fā)揮重要作用。目前研究較多的是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine-induced killer cells，CIK細(xì)胞)。CIK細(xì)胞是將人外周血單個核細(xì)胞在體外用多種細(xì)胞因子(如γ干擾素、抗CD3單克隆抗體和白細(xì)胞介素2等)共同培養(yǎng)一段時間后獲得的一群以CD3+CD56和CD3+CD8+細(xì)胞為主的異質(zhì)細(xì)胞群[2]。在惡性腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療中具有廣泛的應(yīng)用前景[3]?，F(xiàn)就CIK細(xì)胞的特點(diǎn)、作用機(jī)制、臨床應(yīng)用及目前存在的問題予以綜述。

1CIK細(xì)胞的表型及特點(diǎn)

CIK細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用的主要效應(yīng)細(xì)胞是CD3+CD56+細(xì)胞群，該群細(xì)胞在正常人外周血淋巴細(xì)胞中僅占1%～5%，但可在一定培養(yǎng)條件下迅速擴(kuò)增；該類細(xì)胞來源于增殖的CD3+CD8+CD56-T細(xì)胞，而非培養(yǎng)初期稀有的CD3+CD56+細(xì)胞，也就是說擴(kuò)增出來的CD3+CD56+細(xì)胞來源于T細(xì)胞，而非自然殺傷 (natural killer，NK) 細(xì)胞[4]。該類細(xì)胞代表了CIK細(xì)胞中最具有殺傷毒性的細(xì)胞類型，被稱為NK T細(xì)胞[5]。因此，CIK細(xì)胞具有T淋巴細(xì)胞強(qiáng)大的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非主要組織相容性復(fù)合體限制性殺瘤的特點(diǎn)，但殺傷作用是非抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用依賴性的[6]。此外，CIK細(xì)胞具有增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤譜廣、對多重耐藥腫瘤細(xì)胞敏感，殺瘤活性不受環(huán)孢素A和FKS06等免疫抑制劑的影響，能抵抗腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞經(jīng)凋亡相關(guān)因子/凋亡相關(guān)因子配體(Fas-FasL)介導(dǎo)的凋亡等特點(diǎn)[7]，對多種實(shí)體瘤細(xì)胞和白血病細(xì)胞均有殺傷作用[8]。因此，在臨床腫瘤治療中發(fā)揮著越來越重要的作用。

2CIK細(xì)胞的作用機(jī)制

研究發(fā)現(xiàn)，CIK細(xì)胞在體內(nèi)外均可以殺傷胃癌細(xì)胞株[9]，聯(lián)合奧沙利鉑后還可以協(xié)同殺傷耐藥胃癌細(xì)胞株[10]。但CIK細(xì)胞的抗瘤機(jī)制至今尚未完全闡明。

2.1釋放穿孔素和顆粒酶直接殺傷腫瘤細(xì)胞CIK細(xì)胞可通過黏附分子淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原/細(xì)胞間黏附分子1途徑對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行識別、結(jié)合后，釋放穿孔素和顆粒酶；其中穿孔素會在靶細(xì)胞膜上形成穿膜樣結(jié)構(gòu)，改變靶細(xì)胞的滲透壓；顆粒酶具有胰蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的特性，同時表達(dá)酯酶活性破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞裂解，從而發(fā)揮CIK細(xì)胞的毒性作用[11-13]。

2.2分泌多種細(xì)胞因子間接殺傷腫瘤細(xì)胞進(jìn)入體內(nèi)的活化CIK細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子(如γ干擾素、白細(xì)胞介素2、白細(xì)胞介素6及腫瘤壞死因子α等炎性細(xì)胞因子)，不僅可以直接抑制腫瘤細(xì)胞，而且可以調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)間接殺傷腫瘤細(xì)胞[14]。

2.3調(diào)節(jié)FasL/Fas途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及壞死Hoyle等[15]發(fā)現(xiàn)，體外培養(yǎng)的CIK細(xì)胞表達(dá)凋亡配體FasL，可以誘導(dǎo)Fas+的腫瘤細(xì)胞凋亡。Sun等[16]研究表明，CIK細(xì)胞早期誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，晚期則通過對p53、c-myc和Bcl-2的下調(diào)及Bax的上調(diào)來誘導(dǎo)瘤細(xì)胞壞死。

2.4作用于natural killer group 2 member D(NKG2D)配體的殺傷腫瘤細(xì)胞CIK細(xì)胞表達(dá)的NKG2D受體識別實(shí)體瘤和白血病細(xì)胞上的NKG2D配體，并聯(lián)合組蛋白脫乙?；敢种苿┖徒饘俚鞍酌敢种苿┻_(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的目的[17]。

3CIK細(xì)胞治療胃癌的臨床應(yīng)用

3.1CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療進(jìn)展期胃癌單純CIK細(xì)胞治療胃癌的臨床報道幾乎未見，目前研究較多的是CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療術(shù)后胃癌患者，該方案始于2006年；研究將術(shù)后的胃癌患者分為兩組，25例患者使用3個療程的亞葉酸、5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑化療，32例患者使用CIK細(xì)胞免疫治療結(jié)合亞葉酸、5-氟尿嘧啶和奧沙利鉑化療；結(jié)果顯示，兩組患者的血清腫瘤標(biāo)志物水平均明顯下降(P<0.05)，但CIK細(xì)胞聯(lián)合化療組的下降水平更加顯著，其累計存活率在開始時有所上升，2年后與單純化療組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義[18]。另一項研究卻證實(shí)了接受CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療的患者，存活時間明顯高于單純化療的患者，其2年和5年的生存率也明顯高于單純化療組[19]。其他多項相關(guān)研究也均證實(shí)，CIK細(xì)胞聯(lián)合化療可以提高患者的無病生存期和總生存期，延緩胃癌的復(fù)發(fā)，還可以提高患者的生活質(zhì)量[20-23]。因此,相對于單純化療而言，CIK細(xì)胞聯(lián)合治療更有益于患者。

