王瑋瑋，王厚照

（中國人民解放軍第一七四醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬成功醫(yī)院檢驗科，福建 廈門 361003）

妊娠期女性念珠菌感染調(diào)查及耐藥性分析

王瑋瑋，王厚照△

（中國人民解放軍第一七四醫(yī)院/廈門大學(xué)附屬成功醫(yī)院檢驗科，福建 廈門 361003）

目的調(diào)查妊娠期女性外陰陰道念珠菌病（VVC）的發(fā)病率，并對分離的念珠菌進行鑒定和藥物敏感性分析。方法選取于該院產(chǎn)科門診就診的745例妊娠期女性，記錄其臨床一般資料及分泌物鏡檢和培養(yǎng)結(jié)果。對妊娠期女性分泌物真菌感染及藥物敏感性狀況進行分析。結(jié)果妊娠期女性VVC的發(fā)病率為10.20%，VVC復(fù)發(fā)者占18.50%。76例VVC患者中白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、熱帶念珠菌和其他念珠菌感染者分別占80.26%、8.95%、3.95%、1.32%和6.58%。61株白色念珠菌對兩性霉素B和5－氟胞嘧啶均敏感，對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐藥率分別為7.89%、6.58%、9.21%。光滑念珠菌、熱帶念珠菌和其他念珠菌對所用抗菌藥物均敏感。結(jié)論VVC是妊娠女性的常見感染，白色念珠菌仍然是主要致病菌，其次為光滑念珠菌。念珠菌對常用抗真菌藥物中的兩性霉素B和5－氟胞嘧啶較為敏感，對氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑存在一定程度的耐藥性。

念珠菌感染； 藥物敏感； 孕婦

念珠菌是引起女性生殖道感染的常見條件致病菌之一，在陰道菌群平衡時不致病。妊娠期女性由于陰道生態(tài)環(huán)境的改變，易導(dǎo)致念珠菌繁殖而引起外陰陰道念珠菌病（VVC）。本研究通過對妊娠期女性陰道分泌物進行涂片、培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗，分析了本地區(qū)妊娠期女性外陰念珠菌感染情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2014年5月于本院產(chǎn)科門診就診的妊娠期女性745例，其中早孕234例、中孕249例、晚孕262例，年齡23～39歲，無異常產(chǎn)科情況、無糖尿病病史、無免疫缺陷性疾病，孕期無抗菌藥物、激素等用藥史。

1.2 儀器與試劑 實驗用真菌培養(yǎng)基為北京奧博星生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的沙氏瓊脂培養(yǎng)基；真菌鑒定使用法國生物梅里埃生產(chǎn)的全自動微生物分析儀VITEK－2及配套念珠菌鑒定卡；藥敏使用法國bioMerieux.sa公司生產(chǎn)的念珠菌藥敏試劑盒（微量稀釋法）。

1.3 方法

1.3.1 真菌鏡檢 標本置于載玻片后加1滴10%氫氧化鉀（KOH），覆上蓋玻片，微加熱后輕壓蓋玻片，驅(qū)逐氣泡并壓勻標本，再以濾紙條吸去周圍溢出液。先在低倍鏡下尋找（遮去強光源），發(fā)現(xiàn)真菌的菌絲或孢子后再在高倍鏡下觀察并證實。

1.3.2 真菌鑒定及藥敏試驗 將受檢者陰道分泌物接種于沙氏瓊脂平板，35℃溫箱培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果［1］。菌種鑒定按儀器試劑操作說明進行。藥敏試驗操作及結(jié)果判讀按試劑盒標準操作說明進行，抗真菌藥物為氟胞嘧啶、兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑。標準菌株為ATCC90078白色念珠菌。

1.3.3 VVC的診斷 VVC診斷依據(jù)樂杰主編《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版的診斷標準進行［2］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，鏡檢和真菌培養(yǎng)陽性率的比較采用四格表資料的χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 真菌感染現(xiàn)狀 上述745例納入研究者中有76例檢出VVC，占10.20%（76/745）；其中初發(fā)者67例，占81.58%（67/76）；復(fù)發(fā)者9例，占11.84%（9/76）。早孕者中檢出VVC患者24例，占9.88%（24/243）；中孕者中檢出VVC患者24例，占13.25%（33/249）；晚孕者中檢出VVC患者19例，占7.25%（19/262）。

