王艷斌,謝　雯,張　婷,閆　杰,王京京,趙　紅,范　穎,程　澄

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院 肝病中心,北京100015)

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血清補(bǔ)體在脂肪肝患者脂質(zhì)代謝紊亂中的變化情況及其臨床意義

王艷斌,謝雯,張婷,閆杰,王京京,趙紅,范穎,程澄

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院 肝病中心,北京100015)

摘要：目的了解脂肪肝(Fatty liver disease,FLD)患者血清補(bǔ)體的變化情況及其臨床意義。方法收集2008年5月至2013年9月在我院收治的500例FLD患者(觀察組)，另選同期健康體檢者500例(對(duì)照組)，檢測(cè)血脂水平及采用免疫散射比濁法測(cè)定血清補(bǔ)體C3、C4、C5和BF含量。結(jié)果觀察組TC、TG、LDL-C和HDL-C均值水平與對(duì)照組相比顯著增高(P<0.01或P<0.05)。觀察組血清C3、C5和BF水平較對(duì)照組均有不同程度的升高，兩組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)，而C4含量稍有升高，但兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。對(duì)照組和觀察組的C3、C5和BF增高病例分別有27例(5.4%)和375例(75.0%)、53例(10.6%)和326例(65.2%)、22例(44.0%)和273例(54.6%)，兩組間比較顯著差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。對(duì)照組和觀察組的C3、C5和BF分別在TC、TG、LDL-C和HDL-C值異常方面比較均具有顯著差異(P<0.01)。結(jié)論FLD患者血清補(bǔ)體C3、C5和BF含量明顯增高，對(duì)FLD患者的病情診斷評(píng)估和預(yù)后判斷有一定參考意義。

(ChinJLabDiagn,2015,19:1088)

脂肪肝(Fatty liver disease,FLD)是由多種病因或疾病等因素引起的一種飲食-環(huán)境-遺傳易感代謝性疾病。正常情況下，人體肝臟脂肪的含量約為肝臟重量的2%-4%，當(dāng)肝內(nèi)甘油三酯(TG)的合成速度超過低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的合成的速度，同時(shí)TG分泌到血液的速度和含量大大增加，使TG和TC等物質(zhì)在肝臟中聚集，引起肝內(nèi)脂肪酸攝取合成運(yùn)轉(zhuǎn)與利用平衡被打破，造成肝內(nèi)脂質(zhì)聚集超過肝臟重量的5%及以上，從而導(dǎo)致肝臟處于病理狀態(tài)[1]。臨床上以彌漫性肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞大泡性脂肪變性和脂肪大量聚集為病理特征。FLD是發(fā)達(dá)國家肝酶異常的首要病因，且是第一大慢性肝臟疾病。在我國，發(fā)生FLD的人群數(shù)量也逐年增加，已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病[2]。補(bǔ)體系統(tǒng)是機(jī)體固有免疫系統(tǒng)的重要部分，補(bǔ)體與肝臟脂質(zhì)沉積的發(fā)生密切相關(guān)[3]。本文觀察了500例FLD患者血清補(bǔ)體含量，以探討FLD血清補(bǔ)體系統(tǒng)的變化及其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2008年5月至2013年9月在我院門診求醫(yī)或住院經(jīng)彩色多普勒超聲檢查確診為FLD患者500例。500例患者年齡在25-56歲之間，平均年齡為(45.6±7.1)歲，其中男性263例，年齡25-54歲，平均年齡為(43.6±5.5)歲，女性237例，年齡28-56歲，平均年齡為(47.5±9.3)歲。所有FLD病例符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組2006年修訂的非酒精性脂肪肝和酒精性脂肪肝的相關(guān)病因診斷和超聲診斷標(biāo)準(zhǔn)[4,5]。急性或慢性感染患者、腫瘤患者、心臟病、原發(fā)性高血壓病、糖尿病、自身免疫性疾病患者以及肝、腎臟等其他臟器疾病患者都應(yīng)排除在外。同時(shí)從4000余份同期于本院體檢自愿者中隨機(jī)選擇500人為健康對(duì)照者，所有健康對(duì)照者經(jīng)彩色多普勒超聲檢查確診均未發(fā)現(xiàn)異常指標(biāo)，兩組在年齡、性別、來源地等方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。所有研究對(duì)象由患者或監(jiān)護(hù)人和健康對(duì)照者簽署知情同意書。

