秦峰 蔡輝

中風(fēng)病多發(fā)于中老年人，具有起病急驟、治愈率低以及復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)。據(jù)報(bào)道，大約每40秒就有1例新發(fā)中風(fēng)患者［1］，中風(fēng)存活患者多遺留有不同程度的殘障，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。針刺治療中風(fēng)病可以追溯到數(shù)千年前，實(shí)踐證明，針刺治療可以促進(jìn)中風(fēng)病患者病情恢復(fù)，改善患者神經(jīng)功能缺損。近年來(lái)許多學(xué)者對(duì)針刺治療急性中風(fēng)的機(jī)制進(jìn)行了深入研究，本文將對(duì)近年針刺治療急性中風(fēng)病的基礎(chǔ)研究成果做一回顧，為臨床治療提供依據(jù)。

1 電針針刺治療中風(fēng)病

電針是在針上通以接近人體生物電的微量電流以治療疾病的一種療法，它在針刺的基礎(chǔ)上結(jié)合電的刺激，較之手針客觀可控，目前常用于實(shí)驗(yàn)室研究針刺作用機(jī)理。

1．1 電針治療可以改善腦血流，促進(jìn)血管新生

電針治療可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的表達(dá)，降低血管阻力，促進(jìn)血管新生等方面改善腦缺血區(qū)的低灌注狀態(tài)，促進(jìn)大腦兩側(cè)血液的代償，增加腦血流量。梁超等［2］以線栓法制作局灶性腦缺血再灌注大鼠模型，栓塞時(shí)間30分鐘，隨后在缺血再灌注24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)后以電針針刺大鼠百會(huì)、水溝、足三里穴位，觀察針刺后腦缺血局部血流量變化以及大鼠腦皮層促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin，EPO)的表達(dá)。結(jié)果表明，電針治療可以明顯增加腦缺血局部血流量，改善組織血供，促進(jìn)腦缺血區(qū)域EPO的表達(dá)，EPO作為體內(nèi)一種重要的神經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子，可以增加神經(jīng)遞質(zhì)的合成及傳遞、調(diào)節(jié)血液循環(huán)、促進(jìn)血管生成，從而減輕繼發(fā)性腦損傷。李桂平等［3］以線栓法制作大腦中動(dòng)脈梗死大鼠模型，造模成功后即刻以電針刺激大鼠人中穴，在針刺后1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)，分別對(duì)電針組大鼠股靜脈注射番茄凝集素行心臟灌注，灌注后取腦組織進(jìn)行切片、染色、圖像分析，觀察電針治療組血流灌注的血管量變化。結(jié)果表明，電針干預(yù)可增加模型大鼠腦缺血半暗帶內(nèi)有血流灌注的微血管數(shù)量，提示電針干預(yù)可促進(jìn)側(cè)支循環(huán)建立，增加缺血區(qū)域的腦血流灌注。CD31又稱為血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1，PECAM/CD31)，通常位于血管內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板表面，以及內(nèi)皮細(xì)胞間緊密連接處。免疫組化中，CD31常被用作血管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志，主要用于證明內(nèi)皮細(xì)胞組織的存在，用于評(píng)估血管生成。左朝等［4］以電針針刺大腦中動(dòng)脈閉塞模型大鼠“百會(huì)、水溝、后三里”穴位，7天后以免疫組化方法觀察CD31的表達(dá)。結(jié)果表明7天后，在局灶性腦缺血再灌注后腦組織內(nèi)CD31表達(dá)明顯高于模型組，表明電針能有效促進(jìn)缺血再灌注模型大鼠腦內(nèi)缺血區(qū)的微血管的形成和側(cè)支循環(huán)的建立，促進(jìn)腦缺血后血管再生，從而改善缺血區(qū)的血供。CD34是一種與新生小血管相關(guān)的抗原，在小血管內(nèi)皮中表達(dá)，而且在新生血管內(nèi)皮中表達(dá)遠(yuǎn)大于非新生血管內(nèi)皮，CD34在血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)使之成為最敏感的新生血管內(nèi)皮標(biāo)記物。穆桂萍等［5］以電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠任脈穴位承漿、氣海、關(guān)元以及督脈穴位百會(huì)、水溝和大椎，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，針刺治療可以上調(diào)腦內(nèi)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和 CD34 表達(dá)，促進(jìn)缺血部位血管新生，減輕腦缺血再灌注后繼發(fā)性神經(jīng)元損傷。內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是一群具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等細(xì)胞因子的作用下，或者在體內(nèi)缺血、血管損傷等病理因素刺激下，從骨髓進(jìn)入體循環(huán)，到達(dá)損傷部位，促進(jìn)內(nèi)皮修復(fù)和新生血管形成。趙瑛等［6］通過(guò)電針針刺大鼠大腦中動(dòng)脈局灶性腦缺血再灌注模型，觀察內(nèi)源性EPCs及其相關(guān)細(xì)胞因子在外周血中的變化，針刺取穴“曲池、足三里”。結(jié)果表明，針刺使大鼠血清VEGF含量增高，VEGF的高表達(dá)可以介導(dǎo)骨髓EPCs的動(dòng)員，促進(jìn)腦梗死后EPCs的趨化;同時(shí)針刺可在一定程度上降低誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶的活性，減輕腦缺血后的炎癥反應(yīng)。

