馮 勇

(黑龍江省雞東縣向陽鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站158200)

1 犬人工授精的必要性

犬是最早用于人工授精研究的動物，但發(fā)展和其他家畜相比稍顯緩慢。在許多發(fā)達國家，人工授精繁育的小犬如要注冊犬類系譜，需要先報經(jīng)注冊中心同意。因此在許多西方國家，犬的人工授精一般只在以下兩種情況下進行: 第一，不能進行交配的犬只; 第二，公母犬距離太遠，位于不同地區(qū)或不同國家。

與大多數(shù)其他動物一樣，犬人工授精數(shù)量正在顯著增加，目前已經(jīng)建立了非家養(yǎng)犬科動物的人工授精中心，用于保種或商業(yè)目的。

2 精液采集與處理

對公犬的精液采集通常采用手指按摩法，也可在全身麻醉的情況下使用電刺激法采精。收集前精液、富精子部分和少量后精液(前列腺液) 。可將全部射出的精液輸入母犬的陰道內(nèi)，但通常需要將鮮精進行稀釋，以便多次輸精或為多只發(fā)情母犬輸精。當使用完全精液時，應盡量減少前列腺液的收集量。根據(jù)需要，可將犬的精液做冷藏或冷凍保存。

3 輸精操作

液態(tài)保存精液的輸精: 由于犬不能交配而對犬施行人工授精時，可采用手指按摩法采集犬的精液，用原精立即輸入母犬的陰道內(nèi)，也可以稀釋后輸入一部分，剩余稀釋精液在48 h 內(nèi)使用。同樣，采用冷藏精液給母犬輸精時，可在獲得精液時及48 h 后輸精。在采精前應確保母犬接近發(fā)情期的可受配期。

采用鮮精或冷藏精液時，可進行陰道內(nèi)輸精，盡可能把精液輸?shù)阶訉m頸外口(Burke，1986) ?？刹捎媒囟塘说呐Ｓ幂斁珜Ч埽褂萌藐幍篱_張器引導輸精導管到正確位置。有人建議，在輸精后模仿公、母犬“鎖結(jié)”的情況，把一兩根手指插入母犬陰門，刺激雌性生殖道出現(xiàn)交配時的生殖道的活動。目前有一種Osiris 輸精導管，在管外套有Foley 充氣球(Nianski，2006) ，輸精時充入氣體，既可模仿自然交配時母犬陰道鎖緊公犬陰莖，又可以阻止精液回流。但是還沒有證據(jù)表明，這種輸精導管與常用輸精導管相比可多大程度提高受胎率。無論采用何種方法輸精，輸精后幾分鐘內(nèi)應將母犬后軀抬高，防止精液回流。

凍精解凍后輸精: 冷凍精液在陰道內(nèi)輸精的受胎率低于子宮內(nèi)輸精。因此，目前推薦采用的方法是通過子宮頸，或直接通過外科手術(shù)或腹腔鏡將精液輸入子宮內(nèi)。根據(jù)國外的報道，犬子宮內(nèi)輸精的產(chǎn)仔率接近85%，而陰道內(nèi)輸精只有60%左右。但是，陰道內(nèi)多次輸精可以提高受胎率，子宮內(nèi)多次輸精意義不大。使用Osiris 輸精導管陰道內(nèi)輸精，受胎率仍然只有60% 左右(Nianski，2006) 。由于母犬陰道和子宮頸管較長，子宮頸外口位置不易掌握，輸精導管很難穿過子宮頸管。使用挪威型輸精器(外部為聚四氟乙烯樹脂套管，套管內(nèi)是一根直徑約2 mm 輸精管) 可成功進行子宮內(nèi)輸精，不過掌握這種輸精器的使用技術(shù)需要進行大量的操作實踐，掌握后方能熟練進行。

有國外學者描述的子宮內(nèi)輸精方法如下: 母犬站立，一般不使用鎮(zhèn)靜劑，一只手經(jīng)腹壁固定子宮頸，另一只手將輸精導管穿過子宮頸進入子宮。輸精后，保持塑料套管與套管內(nèi)輸精管閉合，并抬起母犬后軀，避免精液回流?？捎脙?nèi)窺鏡定位子宮頸外口，輔助固定子宮頸。需要說明的，中等大小母犬的輸精比較容易，過度肥胖的母犬輸精較為困難。在操作人員對子宮頸輸精方法還不熟練的情況下，也可以通過外科手術(shù)或腹腔鏡輸精。

4 輸精時間的正確把握

母犬對公犬表現(xiàn)性接受行為的時間較長，但可受精時間卻相對較短。因此，要得到最好的輸精效果，必須準確把握排卵時間。自然交配時，許多配種人員只允許在母犬出現(xiàn)發(fā)情前出血的12 d 后進行一次交配。與使用冷藏精液輸精比較，使用冷凍精液更需要確定最適輸精時間。公犬自身的生育力也非常重要，精子在產(chǎn)道中的存活力是決定受胎率的關(guān)鍵因素。存活時間長的精子即使不是在最佳時間輸精也可以使母犬妊娠，而存活時間短的精子則可能在母犬尚未排卵之前即已死亡而不能使母犬受孕。

母犬的孕酮和LH 濃度在排卵前升高，測定其濃度變化，可以預測排卵時間。也可以用超聲波檢查卵巢，確定排卵時間。觀察陰道的細胞學變化預測排卵時間不夠準確，尤其對采用凍精輸精不適宜。在發(fā)情期開始以后(或出現(xiàn)高比例的陰道角化上皮細胞以后) ，每天檢測血中孕酮濃度可以準確預測排卵時間。孕酮在LH 出現(xiàn)峰值時由基礎濃度增至2.0 ～3.0 ng/mL，排卵時上升到4.0 ～8.0 ng/mL，排卵后2 d 上升到10 ～25 ng/mL。因此，孕酮濃度的第一次上升可以作為LH 峰值出現(xiàn)的指示。還可以通過生物測定法(如半定量測定LH) 直接測定血清和尿中LH(Durrant 等，2006) ，輸精最好是在排卵后2 ～3 d 進行。研究表明，在最佳時間輸精的產(chǎn)仔率(78%) 和窩產(chǎn)仔數(shù)(5.8 ±0.2 個)均高于延遲輸精(分別為56%和4.5 ±0.5 個) 時。