賀順忠，宋仁德，牛永娟，尕么江永，張青蘭，李家奎

（1.青海玉樹州畜牧獸醫(yī)工作站，青海 玉樹 815000；2.國家牛肉牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系 玉樹綜合試驗(yàn)站，青海 玉樹 815000；3.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物學(xué)院，湖北 武漢 430070）

玉樹地區(qū)牦牛布病血清學(xué)檢測

賀順忠1，2，宋仁德1，2，牛永娟1，2，尕么江永1，2，張青蘭1，2，李家奎3

（1.青海玉樹州畜牧獸醫(yī)工作站，青海 玉樹 815000；2.國家牛肉牦牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系 玉樹綜合試驗(yàn)站，青海 玉樹 815000；3.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物學(xué)院，湖北 武漢 430070）

為掌握玉樹牦牛感染情況和牦牛疾病綜合防治提供參考依據(jù)，應(yīng)用布魯氏桿菌虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)（RBPT）對采自玉樹藏族自治州囊謙縣、稱多縣、治多縣、雜多縣306份血清進(jìn)行布魯氏桿菌抗體的檢測。結(jié)果檢出陽性血清樣品41份，陽性率為13.40%（3.3～17.9%），表明玉樹地區(qū)各縣牦牛群中均存在布魯氏桿菌病的感染。

牦牛；布魯氏桿菌；虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)；玉樹

1 目的

布魯氏菌?。˙rucellosis，簡稱布?。┦遣剪斒暇˙rucella）屬細(xì)菌侵入機(jī)體引起的傳染變態(tài)反應(yīng)性人畜共患性傳染病［1］，牦牛是布病易感動物，感染常引起懷孕母牛流產(chǎn)，人感染后常引起波狀熱、關(guān)節(jié)炎、骨髓炎等臨床癥狀，能造成孕婦流產(chǎn)［1］。玉樹地區(qū)牦牛飼養(yǎng)量大，是該地區(qū)主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，牦牛流產(chǎn)等疾病多發(fā)，為掌握玉樹牦牛感染情況和牦牛疾病綜合防治提供參考依據(jù)，應(yīng)用布氏桿菌虎紅平板凝集實(shí)驗(yàn)（Rose－Bengal－platetest，RBPT）對采自玉樹藏族自治州囊謙縣、稱多縣、治多縣、雜多縣306份血清進(jìn)行了布魯氏桿菌抗體的檢測。

2 材料與方法

2.1 待檢血清

采自青海省玉樹州的囊謙縣61份、稱多縣45份、治多縣140份、雜多縣60份。血清采回后放在－20C°保存，檢測前在室溫下自然解凍。

2.2 診斷試劑

布魯氏菌病陽性診斷血清（生產(chǎn)批號：2011－1）、陰性診斷血清（生產(chǎn)批號：2009－1）、布魯氏菌虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原（生產(chǎn)批號：201106），由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。

2.3 檢測方法

按照《中華人民共和國出入境檢查檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)布氏桿菌病平板凝集試驗(yàn)操作規(guī)程》，對待檢牦牛血清進(jìn)行檢測，在滅菌潔凈的玻璃板片上，用移液槍吸取虎紅平板凝集抗原30μL，在吸取被檢血清30μL于抗原旁邊，用牙簽充分?jǐn)嚢栊纬芍睆郊s2cm的液區(qū)。輕微搖動，室溫下于4min內(nèi)觀察結(jié)果，同時做陽性血清和陰性血清對照。

2.4 結(jié)果判定

當(dāng)陰性血清對照不出現(xiàn)凝集，陽性血清對照出現(xiàn)凝集，試驗(yàn)成立。待檢血清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性，不出現(xiàn)凝集者判為陰性。

3 結(jié)果

血清檢測結(jié)果見表1：

表1 玉樹牦牛布病虎紅平板凝集檢測結(jié)果

由表1可知，玉樹地區(qū)牦牛群布病感染率為13.40%（41／306），其中囊謙縣最低，為3.3%（2／61）治多縣高達(dá)17.9%（25／140），說明玉樹地區(qū)牦牛牦牛布病感染程度相當(dāng)嚴(yán)重。