1．2 電針治療可以減輕腦中風(fēng)后的炎癥反應(yīng)

Wang P等［7］使用電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠百會(huì)、大椎穴位，觀察電針治療對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后血清白介素(interleukin，IL)-6、IL-8和IL-10的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，電針24小時(shí)后，電針組大鼠血清IL-6及IL-8水平低于模型組。說(shuō)明在缺血再灌注早期，電針治療可以降低血清IL-6、IL-8水平，發(fā)揮減輕炎癥反應(yīng)、改善神經(jīng)功能缺損的作用。張亞敏等［8］以電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠百會(huì)、足三里穴，發(fā)現(xiàn)電針治療可以在腦缺血損傷早期下調(diào)外周血清IL-1β、IL-6的表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)。同樣陳素輝等［9］的研究也表明，針刺腦缺血再灌注損傷大鼠可以下調(diào)腦組織IL-6的表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)。

1．3 電針治療減輕中風(fēng)后細(xì)胞的繼發(fā)性損傷

楊沙等［10］根據(jù)石學(xué)敏院士醒腦開(kāi)竅針刺治療中風(fēng)病的理論，選擇大腦中動(dòng)脈閉塞大鼠模型，采用電針針刺模型大鼠人中、雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴后，利用激光共聚焦掃描顯微鏡技術(shù)，觀察電針針刺對(duì)腦缺血不同時(shí)點(diǎn)大鼠海馬神經(jīng)元內(nèi)游離Ca2+濃度的影響。結(jié)果表明，醒腦開(kāi)竅和傳統(tǒng)針刺均可以降低大鼠腦缺血損傷后1小時(shí)、6小時(shí)、24小時(shí)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度，但醒腦開(kāi)竅針刺組效果更加明顯。醒腦開(kāi)竅針刺法能迅速有效調(diào)節(jié)缺血區(qū)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+，抑制細(xì)胞內(nèi)鈣濃度過(guò)高，減輕鈣超載對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的損害。同時(shí)作者還認(rèn)為，醒腦開(kāi)竅手針針刺法對(duì)鈣超載的抑制作用優(yōu)于醒腦開(kāi)竅電針針刺法。梁艷桂等［11］的研究發(fā)現(xiàn)，大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型建立以后，腦缺血區(qū)中樞神經(jīng)抑制因子Nogo-A表達(dá)明顯增高，而Nogo-A通過(guò)與受體結(jié)合，在跨膜受體的協(xié)同下，轉(zhuǎn)導(dǎo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制信號(hào)，抑制神經(jīng)細(xì)胞軸突再生。而電針百會(huì)、大椎穴可下調(diào)Nogo-A的表達(dá)，減輕腦組織神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、毛細(xì)血管等超微結(jié)構(gòu)的缺血性損傷，對(duì)缺血再灌注引起的腦損傷具有保護(hù)作用。譚峰等［12］使用易卒中型腎性高血壓大鼠建立大腦中動(dòng)脈閉塞腦缺血再灌注模型，用電針針刺大鼠百會(huì)、大椎穴位28天后發(fā)現(xiàn)，雖然模型組、電針組大鼠腦梗死灶體積比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是電針組腦梗死部位皮質(zhì)和頸髓神經(jīng)元數(shù)目較模型組增多，說(shuō)明電針治療28天可以減輕腦梗死部位皮質(zhì)及遠(yuǎn)隔部位脊髓發(fā)生的繼發(fā)性神經(jīng)元損傷，促進(jìn)神經(jīng)功能修復(fù)。