1.2血液采集采集所有FLD患者和健康對(duì)照組晨起空腹靜脈血液5 mL，于37°C溫箱放置1 h，然后置于4℃冰箱過夜，3000 rpm離心10 min，收集血清置于4℃?zhèn)溆谩?/p>

1.3血清生化指標(biāo)測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、磷脂(PL)、載脂蛋白A1(APOA)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)等血液生化指標(biāo)利用日本日立株式會(huì)社的7600-020自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。血液生化指標(biāo)參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》參考值[6]。

1.4血清補(bǔ)體測(cè)定采用免疫散射比濁法測(cè)定血清補(bǔ)體C3、C4、C5和BF，儀器為美國Beckman公司的IMMAGE全自動(dòng)免疫分析儀DXI800，相關(guān)試劑均為美國Beckman公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說明書推薦的操作步驟進(jìn)行上機(jī)測(cè)定，C3、C4、C5和BF質(zhì)控結(jié)果均在要求范圍之內(nèi)。

2結(jié)果

2.1血脂指標(biāo)和肝功能酶學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果FLD患者與健康對(duì)照組血脂指標(biāo)和肝功能酶學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較如表1所示，總體來看，F(xiàn)LD患者TC、TG、LDL-C和HDL-C均值水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。PL和apoA血脂指標(biāo)稍有變化，但變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。肝功能酶學(xué)指標(biāo)方面，F(xiàn)LD患者GGT、ALT和AST指標(biāo)均明顯高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

±s)

注：與對(duì)照組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01，下同

2.2血清補(bǔ)體檢測(cè)結(jié)果FLD患者血清C3、C5和BF水平均較健康對(duì)照組有不同程度的升高，兩組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)，而C4含量稍有升高，但兩者比較無顯著差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

±s)

2.3補(bǔ)體與FLD脂質(zhì)代謝紊亂的關(guān)系成年人血脂正常參考標(biāo)準(zhǔn)：TC值為2.84-5.70 mmol/L、TG值為0.40-1.70 mmol/L、LDL-C值為1.55-3.36 mmol/L和HDL-C值為0.91-1.81 mmol/L。按照這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)列出C3、C5和BF增高病例中TC、TG、LDL-C和HDL-C值異常和正常水平的病例數(shù)，從表3中可以看出對(duì)照組和觀察組的C3、C5和BF增高病例分別有27例(5.4%)和375例(75.0%)、53例(10.6%)和326例(65.2%)、22例(44.0%)和273例(54.6%)，同時(shí)觀察組的C3、C5和BF增加的病例數(shù)明顯高于對(duì)照組。對(duì)照組和觀察組的C3、C5和BF分別在TC、TG、LDL-C和HDL-C值異常方面比較均具有顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3　兩組補(bǔ)體指標(biāo)增高者在血脂異常方面的比較情況[例(%)]

3討論

近年來，隨著人們飲食結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變、生活習(xí)慣和方式的變化、活動(dòng)量的減少以及疾病檢測(cè)水平的提高，F(xiàn)LD的發(fā)病率有迅速增加的趨勢(shì)，F(xiàn)LD多發(fā)生于中老年人，但值得注意的是FLD患病人群逐漸呈年輕化。FLD在臨床上有酒精性FLD和非酒精性FLD之分。按病理上分為單純性FLD、脂肪性肝炎和脂肪性肝硬化。按嚴(yán)重程度可分為輕度、中度和重度三種等級(jí)，中重度FLD患者可出現(xiàn)嚴(yán)重肝功能異常，有研究資料報(bào)道，脂肪性肝炎不及時(shí)干預(yù)10%患者的在10年后進(jìn)一步發(fā)展為肝纖維化直至肝硬化、肝功能衰竭以及肝癌[7]。因此，F(xiàn)LD嚴(yán)重危害人們的生活質(zhì)量和生命健康。FLD的檢出率與對(duì)象年齡、性別和地域不同而有所差異，西方發(fā)達(dá)國家的FLD發(fā)病率為20%-30%，我國一般為17.2%-38.1%。兒童中的檢出率在2.6%-9.6%之間，而在肥胖兒童中則高達(dá) 38%-53%[8]。因此，尋找輔助診斷、病情評(píng)估和預(yù)后判斷疾病的方法和指標(biāo)極為重要。

