樂(lè)佳美，熊筱娟，陸文銓，樸淑娟，張 鳳#（.上海長(zhǎng)征醫(yī)院藥學(xué)部，上海 00003；.宜春學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院，江西宜春 336000）

仙人菇口服液是第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)征醫(yī)院自制制劑，由淫羊藿、黃芪、枸杞、炒白術(shù)、人參等8味中藥組成，具有益氣填精、扶正固本的功效。該藥主要用于慢性消耗性疾病、疲勞綜合征等癥，對(duì)惡性腫瘤放、化療造成的貧血及免疫功能低下亦具有輔助的治療作用。仙人菇口服液在本院主要應(yīng)用于中晚期惡性腫瘤支持治療，療效確切，臨床應(yīng)用已近20年[1-2]。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅有常規(guī)檢查項(xiàng)目和對(duì)處方中淫羊藿、黃芪、枸杞的定性鑒別，尚未見有關(guān)其質(zhì)量控制的文獻(xiàn)報(bào)道。淫羊藿是仙人菇口服液的主要藥材，淫羊藿苷是其有效成分之一。淫羊藿苷是一種重要的生物活性成分，能增加心腦血管血流量、促進(jìn)造血功能、免疫功能及骨代謝，具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、抗衰老、抗腫瘤等功效。通過(guò)攻補(bǔ)兼施、益氣活血、扶正固本的方法，可提高中晚期惡性腫瘤患者的機(jī)體免疫機(jī)能，從而糾正患者的氣血兩虛的證候，穩(wěn)定病情，提高生存質(zhì)量。因此，為了提高產(chǎn)品質(zhì)量的專屬性、有效控制內(nèi)在質(zhì)量、保證臨床療效，筆者采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測(cè)定淫羊藿中的淫羊藿苷的含量，為建立仙人菇口服液的質(zhì)量控制方法提供參考。同時(shí)，在保留原標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了對(duì)處方中人參、白術(shù)的薄層色譜（TLC）鑒別，以提高軍隊(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料

1260 型HPLC儀，包括G1311A四元泵、G1322A真空脫氣機(jī)、G1329A自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A柱溫箱、G4212B 二極管陣列檢測(cè)器，ChemStation 軟件數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（美國(guó)Agilent 公司）；AG 22331 型Humberg 超高速離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf 公司）；CPA225D 型十萬(wàn)分之一電子分析天平（德國(guó)Sartorius 公司）；WL-901 Vortex 型旋渦振蕩混和器（海門市其林貝爾儀器制造有限公司）；SK7200H 型高頻超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司，功率：350 W，頻率：53 kHz）。

仙人菇口服液（上海長(zhǎng)征醫(yī)院制劑中心自制，批號(hào)：130806、130807、130808，規(guī)格：10 ml/支）；淫羊藿苷對(duì)照品（批號(hào)：110737～200415，純度：98%）、黃芪甲苷對(duì)照品（批號(hào)：110781～201314，純度：98%）、人參皂苷Rg1對(duì)照品（批號(hào)：110703～200424，純度：98%）均由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；甲醇、乙腈、醋酸和磷酸為色譜純，其他供薄層鑒別用試劑，包括正丁醇、甲醇、乙酸乙酯、丁酮、甲酸、氫氧化鈉、氯仿、三氯甲烷、石油醚、硫酸、乙醇均為分析純（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 TLC法定性鑒別

2.1.1 淫羊藿 取3 批樣品溶液各50 ml，分別用水飽和正丁醇提取3次，每次30 ml，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至干，殘?jiān)? ml 甲醇溶解，作為供試品溶液。取淫羊藿苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每ml 含1 mg 淫羊藿苷的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取淫羊藿對(duì)照藥材10 g，加甲醇50 ml，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液用水飽和正丁醇提取2 次，每次40 ml，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至干，殘?jiān)蛹状? ml 溶解，作為對(duì)照藥材溶液。另取缺淫羊藿的陰性樣品適量，按供試品溶液制備方法，制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法（2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB）試驗(yàn)[3]，吸取上述供試品溶液3 μl、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各2 μl、陰性對(duì)照溶液3 μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10∶1∶1∶1，V/V/V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，置于紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。噴以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置于日光下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的斑點(diǎn)。薄層色譜圖見圖1。

圖1 淫羊藿薄層色譜鑒別色譜圖A.365 nm熒光顯色；B.10%硫酸乙醇溶液顯色；1-3.供試品溶液（批號(hào)：130806、130807、130808）；4.對(duì)照藥材溶液；5.對(duì)照品溶液；6.陰性對(duì)照溶液Fig 1 TLC chromatogram of Epimedii FoliumA.TLC of 365 nm fluorescence；B.TLC of 10%H2SO4ethanol solution；1-3.test sample solution（sBatch No.130806，No.130807 and No.130808）；4.reference medicinal materials；5.reference substance solution；6.negative control solution