1．4 電針治療減少中風(fēng)后的細(xì)胞死亡或凋亡

腦缺血再灌注損傷時(shí)，氧自由基、大量炎癥因子等因素可以刺激c-fos及c-jun基因的表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物c-fos及c-jun蛋白與靶基因激動(dòng)蛋白-1(activator prote-1，AP-1)位點(diǎn)結(jié)合進(jìn)入核內(nèi)作為第三信使，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。同時(shí)致炎因子能夠介導(dǎo)并激活胞漿型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2，cPLA2)的表達(dá)，激活的cPLA2可進(jìn)一步介導(dǎo)致炎因子的生成;活性升高的cPLA2水解細(xì)胞膜磷脂直接導(dǎo)致磷脂的降解，同時(shí)水解磷脂產(chǎn)生的游離脂肪酸作為細(xì)胞內(nèi)的第二信號(hào)可以引起下游一系列的生物學(xué)效應(yīng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞的損傷或死亡。任素蓮等［13］選取腦缺血1小時(shí)再灌注大鼠模型，以百會(huì)至曲鬢穴為電針針刺部位，觀察缺血1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)患側(cè)皮層神經(jīng)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白cPLA2、c-fos和c-jun表達(dá)變化以及各時(shí)間點(diǎn)凋亡細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果表明，頭針明顯抑制缺血再灌注后12小時(shí)大鼠皮層腦組織cPLA2蛋白表達(dá)和缺血再灌注后3小時(shí)、24小時(shí)腦內(nèi)c-fos及c-jun蛋白表達(dá);并且頭針能明顯降低各相應(yīng)時(shí)間組大鼠腦內(nèi)的細(xì)胞凋亡數(shù)目，說(shuō)明電針治療可以通過(guò)下調(diào)腦缺血再灌注后cPLA2、c-fos和c-jun基因的表達(dá)，減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡。王海英等［14］制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型之后，電針針刺大鼠百會(huì)、水溝穴，觀察電針治療對(duì)大鼠大腦皮層和紋狀體細(xì)胞內(nèi)游離鈣、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(cysteine coutaining aspartate-specific proteases，Caspase)-3mRNA的表達(dá)和神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，針刺干預(yù)可以使腦細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度明顯降低;同時(shí)，腦缺血再灌注3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)后大鼠腦組織中Caspase-3mRNA表達(dá)顯著增高，經(jīng)電針干預(yù)后，各對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Caspase-3mRNA的表達(dá)明顯低于模型組大鼠。從而表明電針大鼠百會(huì)、水溝穴位可以降低腦細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度、減少病理性鈣內(nèi)流以及抑制Caspase-3mRNA的表達(dá)，從而發(fā)揮減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用。Survivin是目前發(fā)現(xiàn)的作用最強(qiáng)的凋亡抑制基因，Survivin通過(guò)直接抑制凋亡終末效應(yīng)酶半胱氨酸天冬酰胺酶Caspase-3和Caspase-7活性來(lái)阻斷細(xì)胞凋亡過(guò)程;Survivin也可以與周期蛋白激酶CDK4，CDK2相互作用阻斷凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在腦缺血發(fā)生時(shí)，可以促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)血管形成和神經(jīng)修復(fù)。黃瀏姣等［15］通過(guò)電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠百會(huì)、水溝、足三里穴，觀察不同時(shí)間點(diǎn)缺血腦組織中心區(qū)及周邊區(qū)Survivin、VEGF表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，電針可以增加腦缺血再灌注梗死中心區(qū)和梗死周邊區(qū)Survivin和VEGF的表達(dá)，二者的表達(dá)在缺血再灌注后24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)明顯，說(shuō)明電針治療可以起到抑制凋亡和促進(jìn)腦血管新生的作用。cAMP反應(yīng)原件結(jié)合蛋白(cAMP-response element binding protein，CREB)是位于細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子，腦缺血發(fā)生后CREB被激活，激活的CREB再通過(guò)激活下游抗凋亡因子以及參與阻止Ca2+內(nèi)流等多種途徑起到保護(hù)神經(jīng)元作用。楊珊莉等［16］以電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠偏癱側(cè)肢體合谷、外關(guān)、陽(yáng)陵泉、足三里穴位，針刺3天后觀察大鼠腦組織CREB的表達(dá)，結(jié)果表明電針治療3天后，電針治療組大鼠腦梗死面積小于模型組;電針治療組大鼠腦組織CREB表達(dá)明顯高于模型組，說(shuō)明電針治療可以通過(guò)上調(diào)CREB的表達(dá)來(lái)降低腦缺血再灌注損傷，減少神經(jīng)元凋亡，縮小腦梗死范圍。