FLD的發(fā)病相關(guān)因素可以是多種因素同時(shí)作用或先后參與形成的級(jí)連反應(yīng)，也可以是其中單一因素發(fā)揮致病作用。與大多數(shù)疾病類似，F(xiàn)LD的發(fā)生和發(fā)展同樣與環(huán)境因素和遺傳因素的綜合作用有密切關(guān)系，肥胖、過量飲酒、高脂飲食、營養(yǎng)狀態(tài)和肝炎病毒感染等引起脂肪堆積過多導(dǎo)致肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)可逆性病變。邱秀霞等通過分析FLD與代謝障礙綜合征的相關(guān)性指出，高血壓病、冠心病、高尿酸血癥等都是引發(fā)FLD相關(guān)的疾病，性別、年齡、肥胖、高脂血癥、糖代謝異常等都是FLD的相關(guān)危險(xiǎn)因素，在FLD的發(fā)生過程中起著關(guān)鍵性的作用[9]。肝臟是合成、儲(chǔ)存、轉(zhuǎn)運(yùn)和分解脂質(zhì)的中央樞紐，在脂質(zhì)代謝中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用。長期處于高脂血癥的脂質(zhì)代謝紊亂使得肝脂肪變性，極易造成肝細(xì)胞變性、壞死和炎性細(xì)胞浸潤，從而形成FLD，因此，血脂增高的脂質(zhì)代謝異常被認(rèn)為是發(fā)生FLD的危險(xiǎn)因素[10]。本研究中，F(xiàn)LD患者TC、TG、LDL-C和HDL-C均值水平明顯高于健康對(duì)照組(P<0.01或P<0.05)。PL和apoA血脂指標(biāo)稍有變化，但變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

補(bǔ)體是一組存在于人和動(dòng)物正常血清中由肝細(xì)胞和巨噬細(xì)胞生成的蛋白質(zhì)成分，30余種可溶性蛋白和膜結(jié)合蛋白正常補(bǔ)體系統(tǒng)。補(bǔ)體系統(tǒng)是一種具有精密調(diào)控機(jī)制的蛋白質(zhì)反應(yīng)系統(tǒng)，構(gòu)成自身免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其活化過程表現(xiàn)為一系列絲氨酸蛋白酶的級(jí)聯(lián)酶解反應(yīng)，在抗感染中處于一線防御地位。C3是補(bǔ)體組分中含量最高的，其含量的高低反映了總補(bǔ)體含量水平，且C3是衡量機(jī)體體液免疫的重要指標(biāo)。肝臟是補(bǔ)體產(chǎn)生的主要器官，同時(shí)又是脂質(zhì)合成和代謝的主要器官。血漿中大部分補(bǔ)體是由肝細(xì)胞合成并分泌，因此補(bǔ)體也是作為反應(yīng)肝損傷的重要指標(biāo)。近年國內(nèi)外研究資料顯示，血清補(bǔ)體C3、C5和激素ASP與肝炎、肝纖維化和肝硬化等肝臟疾病有密切相關(guān)[11]。但目前關(guān)于補(bǔ)體與FLD關(guān)系的研究報(bào)道相對(duì)較少。近年來的研究發(fā)現(xiàn)證實(shí)了Kuffer細(xì)胞、氧化應(yīng)激和細(xì)胞因子等參與了FLD的肝損傷過程[12]。當(dāng)肝臟中脂肪變性過多時(shí)引起肝脂肪細(xì)胞分泌大量炎性因子，炎性因子進(jìn)一步激活補(bǔ)體C3和C5并促使炎癥反應(yīng)級(jí)聯(lián)放大，導(dǎo)致肝細(xì)胞線粒體損傷，脂質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)受損，大量蓄積肝細(xì)胞內(nèi)而形成FLD[13]。因此，補(bǔ)體C3和C5可能在FLD的形成和演變過程中發(fā)揮重要的作用。同時(shí)，有學(xué)者提出C5L2(C5alike receptor-2)受體拮抗劑是研發(fā)新一代FLD治療藥物的靶標(biāo)[14]。本研究中，比較了FLD患者和健康對(duì)照組血清C3、C4、C5和BF水平，F(xiàn)LD患者C3、C5和BF均較健康對(duì)照組有顯著增高，而C4含量變化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，C3、C5和BF含量的檢測(cè)對(duì)FLD的輔助診斷、病情評(píng)估和預(yù)后判斷具有一定意義。同時(shí)，F(xiàn)LD患者的C3、C5和BF增加的病例數(shù)明顯高于對(duì)照組。對(duì)照組和觀察組的C3、C5和BF分別在TC、TG、LDL-C和HDLC值異常方面比較均具有顯著差異。結(jié)果提示補(bǔ)體與FLD脂質(zhì)代謝紊亂有一定關(guān)系，這進(jìn)一步證明了補(bǔ)體C3、C5和BF可作為FLD病情評(píng)估、指導(dǎo)治療和愈后轉(zhuǎn)歸的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉宗英.非酒精性脂肪肝患者肝功能酶學(xué)指標(biāo)與血脂檢測(cè)結(jié)果相關(guān)分析[J].中國肝臟病雜志(電子版)，2014，6：50.

