王姜琳(嘉定區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海 201800)
·個(gè)案與短篇·
血小板假性減低
王姜琳(嘉定區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海 201800)
目前血細(xì)胞分析儀已逐步取代手工法成為它最主要的檢測方法,雖具有快速,簡便,重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),但由于其原理(電阻抗原理)的限制,在實(shí)際檢驗(yàn)工作中常常會(huì)出現(xiàn)血小板的假性減低。近年來有不少關(guān)于研究血小板假性減低的文獻(xiàn),在此對這些文獻(xiàn)作了以下一些總結(jié)。
在日常臨床檢驗(yàn)工作中,當(dāng)檢測出血小板結(jié)果偏低時(shí),首先需要判斷其是否是假性減低,判斷方法大致有以下幾種。
1.1 重復(fù)檢測標(biāo)本 在不同種機(jī)器下重復(fù)檢測血小板偏低的標(biāo)本,看其結(jié)果是否具有可比性。若檢測重復(fù)性差,需推片鏡檢,在細(xì)胞分布均勻處根據(jù)血小板與紅細(xì)胞的比例估算血小板個(gè)數(shù),與機(jī)器檢測結(jié)果比較看是否相符合。
1.2 觀察直方圖 由于RBC與PLT的檢測在同一通道,小RBC和細(xì)胞碎片及血小板自身的聚集對血小板計(jì)數(shù)及平均血小板體積的影響很大,血小板直方圖能反映這些變化。正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布,主要集中在2~20fL內(nèi),一般25~30fL的某一點(diǎn)與橫坐標(biāo)接近。根據(jù)黃祥麗[1]研究,若有小紅細(xì)胞(小紅細(xì)胞體積在25fL內(nèi)影響較大,而在25fL外影響不明顯)干擾,直方圖顯示峰的右側(cè)離橫坐標(biāo)較高,呈拖尾狀,MCV為低平正常,血涂片可見較多小紅細(xì)胞。若有血小板聚集,直方圖顯示峰的左側(cè)起點(diǎn)較高,離橫坐標(biāo)有0.6cm,右側(cè)在20fL處,離橫坐標(biāo)0.4cm,與正常血小板直方圖有明顯差異,同時(shí)MPV增高,MCV和RDW正常,可排除小紅細(xì)胞干擾。若血小板體積過大(>25fL),曲線峰右側(cè)右移,在35fL處才接近橫坐標(biāo),MPV值顯著增高。
1.3 根據(jù)MCV和MPV判斷 根據(jù)鄒喬云等[2]研究顯示,當(dāng)MCV>80fL,MPV<13fL時(shí),儀器的檢測結(jié)果與手工法相比無顯著不同;當(dāng)MCV<80fL時(shí),儀器法計(jì)數(shù)結(jié)果高于手工計(jì)數(shù)結(jié)果,這是因?yàn)樾〖t細(xì)胞或其他顆粒信號可能被誤視為血小板而導(dǎo)致儀器法計(jì)數(shù)血小板假性增高;當(dāng)MPV<8fL或MPV>13fL時(shí),儀器法計(jì)數(shù)結(jié)果明顯低于手工計(jì)數(shù)法,原因是當(dāng)血小板體積小于2fL或大于20fL時(shí),儀器會(huì)自動(dòng)將其排除在外,所以儀器法的計(jì)數(shù)結(jié)果低于手工計(jì)數(shù)法。
2.1 操作因素引起的血小板假性減低
2.1.1 固有誤差 血細(xì)胞分析儀與其試劑,方法應(yīng)當(dāng)配套,檢驗(yàn)工作者需于每日檢測前做好室內(nèi)質(zhì)控,并參加室間質(zhì)控,以確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可溯源性,從而避免血小板計(jì)數(shù)的假性減低。
2.1.2 采血不順 當(dāng)采血不暢用力擠壓時(shí)會(huì)使過多的組織液進(jìn)入血液中,而使得血液被稀釋;此外采血速度慢,還會(huì)引起血液形成肉眼可見或不可見的凝集,從而造成血小板計(jì)數(shù)的假性減低。
2.1.3 采血量 采血量與抗凝劑的比例是否恰當(dāng)將影響血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性,一般抗凝劑與血液比例正常為1∶9,采血量最好為1.5mL,不應(yīng)超過2mL[3],否則血液量過多而抗凝劑相對不足,會(huì)使血小板發(fā)生聚集,從而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性減低。
2.1.4 標(biāo)本放置時(shí)間 根據(jù)潘健華等[4]研究顯示,不同放置時(shí)間對血小板計(jì)數(shù)是存在影響的。研究認(rèn)為標(biāo)本采集后5min內(nèi)血小板測定值明顯減低,30min及90min測定結(jié)果與對照值接近,2h后隨著放置時(shí)間的延長,血小板計(jì)數(shù)值有下降趨勢。血標(biāo)本在采血30min內(nèi)可形成血小板可逆聚集體,而使血小板計(jì)數(shù)下降;血標(biāo)本于室溫下放置超過2h后,血小板計(jì)數(shù)顯著減低,因?yàn)檠“弩w積小并且具有易于黏附,聚集和破壞,室溫下離體時(shí)間過長,可發(fā)生變形、自溶、體積縮小,且放置時(shí)間越長破壞越多。因此血小板檢測應(yīng)于30min至2h內(nèi)完成。