2.1.2 黃芪 取3 批樣品溶液各40 ml，分別加40%的氫氧化鈉溶液5 ml，搖勻，用水飽和正丁醇提取3次，每次30 ml，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至干，殘?jiān)蛹状? ml使溶解，濾過(guò)，取濾液，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml含1 mg黃芪甲苷的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取黃芪對(duì)照藥材10 g，加甲醇50 ml，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液用水飽和正丁醇提取2 次，每次40 ml，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至干，殘?jiān)蛹状? ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。另取缺黃芪的陰性樣品適量，按供試品溶液制備方法，制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法（2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB）試驗(yàn)[3]，吸取上述供試品溶液3 μl、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各2 μl、陰性對(duì)照溶液3 μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（20∶40∶22∶10，V/V/V/V）的下層溶液（10 ℃以下分層）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃加熱5 min，置于日光下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點(diǎn)。薄層色譜圖見圖2。

圖2 黃芪薄層色譜鑒別色譜圖1-3.供試品溶液（批號(hào)：130806、130807、130808）；4.對(duì)照藥材溶液；5.對(duì)照品溶液；6.陰性對(duì)照溶液Fig 2 TLC chromatogram of Astragali Radix1-3.test sample solution（sBatch No.130806，No.130807 and No.130808）；4.reference medicinal materials；5.reference substance solution；6.negative control solution

2.1.3 枸杞 取3批樣品溶液各50 ml，分別用乙酸乙酯提取3次，每次30 ml，合并乙酸乙酯提取液，減壓蒸干，殘?jiān)? ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。另取枸杞對(duì)照藥材9 g，加水40 ml，加熱煮沸15 min，放冷，濾過(guò)，濾液用乙酸乙酯提取2次，每次40 ml，合并乙酸乙酯提取液，減壓濃縮至5 ml，作為對(duì)照藥材溶液。另取缺枸杞子的陰性樣品適量，按供試品溶液制備方法，制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法（2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB）試驗(yàn)[3]，吸取上述供試品溶液10 μl、對(duì)照藥材溶液5 μl、陰性對(duì)照溶液10 μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲酸（3∶2∶1，V/V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，置于紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。薄層色譜圖見圖3。

圖3 枸杞薄層色譜鑒別色譜圖1-3.供試品溶液（批號(hào)：130806、130807、130808）；4.對(duì)照藥材溶液；5.陰性對(duì)照溶液Fig 3 TLC chromatogram of lycium barbarum1-3.test sample solution（sBatch No.130806，No.130807 and No.130808）；4.reference medicinal materials；5.negative control solution

2.1.4 白術(shù) 取3批樣品溶液各50 ml，分別用乙酸乙酯提取3次，每次30 ml，合并乙酸乙酯提取液，減壓蒸干，殘?jiān)尤燃淄? ml使溶解，作為供試品溶液。另取白術(shù)對(duì)照藥材1 g，加乙酸乙酯30 ml，超聲處理15 min，濾過(guò)，濾液蒸干，同法制成對(duì)照藥材溶液。另取缺白術(shù)的陰性樣品適量，按供試品溶液制備方法，制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法（2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB）試驗(yàn)[3]，吸取上述供試品溶液10 μl、對(duì)照藥材溶液5 μl、陰性對(duì)照溶液10 μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（50∶1，V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱5 min，置于日光下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)。薄層色譜圖見圖4。

圖4 白術(shù)薄層色譜鑒別色譜圖1-3.供試品溶液（批號(hào)：130806、130807、130808）；4.對(duì)照藥材溶液；5.陰性對(duì)照溶液Fig 4 TLC chromatogram of Atracty lodes.macrocephala1-3.test sample solutions（Batch No.130806，No.130807 and No.130808）；4.reference medicinal materials；5.negative control solution

2.1.5 人參 取“2.1.1”項(xiàng)下制得的供試品溶液，作為供試品溶液。取人參皂苷Rg1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 ml 升含1 mg 人參皂苷Rg1的溶液，作為對(duì)照品溶液。另取人參對(duì)照藥材10 g，加甲醇50 ml，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液用水飽和正丁醇提取2次，每次30 ml，合并正丁醇提取液，減壓濃縮至干，殘?jiān)蛹状? ml 使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。另取缺人參的陰性樣品適量，按供試品溶液制備方法，制得陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法（2010年版《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB）試驗(yàn)[3]，吸取上述供試品溶液2 μl、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各1 μl、陰性對(duì)照溶液2 μl 分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以氯仿-甲醇-水（13∶7∶2，V/V/V）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置于日光下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置，顯相同顏色的斑點(diǎn)。薄層色譜圖見圖5。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Dikma Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（30∶70，V/V），等度洗脫；流速：1.0 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：10 μl。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品1.02 mg，置于1 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，即得對(duì)照品溶液（1.02 mg/ml）。