2.2 鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果 745例被調(diào)查者中有82例鏡檢見孢子及（或）菌絲，陽性率為11.00%（82/745）；76例真菌培養(yǎng)呈陽性，陽性率為10.20%（76/745）。鏡檢和真菌培養(yǎng)陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 真菌種類分布 上述分離得到的菌株以白色念珠菌為主，占80.26%（61/76）。另外，光滑念珠菌、克柔念珠菌、其他念珠菌分別占8.95%（6/76）、3.95%（3/76）、16.58%（5/76）；熱帶念珠菌較少，僅占1.32%（1/76）。見表1。

2.4 藥敏試驗 本研究中白色念珠菌對兩性霉素B和5－氟胞嘧啶均敏感，對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的敏感率分別為72.11%、73.42%、70.79%；光滑念珠菌、熱帶念珠菌和其他念珠菌對所用抗菌藥物均敏感；3株克柔念珠菌中有1株對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑耐藥。見表2。

2.5 念珠菌耐藥情況 將陰道念珠菌耐藥情況進行統(tǒng)計以探討本院臨床分離念珠菌的耐藥性變遷情況，將2011～2012年從本院妊娠期女性臨床標本分離得到的68株陰道假絲酵母耐藥情況進行統(tǒng)計，見表3。

3 討 論

念珠菌寄生在女性陰道中多以雙相形態(tài)存在，即芽生孢子和假菌絲。以芽生孢子寄生時不引起臨床感染癥狀；出現(xiàn)大量假菌絲時念珠菌處于致病狀態(tài)。妊娠期女性由于雌激素的增加使陰道黏膜充血、水腫、通透性增強，同時宮頸腺體分泌明顯增加，導(dǎo)致陰道分泌物明顯增多，局部環(huán)境潮濕，以及高水平的雌激素導(dǎo)致陰道環(huán)境糖原水平較高，均有利于念珠菌的生長繁殖，易導(dǎo)致念珠菌繁殖而引起外陰VVC感染，妊娠期VVC的檢出率為10.0%～44.3%［3］。另有文獻報道，早產(chǎn)孕婦（＜35周）孕14周和孕28周時VVC的檢出率分別為21.1%和19.5%，孕婦VVC檢出率為9.4%［4］。

Fidel等［5］在去勢后的小鼠身上注射外源性雌激素，并在其陰道內(nèi)注入白色念珠菌孢子，動態(tài)觀察小鼠陰道灌洗液的念珠菌載量，發(fā)現(xiàn)雌激素水平下降，念珠菌的載量隨之下降，妊娠期較高雌激素，使得妊娠期VVC的臨床發(fā)病率明顯增高，且易造成感染反復(fù)發(fā)生，復(fù)發(fā)趨勢增高。

本研究顯示白假絲酵母為妊娠期VVC的主要致病菌，其次為光滑念珠菌，克柔念珠菌、熱帶念珠菌及其他念珠菌分離率相對較低。

從本研究藥敏結(jié)果來看，幾種念珠菌對兩性霉素B和5－氟胞嘧啶均敏感，白色念珠菌和克柔念珠菌對氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑均出現(xiàn)了一定程度的耐藥。氟胞嘧啶和兩性霉素B抗真菌活性較高，但這兩種藥物有較大不良反應(yīng)，如腎毒性大和肝功能損傷等，臨床應(yīng)謹慎使用。氟康唑和伊曲康唑是目前臨床治療白色念珠菌病的常用藥物，但近年來由于過度使用，導(dǎo)致白色念珠菌其敏感性降低。伏立康唑為新一代三唑類抗真菌藥，通過競爭性抑制細胞色素P450依賴的14α－脫甲基酶而阻斷細胞膜麥角固醇的生物合成，導(dǎo)致細胞膜的構(gòu)成和功能障礙，而抑制真菌的生長和繁殖。