1．5 電針治療可以促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生

王光義等［17］的研究表明，在腦缺血再灌注模型大鼠的腦缺血損傷部位，存在著內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞激活現(xiàn)象，這種現(xiàn)象是機(jī)體對(duì)損傷后的代償，但是代償?shù)纳窠?jīng)干細(xì)胞的數(shù)量不足，而且調(diào)節(jié)神經(jīng)元修復(fù)的因子也不足。如果以電針針刺腦缺血再灌注模型大鼠“大椎、百會(huì)”穴位3天后，發(fā)現(xiàn)腦缺血后室管膜下區(qū)巢蛋白和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)的表達(dá)明顯增高。而巢蛋白是神經(jīng)干細(xì)胞的重要標(biāo)志蛋白，bFGF可以刺激鼠室管膜下區(qū)神經(jīng)干細(xì)胞遷移、分化，促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)合成。電針治療后巢蛋白和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)增高表明電針針刺可以促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞在缺血腦內(nèi)的增殖、分化，促進(jìn)腦損傷的修復(fù)。張業(yè)貴等［18］的研究也揭示，電針腦缺血再灌注損傷后大鼠“百會(huì)、大椎”穴位，大鼠腦內(nèi)齒狀回巢蛋白表達(dá)明顯增加;星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性蛋白-膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrilliary acidic protein，GFAP)表達(dá)明顯降低，說(shuō)明電針可以促進(jìn)腦缺血再灌注損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖，促進(jìn)神經(jīng)功能的修復(fù);抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞的過(guò)度活化及增殖，減輕繼發(fā)性的神經(jīng)損傷。

2 頭、體針治療中風(fēng)病

中風(fēng)病病位在腦，針刺取穴首選近腦之頭皮部腧穴;體針是整體治療的體現(xiàn);頭穴、體穴相配，局部近取與循經(jīng)遠(yuǎn)取相伍，體現(xiàn)了經(jīng)絡(luò)的整體作用以及一些穴位的特殊作用。