3.2CIK細(xì)胞腹腔灌注聯(lián)合化療治療晚期胃癌王志明等[24]42例出現(xiàn)腹水的晚期胃癌患者分為兩組，研究組的20例患者使用希羅達(dá)和奧沙利鉑方案化療結(jié)合CIK細(xì)胞腹腔灌注；對照組22例患者僅使用希羅達(dá)和奧沙利鉑方案化療；結(jié)果顯示，聯(lián)合CIK細(xì)胞免疫治療組患者2個周期內(nèi)的腹水引流量減少，中位疾病進(jìn)展時間明顯延長(P=0.001)，中位總生存時間延長(P=0.006)；此外，聯(lián)合治療組患者的耐受性較好，CIK細(xì)胞灌注后無明顯不良反應(yīng)發(fā)生。

3.3CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療胃癌的不良反應(yīng)與手術(shù)、化療、放療相比，生物治療最大的優(yōu)勢在于不良反應(yīng)小。研究發(fā)現(xiàn)，CIK細(xì)胞治療主要的不良反應(yīng)是寒戰(zhàn)、發(fā)熱，一般為輕、中度發(fā)熱，大多不需要特殊處理或者僅對癥處理即可解決；其他的不良反應(yīng)還包括全身不適、乏力、胸悶和惡心等，尚未發(fā)現(xiàn)引起過敏、嚴(yán)重的肝腎功能不全等其他不良反應(yīng)[20-23]。

4CIK細(xì)胞治療目前存在的問題

CIK細(xì)胞作為過繼免疫治療的一種代表類型已經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種腫瘤的輔助治療[25-27]。雖然CIK細(xì)胞治療目前應(yīng)用范圍較廣，尤其是聯(lián)合化療治療術(shù)后胃癌患者，效果較顯著，且不良反應(yīng)小，治療耐受性較好。然而，目前國內(nèi)外應(yīng)用CIK細(xì)胞治療腫瘤仍處于探索階段，還存在很多亟需解決的問題。例如，接受CIK細(xì)胞治療的患者如何選擇；目前各研究單位實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)CIK細(xì)胞的方法統(tǒng)一問題；患者回輸CIK細(xì)胞的最佳治療數(shù)量；CIK細(xì)胞治療與其他治療結(jié)合的時機(jī)和治療療程等，這些問題需要在進(jìn)一步的臨床實(shí)驗(yàn)研究后得到優(yōu)化、規(guī)范和統(tǒng)一。雖然，目前很多報道證實(shí)了CIK細(xì)胞治療的安全性、有效性等，然而國內(nèi)外尚缺乏多中心、大樣本的臨床實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步證實(shí)。另外，CIK細(xì)胞殺傷腫瘤的機(jī)制尚未完全明確，大量的基礎(chǔ)理論尚待進(jìn)一步探討。

5小結(jié)

CIK細(xì)胞因增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤譜廣、對多重耐藥腫瘤細(xì)胞敏感等優(yōu)勢而備受關(guān)注。多項研究均證實(shí)，CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療術(shù)后胃癌患者的安全性、有效性和可行性，同時也展現(xiàn)了廣闊的治療前景。然而，CIK細(xì)胞治療也同樣面臨著很多的問題和挑戰(zhàn)。如何在短時間內(nèi)獲取大量、優(yōu)質(zhì)的CIK細(xì)胞，如何進(jìn)一步優(yōu)化、規(guī)范和統(tǒng)一CIK細(xì)胞的治療流程，如何讓CIK細(xì)胞治療更加安全、高效地應(yīng)用于臨床，這些是所有研究人員目前需要思考和解決的問題。

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The Role of CIK Cells in the Treatment of Gastric Cancer and the Clinical ApplicationHANLan-xiu1，WANGQiong1，MAOWei-dong1，ZHANGXue-guang2. (1.DepartmentofLaboratory，AffiliatedJiangyinHospital，CollegeofMedicineofSoutheastUniversity，Jiangyin214400，China； 2.JiangsuInstituteofClinicalImmunology，Suzhou215000，China)

Abstract：Cytokine-induced killer(CIK) cells are called natural killer T lymphocytes.CIK cells are non-MHC-restricted in target cell killing and have become the representative type of adoptive cellular immunotherapy.CIK cells can kill tumor cells by secreting cytotoxic granules and cytokines,regulating oncogene expression and activating natural killer group 2 member D receptor.In combination with chemotherapy,CIK cells can not only prolong the disease-free survival and the overall survival in patients with gastric cancer,but also improve the quality of life of these patients.No obviously side effects have been observed and the tolerance is good.Although CIK cells have been widely used in clinical treatment,there are still many problems to be further discussed.

Key words：Gastric cancer； Cytokine-induced killer cells； Adoptive cellular immunotherapy

收稿日期：2014-07-17修回日期：2014-10-14編輯：鄭雪

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.11.019

中圖分類號：R730.51

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)11-1970-03