崔 珺

炎癥和血管生成密切相關(guān)，病理性血管已經(jīng)涉及到慢性炎性疾病和多種癌癥的發(fā)展。炎癥和血管生成之間的相互作用是通過生長因子和細(xì)胞因子介導(dǎo)，特別是白細(xì)胞介素［1］。新血管生成在腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。最近，已發(fā)現(xiàn)一些抗癌細(xì)胞增殖和抗血管生成的細(xì)胞因子，但并沒有在肺癌患者中進(jìn)行檢驗［2］，其中包括 IL27、IL29、IL31 和IL33。本研究檢驗肺癌患者血清和支氣管肺泡灌洗液(支氣管肺泡灌洗液)中的IL27，IL29，IL31和IL33及其受體水平，并評估它們之間的相互關(guān)系及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2012年1月-2014年12月80例肺癌患者臨床資料，其中符合標(biāo)準(zhǔn)的患者45例。45例患者病理診斷確診為肺癌(男性38例，女性7例，平均年齡62歲)?；颊呶唇邮苋魏慰拱┧幬镏委熀头暖?。鱗狀細(xì)胞癌(SCC)患者22例，腺癌9例，而NSCLC14例。所有患者經(jīng)4個周期的化療，部分緩解(PR)19例(42.2%)，病情穩(wěn)定(SD)11 例(24.4%)，病情(PD)進(jìn)展15 例(33.4%)。

1.2 血樣采集

化療前采集肺癌患者全血得到血清樣品。排除化療的干擾，細(xì)胞毒性藥物最后一次給藥后至少28天采集血樣。血清儲存在-80℃待用。肺癌患者經(jīng)X射線和CT胸部掃描，纖維支氣管鏡與過敏性肺炎檢驗，肺支氣管活檢(TBB)，或經(jīng)支氣管針吸活檢(TBNA)后，取血樣以評估IL27，IL29，IL31和IL33及受體水平。按照RECIST(實體瘤響應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn))標(biāo)準(zhǔn)評估治療情況。所有患者均接受了胸部、腦電圖、基本化驗檢查及輔助檢查(腹腔B超和中樞神經(jīng)系統(tǒng)CT)。另設(shè)立3個對照組，15例肺結(jié)節(jié)病患者(BBS，貝-伯-肖綜合征)，8例HP(外源性過敏性肺泡炎)患者和15例健康志愿者(13例男性，2例女性)。所有患者和對照組均行支氣管鏡檢查和支氣管肺泡灌洗液分析。

1.3 非小細(xì)胞肺癌患者的治療

每21天為1個化療周期。在第1～3天給予順鉑30 mg/m2，在第1天和第8天給予吉西他濱1 000 mg/m2。所有患者均接受4個周期的化療。體能狀態(tài)評分采用ECOG評分標(biāo)準(zhǔn)。0分:活動能力完全正常，與起病前活動能力無任何差異;1分:能自由走動及從事輕體力活動，包括一般家務(wù)或辦公室工作，但不能從事較重的體力活動;2分:能自由走動及生活自理，但已喪失工作能力，日間不少于一半時間可以起床活動;3分:生活僅能部分自理，日間一半以上時間臥床或坐輪椅;4分:臥床不起，生活不能自理;5分:死亡。

1.4 血清和BALF中的IL-27，IL-29，IL-31和IL-33及其受體分析

白細(xì)胞介素27，IL29，IL31和IL33水平通過酶聯(lián)免疫(ELISA)方法確定。所有標(biāo)本進(jìn)行2次測定。2次測量的平均值為實驗結(jié)果。IL27，IL29，IL31和IL33的最小可檢測劑量(MDD)分別為 6.1 μg/ml，2.0 μg/ml，1.0 μg/ml和 0.2 μg/ml。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。Shapiro Wilk W檢驗數(shù)據(jù)正態(tài)分布。t檢驗獨立性數(shù)據(jù)。曼-惠特尼檢驗和秩和檢驗評估分布差異。參數(shù)之間的相關(guān)性由Spearman秩檢驗。Kaplan-Meier法和對數(shù)秩檢驗存活率差異，Cox比例風(fēng)險模型進(jìn)行多因素分析。