2．1 頭、體針治療可以維持血腦屏障的完整性、減輕腦水腫

血腦屏障主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞及其緊密連接、血管基底膜和星形膠質(zhì)細(xì)胞終足組成。中風(fēng)發(fā)生后出現(xiàn)血腦屏障損傷，引起腦水腫及炎癥反應(yīng)。Ⅳ型膠原參與構(gòu)成血管基底膜，是維持血腦屏障完整性的主要成分之一。于學(xué)平等［19］以百會(huì)穴向曲鬢穴方向透刺的方法，觀察針刺對(duì)腦缺血再灌注2小時(shí)大鼠模型缺血側(cè)腦組織Ⅳ型膠原蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著針刺時(shí)間的延長(zhǎng)，缺血側(cè)腦組織Ⅳ型膠原的表達(dá)明顯高于模型組，說(shuō)明頭針治療可以上調(diào)Ⅳ型膠原的表達(dá)，有助于維護(hù)缺血損傷后血腦屏障的完整性。劉婷婷等［20］取百會(huì)穴和百會(huì)穴左右旁開(kāi)2 mm共3個(gè)穴位作為腦缺血再灌注大鼠模型的針刺部位，觀察針刺對(duì)缺血再灌注損傷后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)(6小時(shí)、1天、2天、3天、5天)大鼠腦內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloprotein，MMP)-9表達(dá)的影響。腦損傷后表達(dá)增加的MMP-9可以通過(guò)水解細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜以及破壞毛細(xì)血管緊密連接等作用，導(dǎo)致血腦屏障嚴(yán)重受損，加重腦水腫，促進(jìn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及神經(jīng)細(xì)胞死亡。研究表明，頭針組大鼠治療3天、5天后，MMP-9的表達(dá)明顯低于模型組;同時(shí)發(fā)現(xiàn)，針刺治療3天后，頭針組大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分低于模型組，說(shuō)明頭針治療可以抑制腦損傷后MMP-9的表達(dá)，發(fā)揮減輕腦水腫，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)的作用。腦出血急性期，凝血酶受體(protease-activated receptor，PAR)-l在血腫周圍組織表達(dá)明顯加強(qiáng)，凝血酶對(duì)腦組織的損傷體現(xiàn)在很多方面:凝血酶可通過(guò)激活PAR-1而引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡;凝血酶通過(guò)激活PAR-1引起酪氨酸激酶的活化，后者激活磷脂酶C，使4，5-二磷酸磷脂酰肌醇分解為甘油二脂和三磷酸肌醇，可引起蛋白激酶C活性升高和細(xì)胞內(nèi)鈣釋放，造成細(xì)胞鈣超載，導(dǎo)致線粒體功能障礙和細(xì)胞死亡;凝血酶通過(guò)激活小膠質(zhì)細(xì)胞上的PAR-1，釋放腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-12等炎性因子，進(jìn)一步加重腦組織損傷。王瓏等［21］針刺腦出血急性期大鼠患側(cè)百會(huì)穴、曲鬢穴，發(fā)現(xiàn)針刺后6小時(shí)、1天、2天、3天、7天各時(shí)間點(diǎn)，血腫周圍腦組織內(nèi)PAR-1蛋白表達(dá)較模型組明顯減少，說(shuō)明針刺治療可以下調(diào)腦出血血腫周圍腦組織內(nèi)PAR-1蛋白表達(dá)，使凝血酶的產(chǎn)生減少，從而減輕凝血酶所造成的毒性反應(yīng)，減輕腦水腫。

2．2 頭、體針治療可以減輕中風(fēng)后的炎癥反應(yīng)

細(xì)胞間黏附分子(intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布于少突膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等。急性腦血管病發(fā)生時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)上調(diào)，使白細(xì)胞在損傷處聚集，導(dǎo)致微血管閉塞，引發(fā)“無(wú)復(fù)流”現(xiàn)象，并進(jìn)一步促進(jìn)炎癥的發(fā)生和發(fā)展，導(dǎo)致繼發(fā)性腦損傷的發(fā)生。白細(xì)胞黏附是炎性反應(yīng)的重要標(biāo)志，黏附過(guò)程中起重要作用的黏附分子是ICAM-1。鄒偉等［22］針刺腦出血大鼠模型，取穴大鼠病灶側(cè)百會(huì)穴透曲鬢穴，觀察針刺后大鼠腦組織ICAM-1的表達(dá)，結(jié)果表明，針刺百會(huì)穴透曲鬢穴治療1天就可以下調(diào)大鼠腦內(nèi)ICAM-1的表達(dá)，針刺治療可以減輕腦出血后白細(xì)胞黏附，減輕腦出血后的炎癥反應(yīng)。同樣，鄒偉等［23］研究發(fā)現(xiàn)，針刺可以下調(diào)腦出血大鼠腦內(nèi)NF-κB p65蛋白的表達(dá)，抑制腦出血后炎癥反應(yīng)所致的繼發(fā)性腦損傷。