2.2.3 供試品溶液的制備 取本品10 ml，置于50 ml量瓶中，精密加入50%乙醇40 ml，密塞，超聲處理30 min 后，放冷，再用50%乙醇定容，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 陰性對(duì)照溶液的制備 除淫羊藿外，其他各藥材按照仙人菇口服液的制備方法進(jìn)行提取濃縮制成陰性對(duì)照樣品后，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備，即得。

圖5 人參薄層色譜鑒別色譜圖1-3.供試品溶液（批號(hào)：130806、130807、130808）；4.對(duì)照藥材溶液；5.對(duì)照品溶液；6.陰性對(duì)照溶液Fig 5 TLC chromatogram of Panax.ginseng1-3.test sample solution（sBatch No.130806，No.130807 and No.130808）；4.reference medicinal materials；5.reference substance solution；6.negative control solution

2.2.5 專屬性試驗(yàn) 取上述對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液各適量，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。結(jié)果，陰性對(duì)照溶液色譜中在淫羊藿苷色譜峰保留時(shí)間一致的位置上無(wú)色譜峰，表明其他藥材對(duì)淫羊藿苷的含量測(cè)定無(wú)影響，詳見圖6。

圖6 高效液相色譜圖A.對(duì)照品溶液；B.供試品溶液（批號(hào)：130806）；C.陰性對(duì)照溶液；1.淫羊藿苷Fig 6 HPLC chromatogramsA.reference solution；B.test sample solution（Batch No.130806）；C.negative control solution；1.icariin

2.2.6 線性關(guān)系考察 取“2.2.2”項(xiàng)下淫羊藿苷對(duì)照品溶液適量，加入甲醇稀釋制成每1 ml 含510.00、255.00、127.50、63.75、31.88、15.94、7.97 μg的系列溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。以質(zhì)量濃度（x，μg/ml）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得淫羊藿苷線性回歸方程為y＝20.436x－76.473（r＝0.999 3）。結(jié)果表明，淫羊藿苷質(zhì)量濃度在7.97～510.00μg/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.7 精密度試驗(yàn) 按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備質(zhì)量濃度為510 μg/ml的對(duì)照品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，淫羊藿苷峰面積的RSD為0.83%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.2.3”項(xiàng)下供試品溶液（批號(hào)：130806）適量，分別于提取后0、5、10、15、20、24 h 時(shí)按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，淫羊藿苷峰面積的RSD為0.55%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.9 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一樣品（批號(hào)：130806）適量，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果，淫羊藿苷平均含量為305.98 μg/ml，RSD為0.45%（n＝6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.2.10 加樣回收率試驗(yàn) 取同一批號(hào)（批號(hào)：130806）已知含量的樣品各適量，共6 份，分別精密加入與樣品中淫羊藿苷含量相等的對(duì)照品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1 Result of recovery tests（n＝6）

2.2.11 樣品含量測(cè)定 取3 批樣品各適量，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定并計(jì)算樣品含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Result of content determination of samples（n＝3）

3 討論

3.1 TLC法

經(jīng)比較，淫羊藿苷的薄層鑒別中噴以10%硫酸乙醇溶液顯色也可見清晰斑點(diǎn)，且效果比《中國(guó)藥典》中置于紫外光燈（365 nm）下檢視所得熒光斑點(diǎn)更好。另外，TLC 中使用的顯色劑中水的含量對(duì)斑點(diǎn)顏色和形狀影響很大，無(wú)水乙醇和硫酸放置過(guò)久，含水量增加，顯色劑顯色不明顯；且試驗(yàn)中易受邊緣效應(yīng)干擾而使樣品斑點(diǎn)比移值（Rf）和形狀異常變化。因此，嚴(yán)格控制展開劑中水的比例且現(xiàn)配現(xiàn)用，將展開缸在展開前進(jìn)行預(yù)飽和，并將薄層板置于展開缸中間，可顯著改善斑點(diǎn)的形狀和顏色，減小邊緣效應(yīng)，使斑點(diǎn)清晰可見。

3.2 對(duì)照品純度檢查方法

采用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，樣品在190～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)，除樣品峰外未檢測(cè)到其他峰，樣品峰峰面積百分比達(dá)到100%；且增加進(jìn)樣量至樣品出現(xiàn)平頭峰時(shí)，仍未檢測(cè)出其他色譜峰。樣品峰的峰純度分析報(bào)告顯示，峰純度達(dá)到98%，理論板數(shù)為13 463。

