李丹,陳亮,李陽
(黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所,黑龍江齊齊哈爾 161006)
一例仔狐感染綠膿桿菌的診斷與防制
李丹,陳亮,李陽
(黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所,黑龍江齊齊哈爾 161006)
2015年9月,齊齊哈爾某養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的仔狐突發(fā)以呼吸困難為主要癥狀的疾病,經(jīng)過臨床診斷、病理剖檢和實驗室檢驗,確認(rèn)該病是由綠膿桿菌感染引起。
發(fā)病期間該養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的病仔狐表現(xiàn)為精神沉郁,食欲減退,呼吸困難,病程一般較短,多數(shù)于發(fā)病后3~4d死亡。該養(yǎng)殖場應(yīng)用左氧氟沙星對該病進行治療,但治療效果甚微,發(fā)病仔狐死亡率仍可達到30%。
患病仔狐多表現(xiàn)為體態(tài)瘦弱,被毛粗亂,鼻端干燥,出現(xiàn)呼吸困難,呈腹式呼吸,有些甚至呈犬坐式呼吸。有些仔狐發(fā)病急促,毫無癥狀,突然死亡。剖檢死亡仔狐的尸體可見肺部出現(xiàn)出血或充血現(xiàn)象,肺葉呈棕褐色,切面可流出大量的血水樣液體;脾臟、腎臟均有出血點;肝臟充血,腫大;腸粘膜呈彌散性出血。
3.1 涂片鏡檢
無菌采集送檢剛死仔狐的心血、肝臟、脾臟制成涂片,進行革蘭氏染色鏡檢,觀察該菌為革蘭氏陰性菌,呈單個,成雙或呈短鏈排列,中等大小。
3.2 細(xì)菌培養(yǎng)
無菌操作取病死仔狐的心臟、肝臟、脾臟等組織接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血液瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)18~24h。該菌在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的藍綠色中等大小菌落,該菌落形狀扁平、表面光滑、邊緣整齊的,培養(yǎng)基可被染成青綠色;在血液瓊脂培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的灰褐色菌落,菌落較大,在菌落周圍可形成β溶血環(huán);在麥康凱培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的灰綠色菌落。
3.3 生化實驗
將細(xì)菌進行分離純化,將純化培養(yǎng)物分別接種于各種微量發(fā)酵管中,在滅菌平皿中培養(yǎng)24~48h,生化試驗結(jié)果顯示該細(xì)菌可以分伯膠糖、解葡萄糖、甘露糖、單奶糖,能液化明膠,氧化酶、觸酶、尿素酶均為陽性,可利用枸櫞酸鹽;不分解麥芽糖、棉籽糖、菊糖、乳糖、甘露醇及蔗糖;靛基質(zhì)、M.R、V-P試驗均陰性;通過將上述試驗結(jié)果與細(xì)菌生化反應(yīng)對照表進行比較可以確定該菌為綠膿桿菌。
3.4 動物試驗
隨機選取10只健康小白鼠,分為對照組和試驗組,照組和試驗組每組各5只。將綠膿桿菌肉湯培養(yǎng)物注射到試驗組小白鼠腹腔內(nèi),0.1mL/只,免疫組每只免疫綠膿桿菌劑量為0.5×109CF;對照組小白鼠腹腔注射等量無菌肉湯,注射完畢后進行隔離飼養(yǎng)。結(jié)果攻毒組小白鼠在24h內(nèi)全部死亡,對照姐小鼠剛?cè)看婊睿⒖梢詮乃劳龅墓ザ拘“资篌w內(nèi)再次分離到綠膿桿菌。
根據(jù)以上臨床癥狀,病理剖檢以及實驗室檢測結(jié)果可確定引起該養(yǎng)殖場仔狐發(fā)病的主要病原是綠膿桿菌。
3.5 藥敏試驗
將綠膿桿菌接種到普通營養(yǎng)瓊脂,分別選用阿米卡星、慶大霉素、復(fù)方新諾明、頭孢曲松、左氧氟沙星、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和恩諾沙星等7種藥敏紙片進行藥敏試驗,結(jié)果表明該菌對慶大霉素、頭孢曲松、阿米卡星高敏;對環(huán)丙沙星、恩諾沙星和頭孢噻肟中敏;其它藥物不敏感。
銅綠假單胞菌(P.Aeruginosa)又稱綠膿桿菌。其廣泛在自然界中,是土壤中存在的最常見的細(xì)菌之一,是一種常見的條件性致病菌。為革蘭氏陰性桿菌。菌體一端一般有一根鞭毛,運動活潑。其大小為1.5~3.0μm×0.5~0.8μm,有時呈球桿狀或線狀,成對或短鏈狀排列,無芽胞,米液型菌株有多糖、莢膜或糖萼,具有抗吞噬作用。
預(yù)防本病的措施主要是加強飼養(yǎng)管理,搞好狐舍的清潔衛(wèi)生。對發(fā)病仔狐進行隔離飼養(yǎng),用5%的熱火堿水對籠舍、地面環(huán)境、糞便等進行噴霧消毒,食槽及飲水槽、碗或杯用百度殺進行浸泡消毒,2次/d,連續(xù)1周;用5%煤酚皂對飼養(yǎng)環(huán)境進行噴霧式消毒。7~9月份正處于炎熱的夏季,也是綠膿桿菌發(fā)病的高峰期,這時的仔狐抵抗力降低,致使體內(nèi)存在的條件病原菌大量繁殖,最終引起感染和死亡。夏季天氣炎熱,狐舍通風(fēng)散熱差,高溫高濕,更利于綠膿桿菌繁殖,因此夏季對狐舍應(yīng)加強管理,做好通風(fēng)、降溫、防暑的工作。發(fā)病后畜主一般擅自使用多種藥物治療,會使細(xì)菌對多種藥物產(chǎn)生耐藥性,增加治療的難度。為了減少經(jīng)濟損失和不必要的浪費,發(fā)病后應(yīng)立即通過藥敏試驗確定敏感藥物進行治療,這樣才能收到顯著的防治效果。
10.3969/J.ISSN.1671-6027.2015.12.084