2 結(jié)果

2.1 各組細(xì)胞因子水平

各組血清和BALF中IL27，IL29，IL31和 IL33水平，見表1。NSCLC患者血清IL29水平顯著高于BBS組(P=0.043)。然而，各組血清IL27，IL31和IL33并沒有組間差異。各組支氣管肺泡灌洗液IL27、IL29、IL31、IL33水平均無統(tǒng)計學(xué)差異。

表1 各組患者血清IL-27，IL-29，IL-31和IL-33的分布值/(pg·ml-1)

2.2 非小細(xì)胞肺癌患者亞組分析

ⅢB期非小細(xì)胞肺癌患者血清IL-29及受體水平高于Ⅳ期NSCLC患者(P=0.034)，但肺泡灌洗液IL-29水平亞組間無明顯的差異，見表2。

表2 ⅢB期和Ⅳ期NSCLC患者血清及BALF的細(xì)胞因子水平/pg·mL-1

2.3 各因子水平與化療效果及疾病進(jìn)展預(yù)后的關(guān)系

化療后部分緩解(PR)肺癌患者的肺泡灌洗液IL-27及受體水平顯著高于病情穩(wěn)定(SD)患者(P=0.006)。然而，SD患者的支氣管肺泡灌洗液IL-29及受體水平高于疾病進(jìn)展(PD)患者(P=0.048)，BALF中IL31和IL33及受體水平和化療效果之間沒有相關(guān)性。高齡，體重下降和體能狀況為化療效果的預(yù)后因素，相反地，IL27，IL29，IL31，IL33 的水平(血清和BALF)與化療效果無顯著相關(guān)性，見表3。

表3 晚期NSCLC患者預(yù)后因素和血清參數(shù)對化療效果的影響

3 討論

腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的形成由多個病理機(jī)制控制，同時受到腫瘤抑制因子和刺激因子介導(dǎo)［3］。本研究中，抗腫瘤增殖和抗血管生成因子如IL27，IL29，在支氣管肺泡灌洗液中的水平低于血清中的水平。此外，我們觀察到在ⅢB期與Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌組的(血清和支氣管肺泡灌洗液)IL27和IL29及受體水平最高。非小細(xì)胞肺癌組的高水平IL27，IL29受體，削弱了癌癥患者的免疫機(jī)制，出現(xiàn)一系列并發(fā)癥。眾所周知癌癥患者有最嚴(yán)重的血管生成現(xiàn)象?；颊哐錓L27及受體水平顯著高于BALF中的水平，原因可能是由于這種細(xì)胞因子的起源引起的。IL27可以釋放自內(nèi)皮細(xì)胞、造血細(xì)胞、Th17細(xì)胞淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞［4］。這可能也是BBS組支氣管肺泡灌洗液中的IL27及受體水平比健康組高的原因。結(jié)節(jié)病患者的血管生成活性增加。Sekiya等［5］研究得出，結(jié)節(jié)病患者血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可作為胸外臟器受累的預(yù)測因子，并作為皮質(zhì)類固醇治療的參數(shù)。血清VEGF可作為結(jié)節(jié)病的預(yù)后指標(biāo)。我們的研究結(jié)果與其結(jié)果一致，因為BBS患者支氣管肺泡灌洗液中IL33及受體，促血管生成因子水平高于非小細(xì)胞肺癌組。

本研究中ⅢB期非小細(xì)胞肺癌患者血清IL29及受體水平高于Ⅳ期NSCLC患者(P=0.034)?；熀蟛糠志徑?PR)肺癌患者的肺泡灌洗液IL-27水平顯著高于病情穩(wěn)定(SD)患者。而且，SD患者支氣管肺泡灌洗液IL29水平比PD患者高。

新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，白細(xì)胞介素29屬于干擾素家族且為Ⅲ型干擾素［6］，除了其主要報道的抗病毒活性外，Ⅲ型干擾素也已經(jīng)顯示出抗多種人類腫瘤細(xì)胞系的作用包括結(jié)腸癌和食管癌［7］。但沒有數(shù)據(jù)研究非小細(xì)胞肺癌患者血清和肺泡灌洗液IL27和IL29及受體水平的報道。

總之，血清和支氣管肺泡灌洗液中IL27，IL29及受體水平的檢驗在臨床實踐中具有一定的價值，能夠預(yù)測癌癥患者疾病進(jìn)展情況。

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