2．3 頭、體針治療可以減輕中風(fēng)后的細(xì)胞凋亡

膠質(zhì)源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)是一種強(qiáng)效的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，GDNF可以通過(guò)拮抗 N-甲基-D-天冬氨酸(N-metlyl-D-aspartic acied receptor，NMDA)介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用，減少遲發(fā)性神經(jīng)元死亡和細(xì)胞凋亡，在神經(jīng)元損傷修復(fù)方面發(fā)揮重要作用。bFGF作為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，可以促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖，并增加其髓磷脂相關(guān)蛋白和類脂的含量。當(dāng)bFGF用于損傷的大腦時(shí)，可以通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)前體細(xì)胞分化、促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)合成、促血管生成作用等方面促使神經(jīng)元存活。李丹等［24-25］研究表明，針刺治療腦出血急性期大鼠患側(cè)百會(huì)穴、曲鬢穴可以增加大鼠腦內(nèi)bFGF蛋白表達(dá)水平，增加腦內(nèi)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的合成與分泌，減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞功能恢復(fù)。糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)與細(xì)胞凋亡關(guān)系密切，GSK-3β可進(jìn)一步激活凋亡相關(guān)蛋白Caspases家族，尤其是激活Caspase-3，Caspase-3可以通過(guò)水解特異性細(xì)胞蛋白直接導(dǎo)致凋亡，也可以破壞DNA修復(fù)蛋白抑制DNA的修復(fù)，從而協(xié)助凋亡的完成?？赚摰龋?6］以百會(huì)穴向曲鬢穴方向透刺的方法，觀察針刺對(duì)腦出血大鼠模型神經(jīng)功能和GSK-3β的影響，研究發(fā)現(xiàn)，針刺治療可以下調(diào)大鼠腦出血急性期GSK-3β蛋白的表達(dá)，減少腦出血后細(xì)胞凋亡，減輕腦損傷，促進(jìn)神經(jīng)功能缺損的恢復(fù)。而范春玲等［27］以毫針針刺腦出血大鼠，針刺取穴大鼠病灶側(cè)百會(huì)穴，針尖向病灶側(cè)曲鬢穴方向透刺，觀察針刺后6小時(shí)、1天、3天和7天大鼠腦組織Caspase-3表達(dá)情況，結(jié)果表明，針刺治療可以明顯降低各時(shí)間點(diǎn)腦出血大鼠腦組織Caspase-3的表達(dá)，有效地保護(hù)腦出血后損傷的神經(jīng)元，減少細(xì)胞凋亡。B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma，Bcl-2)蛋白是Bcl-2家族中最主要的成員，在腦損傷過(guò)程中，Bcl-2可以通過(guò)抑制自由基、超氧化物的產(chǎn)生和作用;抑制細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中Ca2+的釋放;調(diào)節(jié)線粒體膜通透孔道的功能，減少細(xì)胞色素C釋放;與凋亡基因Bcl-2相關(guān)X蛋白的產(chǎn)物形成Bcl-2/Bax異源二聚體等途徑抑制凋亡。劉勇等［28］針刺局灶性永久性腦缺血大鼠模型，針刺部位為大鼠患側(cè)百會(huì)透曲鬢穴;雙側(cè)風(fēng)池穴、患肢的內(nèi)關(guān)穴、足三里穴;針刺時(shí)間為造模后2小時(shí)、72小時(shí)、168小時(shí)，分別在術(shù)后的1天、3天、7天、14天共4個(gè)時(shí)間點(diǎn)，進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)定，并觀察大鼠腦內(nèi)Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)情況。結(jié)果表明，針刺治療可明顯提高缺血性中風(fēng)大鼠Garcia評(píng)分，改善腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)等神經(jīng)功能;同時(shí)針刺治療可以明顯降低大鼠腦內(nèi)Bax蛋白表達(dá)，促進(jìn)Bcl-2蛋白表達(dá)，減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡;而且中風(fēng)后2小時(shí)針刺治療介入效果優(yōu)于72小時(shí)、168小時(shí)治療組。

2．4 頭、體針治療可以減輕中風(fēng)后繼發(fā)性腦損傷、促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)