[2] Williams R.Global challenges in liver disease [J].Hepatology,2006,44:521.

[3] Pritchard MT,McMullen MR,Stavitsky AB,et al.Differential contributions of C3,C5,and decay-accelerating factor to ethanol-induced fatty liver in mice [J].Gastroenterology,2007,132:1117.

[4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診療指南[J].中華肝臟病雜志，2006，14：161.

[5]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.酒精性肝病診療指南[J].中華肝臟病雜志，2006，14：164.

[6]中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.北京：東南大學(xué)出版社，2006：890.

[7] 張健，姚洪森，賀南方，等.脂肪肝診斷治療進(jìn)展[J].河北醫(yī)藥，2003，25：121.

[8] Angulo P.GI epidemiology:nonalcoholic fatty liver disease [J].Aliment Pharmacol Ther,2007,25:883.

[9]邱秀霞，左苗，孫鵬，等.脂肪肝與代謝障礙綜合征的相關(guān)性分析[J].中國肝臟病雜志(電子版)，2012 ，4：6.

[10]梁彤，胡曉紅，靳艷霞.脂肪肝1229例調(diào)查分析[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2011，40：359.

[11]劉永安.血清C3、C5、ASP表達(dá)與脂肪肝脂質(zhì)代謝紊亂相關(guān)性研究[D].包頭：內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院，2013.

[12]楊京港，劉永銘，劉艷英，等.高脂血癥患者脂代謝紊亂對(duì)補(bǔ)體表達(dá)及活化的影響[J].中國動(dòng)脈硬化雜志，2006，14：159.

[13]劉永安，楊耀嫻.補(bǔ)體與脂肪肝脂質(zhì)代謝的相關(guān)性研究進(jìn)展[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，19：118.

[14]王燕，楊耀嫻.補(bǔ)體與脂肪肝研究進(jìn)展[J].世界華人消化雜志，2010，18：1577.

關(guān)鍵詞：脂肪肝；補(bǔ)體；脂質(zhì)；代謝紊亂

Study on the changes of complement and its clinical significan in patients with fatty liver diseaseWANGYan-bin,XIEWen,ZHANGTing,etal.(DepartmentofHepatology,BeijingDitanHospital,CapitalMedicalUniversity,Beijing100015,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the changes of complement and its clinical significan in patients with fatty liver disease (fatty liver disease,FLD).Methods500 patients with FLD (observation group) and 500 healthy subjects (control group) collected from hospital were enrolled in the study from May 2008 to September 2013.The level of lipid was examined,and the content of complement C3,C4,C5,and BF was detected in two groups by using the scattering immunoturbidimetric assay.ResultsCompared with the control group,the level of TC,TG,LDL-C,and HDL-C in the observation group were significantly increased (P<0.01 andP<0.05),as well as the content of complement C3,C5,and BF (P<0.01 andP<0.05).But there was no significant difference in the content of complement C4 between the two groups (P>0.05).Cases with increasing of C3,C5,and BF in control group and observation group were 27 (5.4%) and 375 (75.0%),53 (10.6%) and 326 (65.2%),and 22 (44.0%) and 273 (54.6%),respectively.There was significant difference between two groups (P<0.01).The changes of C3,C5,and BF have statistical significance on the disorder of TC,TG,LDL-C,and HDL-C between two groups (P<0.01).ConclusionThe content of complement C3,C5,and BF were significantly increased in FLD,which has certain reference value for the assessment,diagnosis and prognosis of patient with FLD.

Key words:Fatty liver disease; Complement; Lipid; Metabolism disorder

(收稿日期：2014-05-23)

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

中圖分類號(hào)：R575.5

文章編號(hào)：1007-4287(2015)07-1088-04