4 討論

1）牦牛布病感染是目前導(dǎo)致其繁殖疾病的原因之一，給牦牛養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的損失。牦牛布病感染各地都有報道，蒲敬偉等［2］對新疆某牦牛場的調(diào)查表明，流產(chǎn)牦牛布病感染率為39.4%，牦牛群平均感染率為12.1%；黎能金等［3］2008年對四川阿壩州牦牛的檢測表明，布病感染率為5%；張作秀［4］2008年報道唐古拉山牦牛布氏桿菌病的陽性率為1.01%；張可榮等［5］對西藏部分地區(qū)的檢測結(jié)果為布病感染率5.9%（0～17.5%），本次對玉樹地區(qū)的306份牦牛血清樣品的檢測，檢出41份陽性，陽性率為13.40%，這比上述各地的檢測結(jié)果高出很多，說明玉樹地區(qū)牦牛群中存在著布氏桿菌病高強(qiáng)度的感染，要引起有關(guān)部門的高度重視，并采取積極的防制措施。

2）玉樹州的布氏桿菌病雖然已達(dá)到穩(wěn)定控制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)［6］，但此次檢測仍然檢出多份陽性血清，說明玉樹地區(qū)在達(dá)標(biāo)停止免疫后，因在畜群中傳染源消滅不徹底，病畜長期帶菌、排菌，這期間布病穩(wěn)定控制區(qū)的牛群是最敏感的動物，也是易感染區(qū)域，在混群飼養(yǎng)的情況下很容易被帶菌牛所感染，牦牛布氏桿菌病的感染高度反彈。因此，玉樹地區(qū)必須重新開始高質(zhì)量高密度牦牛布氏桿菌病免疫，直至完全凈化。

3）布氏桿菌病的防治工作是一個長期性和艱巨性工作，所以我們不但要嚴(yán)格執(zhí)行獸醫(yī)衛(wèi)生制度，認(rèn)真做好牦牛的布氏桿菌病的防治工作，進(jìn)一步加強(qiáng)對布氏桿菌病的檢測力度，定期對全州牦牛群進(jìn)行布氏桿菌病的血清學(xué)檢測，及時檢出陽性牛并及時撲殺或淘汰，從而達(dá)到凈化本病的目的。

（4）加強(qiáng)科普宣傳和衛(wèi)生宣傳教育工作，使廣大農(nóng)牧民群眾對布氏桿菌的流行、傳播方式、臨床癥狀及其對人的危害性有更深刻的認(rèn)識，做好個人防護(hù)，在牦牛布病產(chǎn)區(qū)，在給牦牛治療的同時，應(yīng)對該地區(qū)的牧民進(jìn)行布病的檢測和治療。對布病控制區(qū)的防治要做到加強(qiáng)聯(lián)防，群防群治；搞好畜間檢疫、淘汰病畜，消滅傳染源；堅(jiān)強(qiáng)畜間免疫、提高免疫密度［5］，這樣才能有效地控制好該地區(qū)的布病，加快布病的凈化。

［1］尚德秋，布氏菌病研究進(jìn)展［J］.中國地方病防治雜志.1993（3）：163－168.

［2］蒲敬偉，袁立崗，繆文革，等.野牦牛布魯氏菌病感染情況調(diào)查［J］.中國獸醫(yī)雜志.2007，43.（8）：53－54.

［3］黎能金，張霞，馬吉勝，等.2008年四川省阿壩州布魯桿菌病調(diào)查結(jié)果分析［J］.醫(yī)學(xué)動物防制，2009，25（7）：517－518.

［4］張作秀，唐古拉山牦牛布氏桿菌病的血清學(xué)調(diào)查［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志.2008，38（6）：27－28.

［5］張可榮，貢嘎，索朗斯珠，等，西藏部分地區(qū)牦牛布病血清學(xué)檢測初報［J］.中國奶牛.2011，24：48－49.

［6］張殿柱.青海省家畜布氏桿菌病的控制與監(jiān)測［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，1989，（5）：36－38.

Serological Detection Against Brucellosis of Yak in Yushu area

HE Shun－zhong，SONG Ren－de，NIU Yong－juan，GAME Jiangyong，ZHANG Qing－lan，LI Jia－kui

（1.Yushu State Animal Husbandry and Veterinary Station of Qinghai；2.National Beef Yak Industry Technology System Yushu Comprehensive Experimental Station，Yushu815000；3.Veterinary Medicine College，Huazhong Agriculture University，Wuhan 430070）

For mastering infection situation of yak in Yushu and providing reference for prevention and control of yak disease，Bengal plate agglutination test（RBPT）was applied to detect 306serum samples from 4counties which are Nangqian，Chenduo，Zhiduo and Zaduo.The result showed that 41samples were positive and the positive rate was 13.40% （3.3－17.9%）and indicated that the Brucellosis is prevalent in different areas in Yushu.

yak，Brucella，Bengal plate agglutination test（RBPT），Yushu

S823

A

1001－9111（2015）04－0094－02

2015－07－11修改日期：2015－07－19

賀順忠（1981－），男，青海互助人，獸醫(yī)師，從事草地放牧家畜疫病防控工作。