腦出血急性期，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)增殖活躍的前體細(xì)胞可出現(xiàn)巢蛋白的表達(dá)，巢蛋白屬于一種胚胎性中間絲蛋白，被認(rèn)為是神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物之一。當(dāng)發(fā)生腦損傷時(shí)，腦內(nèi)的神經(jīng)干細(xì)胞可被誘導(dǎo)增殖、定向遷移及分化，對(duì)受損的腦組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行修復(fù)和重塑，此時(shí)巢蛋白做為神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)記物，在受損腦組織中的表達(dá)反映了神經(jīng)干細(xì)胞的變化。李丹等［29］以大鼠自體血制備腦出血大鼠模型，研究針刺腦出血急性期大鼠患側(cè)百會(huì)穴、曲鬢穴對(duì)巢蛋白的影響，結(jié)果表明針刺可以上調(diào)腦出血大鼠腦內(nèi)巢蛋白表達(dá)，說(shuō)明針刺治療可以促進(jìn)腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖分化，修復(fù)替代受損的腦組織。細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signalregulated kinase，ERK)是絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)的家族成員之一，ERK在介導(dǎo)細(xì)胞增殖、分化及存活中發(fā)揮重要作用，ERK可被神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、生長(zhǎng)因子等多種信號(hào)激活，通過(guò)谷氨酸的釋放、激活Caspase-3的表達(dá)、促進(jìn)氧化應(yīng)激等途徑使神經(jīng)細(xì)胞受損，參與中風(fēng)發(fā)生后的病理生理過(guò)程。李夢(mèng)等［30］采用毫針針刺大腦中動(dòng)脈閉塞模型大鼠，針刺選穴水溝、神庭、百會(huì)、風(fēng)府穴，連續(xù)4療程后采用RT-PCR方法檢測(cè)大鼠缺血側(cè)腦室下區(qū)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal regulated kinases，ERK)的基因表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)4個(gè)療程后，針刺組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分較模型組明顯降低，針刺組大鼠腦組織的ERK1 mRNA、ERK2 mRNA表達(dá)較模型組明顯降低，說(shuō)明針刺可能具有調(diào)節(jié)ERK通路，下調(diào)ERK1/2的表達(dá)，從而可以減輕大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元的損傷，促進(jìn)大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)的作用。增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)又稱周期蛋白或修復(fù)蛋白，在增殖細(xì)胞中合成或表達(dá)，參與DNA合成，在細(xì)胞周期中，PCNA的表達(dá)水平與DNA合成的時(shí)相變化相一致，所以PCNA可直接反映出細(xì)胞的增殖狀態(tài)。在腦缺血再灌注過(guò)程中，PCNA參與了腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞DNA損傷的修復(fù)過(guò)程，可以影響DNA損傷的修復(fù)。胡光強(qiáng)等［31］根據(jù)醒腦開(kāi)竅針刺治療中風(fēng)病的學(xué)說(shuō)，選擇腦缺血再灌注大鼠模型，取穴內(nèi)關(guān)、人中，針刺手法以重雀啄法。針刺干預(yù)3天后，觀察患側(cè)PCNA表達(dá)情況。結(jié)果表明，針刺治療可以促進(jìn)患側(cè)腦PCNA的表達(dá)，說(shuō)明針刺可以促進(jìn)細(xì)胞增殖和DNA修復(fù)，從而改善神經(jīng)功能。

3 結(jié)語(yǔ)及展望

針刺治療中風(fēng)病及其相關(guān)并發(fā)癥在中國(guó)有著悠久的歷史，針刺治療是急性中風(fēng)病的治療選擇之一［32］。針刺可以從多個(gè)方面、多個(gè)層次干預(yù)中風(fēng)發(fā)生后的病理生理過(guò)程，達(dá)到治療急性中風(fēng)病的目的。但是，也看到，許多學(xué)者在研究設(shè)計(jì)中，動(dòng)物機(jī)體功能狀態(tài)、針刺時(shí)機(jī)、選穴配伍、電針刺激強(qiáng)度的大小、安慰針刺方法的選取等方面還沒(méi)有完全統(tǒng)一。以上因素在不同水平上的優(yōu)化組合方案，也許需要今后進(jìn)一步研究和探討。

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