2.2 血小板聚集性增高引起的血小板計(jì)數(shù)假性減低
2.2.1 EDTA依賴造成的血小板假性減低 根據(jù)國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)認(rèn)定,EDTA-K2作為血細(xì)胞分析的抗凝劑已在臨床檢驗(yàn)工作中被廣泛應(yīng)用。EDTA-K2抗凝血可造成血小板的假性減低,它在臨床的發(fā)生率為0.09%~0.21%。EDTA-K2抗凝血引起血小板假性減低的機(jī)制是因?yàn)樗T導(dǎo)血小板膜表面隱蔽抗原暴露或?qū)乖M(jìn)行修飾,導(dǎo)致血漿中預(yù)存的循環(huán)自身抗血小板抗體與之發(fā)生反應(yīng)從而引起血小板相互凝集造成血小板假性減低。此類患者血小板檢測重復(fù)性差,顯微鏡鏡檢可見血小板成堆或呈衛(wèi)星現(xiàn)象,并換用肝素及枸櫞酸鈉等抗凝劑復(fù)檢時(shí)的計(jì)數(shù)結(jié)果與EDTA鹽作為抗凝劑時(shí)的檢測結(jié)果有明顯差異。因此當(dāng)EDTA-K2抗凝血導(dǎo)致血小板假性減低時(shí),必要時(shí)可換用肝素及枸櫞酸鈉等抗凝劑對其進(jìn)行甄別,以判斷血小板為真性減低還是假性減低,若為假性減低再利用手工法進(jìn)行重新計(jì)數(shù)。
2.2.2 某些藥物引起的血小板假性減低 (1)高濃度的Mg離子。臨床上常用MgSO4來預(yù)防控制妊高癥子癇的發(fā)作及用于治療先兆子癇。高濃度的Mg2+有類似Ca2+的生理作用,通過改變血小板胞內(nèi)cAMP水平而引起血小板聚集,造成血小板計(jì)數(shù)假性降低。(2)利奈唑胺抗菌藥。利奈唑胺(第1個(gè)用于臨床的惡唑烷酮類抗菌藥)聯(lián)用方案治療80歲以上感染患者時(shí)血小板減少的發(fā)生率為67.9%,目前它引起血小板減低的機(jī)制還不是很明確,一般認(rèn)為是骨髓抑制,有人認(rèn)為可能與免疫介導(dǎo)有關(guān),服用某些抗菌藥物后也會(huì)引起血小板假性減低。研究還表明這種減低是可逆的,當(dāng)停藥后可逐漸回升。
2.2.3 某些疾病 參閱多篇文獻(xiàn),某些疾病如高血壓、高血脂、自身免疫性疾病,肺內(nèi)感染等均會(huì)使血小板聚集性增高而引起血小板計(jì)數(shù)假性減低。
2.3 血小板體積因素引起的血小板假性減低 由于目前血細(xì)胞分析儀原理(電阻抗原理)的限制,它只能檢測出正常體積(2~20fL)范圍內(nèi)的血小板,當(dāng)血小板體積小于2fL時(shí)會(huì)被當(dāng)作噪音不進(jìn)行計(jì)數(shù),而當(dāng)血小板體積大于20fL時(shí)會(huì)被當(dāng)作紅細(xì)胞而不計(jì)入血小板總數(shù)中,它經(jīng)常發(fā)生于ITP,巨大血小板綜合征及敗血癥等疾病中。因此當(dāng)血小板體積過小或過大時(shí)均會(huì)引起血小板假性減低。
綜上所述,血小板假性減低的原因復(fù)雜多樣,在日常檢驗(yàn)工作中,應(yīng)該謹(jǐn)慎地對待。首先應(yīng)該規(guī)范操作,避免因人為原因?qū)е卵“寮傩詼p低,其次對于發(fā)現(xiàn)血小板減低的標(biāo)本,應(yīng)先于同種機(jī)器下重復(fù)檢測并詢問病史,有必要需聯(lián)合多種方法如重新采樣,更換抗凝劑,手工計(jì)數(shù)等復(fù)檢,以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性,從而為臨床提供有價(jià)值的診療依據(jù)。
[1] 黃祥麗.血小板直方圖對血小板結(jié)果的參考作用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(11):105-107.
[2]鄒喬云,郭慧.儀器法計(jì)數(shù)血小板時(shí)MCV、MPV對結(jié)果的影響[J].中外健康文摘,2011,8(40):23-24.
[3] 孔英蘭,包文芳.血液分析儀計(jì)數(shù)血小板假性減低的影響因素[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2013,20(7):102-103.
[4]潘健華,蔣翡翊,韓永.EDTA-K2抗凝劑標(biāo)本不同放置時(shí)間對血小板計(jì)數(shù)的影響[J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(18):90-91.
10.3969/j.issn.1673-4130.2015.03.070
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1673-4130(2015)03-0430-02
2014-10-25)