相對于白色念珠菌，非白色念珠菌對念珠菌藥物的敏感性明顯降低，妊娠期非白色念珠菌性陰道炎的治療比白色念珠菌感染困難，且不同孕期的用藥存在一定差異，早、中孕期宜首選制霉菌素制劑；晚孕期的非白色念珠菌可能存在對克霉唑和制霉菌素的部分耐藥，此時可選擇咪康唑制劑進行治療，普通克霉唑制劑不應(yīng)用于妊娠期非白色念珠菌性陰道炎的治療［7］。目前普遍認為非CA感染的增加與念珠菌的非處方用藥，及對復(fù)發(fā)性VVC長期不適當?shù)木S持治療和重復(fù)治療有關(guān)。在今后的治療中應(yīng)考慮到菌種的變化與合理用藥，減少耐藥菌種的產(chǎn)生，防止復(fù)發(fā)性VVC的發(fā)生。將該數(shù)據(jù)與此前兩年的藥敏數(shù)據(jù)比較，未發(fā)現(xiàn)明顯差異，可以看出這段時間內(nèi)念珠菌群耐藥率變化不大，但臨床仍應(yīng)根據(jù)實驗室培養(yǎng)及藥敏情況合理選用抗菌藥物。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：873.

［2］樂杰.婦產(chǎn)科學(xué)［M］.6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：238.

［3］ 段純，朱巖，龍峰.妊娠期女性外陰假絲酵母菌檢測及抗真菌藥物敏感性分析［J］.中國醫(yī)藥，2011，6（5）：607－609.

［4］ 劉小平，樊尚榮，李建武.妊娠期婦女外陰陰道念珠菌病的病原學(xué)和治療研究［J］.中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，7（4）：220－222.

［5］Fidel PL，Cutright J，Steel C.Effects of reproductive hormones on experimental vaginal candidiasis［J］.Infect immune，2000，68（2）：651－657.

［6］ 谷曄紅，黃醒華.妊娠期外陰陰道念珠菌病及其對新生兒的影響［J］.中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，8（3）：171－174.

［7］ 祁文瑾，石一復(fù)，許妙玲.妊娠期婦女陰道念珠菌對克霉唑、咪康唑、制霉菌素的敏感性研究［J］.中華全科醫(yī)師雜志，2007，6（5）：280－283.

Investigation on candida infections in pregnant women and drug resistance analysis

Wang Weiwei，Wang Houzhao△
（Department of Clinical Laboratory，the 174th Hospital of PLA/Chenggong Hospital Affiliated to Xiamen University，Xiamen，F(xiàn)ujian361003，China）

ObjectiveTo investigate the vulvaginal candidiasis（VVC）incidence in pregnant women，identify the candida species and analyze the drug resistance of isolated strains.MethodsCandida isolation，sample cultivation，species identification and drug susceptibility test were performed for VVC patients.Seven hundred and forty－five samples were collected.ResultsThe incidence of VVC was 10.20%，and the recurrence of VVC was 18.5%.The proportion of C.albicans，C.glabrata，C.krusei，C.tropicalis and other candida were 80.26%，8.95%，3.95%，1.32%and 6.58%respectively.C.albicans was susceptible to amphotericin and 5－flucytosine，the susceptibility for fluconzazole，itroconazole and voriconazole were 7.89%，6.58%and 9.21%respectively.C.glabrata，C.krusei，C.tropicalis，and other candida were susceptible to those antifungal drugs.ConclusionVVC was an usual infection among pregnant women，C.albicans was the major species，followed by C.glabrata.The resistance of amphotericin and 5－flucytosine were lower，the Candida were resistant to fluconzazole，itroconazole and voriconazole in certain extent.

vulvaginal candidiasis； drug susceptibility； pregnant women

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.024

A

1673－4130（2015）03－0343－02

2014－10－15）

王瑋瑋，女，檢驗技師，主要從事臨床微生物學(xué)與檢驗的研究。 △ 通訊作者，E－mial：wanghouzhao＠126.com。