3.3 色譜條件的選擇

3.3.1 色譜柱的選擇 本試驗(yàn)對(duì)3種型號(hào)的C18柱進(jìn)行了考察（Dikma Diamonsil C18、Sapphire C18、Agilent Eclipse XDB-C18）。結(jié)果表明，三者均能較好地分離淫羊藿苷且峰形較好，出于成本考慮，選用Dikma Diamonsil C18。

3.3.2 柱溫的選擇 筆者考察了不同柱溫（25、30、35 ℃）對(duì)分離效果的影響。結(jié)果表明，30 ℃條件下的分離效果略優(yōu)，故選用30 ℃為本研究的柱溫。

3.3.3 流動(dòng)相的選擇 本試驗(yàn)按照2010 年版《中國(guó)藥典》（一部）[3]并結(jié)合其他相關(guān)文獻(xiàn)[4-15]考察淫羊藿苷的流動(dòng)相條件，分別對(duì)乙腈-水、乙腈-0.1%醋酸、乙腈-0.05%磷酸、乙腈-0.1%磷酸、乙腈-0.2%磷酸5種流動(dòng)相系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)定試驗(yàn)。結(jié)果表明，乙腈-水為流動(dòng)相，采用等度洗脫時(shí)淫羊藿苷出峰時(shí)間較晚，且色譜峰的對(duì)稱性不好；加入醋酸或磷酸的流動(dòng)相系統(tǒng)可提高淫羊藿苷出峰時(shí)間，但0.1%醋酸和0.05%磷酸的分離度較差，0.1%和0.2%磷酸條件下分離效果均較好?？紤]到高濃度的磷酸會(huì)對(duì)色譜柱造成一定損傷，故選擇乙腈-0.1%磷酸（30∶70，V/V）作為流動(dòng)相，并且每次分析結(jié)束時(shí)加強(qiáng)對(duì)色譜柱和液相系統(tǒng)的沖洗和維護(hù)。

3.3.4 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 取淫羊藿苷對(duì)照品溶液適量，在190～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，發(fā)現(xiàn)在270 nm波長(zhǎng)處有最大吸收。參照2010年版《中國(guó)藥典》（一部）[3]淫羊藿苷的檢測(cè)波長(zhǎng)，并結(jié)合其他相關(guān)文獻(xiàn)[4-15]，最終選擇270 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.4 供試品溶液制備方法的優(yōu)化

3.4.1 提取方法的選擇 精密量取10 ml 仙人菇口服液3 份，分別進(jìn)行以下處理。①萃取法：加乙酸乙酯振搖提取3 次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?0 ml溶解；②超聲法：置于50 ml量瓶中，加甲醇40 ml，超聲處理30 min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液；③直接進(jìn)樣法：置于50 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液。使上述各樣品取樣量一致，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品含量。結(jié)果，3種方法的質(zhì)量濃度分別為262.99、309.01、300.35 μg/ml，表明超聲法提取效果略優(yōu)于萃取法和直接進(jìn)樣法，故選用超聲法。

3.4.2 提取溶劑的選擇 精密量取10 ml 仙人菇口服液4 份，分別加入不同溶劑（50%甲醇、100%甲醇、50%乙醇、95%乙醇）進(jìn)行超聲提取。使上述各樣品取樣量一致，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品含量。結(jié)果，質(zhì)量濃度分別為252.68、267.36、279.23、271.88 μg/ml，表明用50%乙醇作為提取溶劑時(shí)的提取效果較好，故選用50%乙醇作為提取溶劑。

3.4.3 提取藥液比的選擇 精密量取10 ml 仙人菇口服液3份，分別采用不同提取藥液比（1∶2、1∶4、1∶10，V/V）進(jìn)行超聲提取。使上述各樣品取樣量一致，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品含量。結(jié)果，質(zhì)量濃度分別為179.69、285.51、274.77 μg/ml，表明當(dāng)提取藥液比為1∶4 時(shí)樣品中淫羊藿苷含量最高，提取效果最好，故采用提取藥液比為1∶4。

3.4.4 提取時(shí)間的選擇 精密量取10 ml 仙人菇口服液3 份，分別采用不同超聲時(shí)間（15、30、60 min）進(jìn)行超聲提取。使上述各樣品取樣量一致，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品含量。結(jié)果，質(zhì)量濃度分別為265.89、272.37、270.14 μg/ml，表明超聲30 min時(shí)提取效果略優(yōu)于其他時(shí)間，故采用超聲提取30 min。

綜上所述，該法快速、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便，可作為仙人菇口服液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

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