王光祥，賈 寧，方 梅，孫 寶

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，蘭州 730070；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，蘭州 730046)

綿羊小反芻獸疫臨床病例的病理學(xué)觀察

王光祥1，2，賈 寧1*，方 梅1，孫 寶1

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，蘭州 730070；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所，蘭州 730046)

旨在深入探討綿羊小反芻獸疫的病理變化特點(diǎn)。對(duì)臨診疑似小反芻獸疫綿羊進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)和確診，并對(duì)6例病羊進(jìn)行病理解剖學(xué)和病理組織學(xué)研究。結(jié)果表明，經(jīng)N基因RT-PCR檢測(cè)，擴(kuò)增出350 bp 左右特異性片段，確診該羊病為綿羊小反芻獸疫。病理解剖學(xué)觀察顯示，病羊鼻腔、眼睛有多量黃色稀薄或黏膿性分泌物，口腔黏膜有程度不等潰爛。肺有程度不等肺炎，肝、脾表面及切面有大量針尖至粟粒大小灰白色或黃白色病灶分布。全身淋巴結(jié)腫大呈漿液性或出血性淋巴結(jié)炎，尤以腸系膜淋巴結(jié)和支氣管淋巴結(jié)為重。腸黏膜呈不規(guī)則條紋狀或斑塊狀出血，以小腸最明顯，甚至形成潰瘍。病理組織學(xué)觀察顯示，肺、支氣管、肝、脾、淋巴結(jié)均有大量多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)增生，呈灶狀聚集或散在分布，細(xì)胞質(zhì)中含有圓形嗜酸性包涵體。肺呈支氣管間質(zhì)性肺炎，肺泡及間質(zhì)有大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞增生浸潤(rùn)。肝、脾、腎等器官實(shí)質(zhì)廣泛變性、壞死，間質(zhì)中有巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞增生浸潤(rùn)。研究證明，病羊多組織器官中大量含嗜酸性胞漿包涵體多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)的增生和支氣管間質(zhì)性肺炎的形成是綿羊小反芻獸疫重要并具代表性的病理變化特點(diǎn)。有關(guān)脾與淋巴結(jié)中大量含嗜酸性胞漿包涵體的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)呈灶狀聚集或散在分布在國(guó)內(nèi)外尚屬首次報(bào)道。

綿羊；小反芻獸疫；病理學(xué)；多核巨細(xì)胞；合胞體細(xì)胞；支氣管間質(zhì)性肺炎

小反芻獸疫(peste des petits ruminants，PPR)也稱小反芻獸假性牛瘟、肺腸炎、口炎肺腸炎復(fù)征，是由小反芻獸疫病毒(PPRV)引起的一種急性接觸性傳染病，主要感染小反芻動(dòng)物(山羊和綿羊等)[1-4]。羊小反芻獸疫具有發(fā)病率高、死亡率高的特點(diǎn)，其臨診特征為發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎與腸炎[5-8]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將PPR列為必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國(guó)農(nóng)業(yè)部將其列為一類動(dòng)物疫病。2007年7月，我國(guó)首次在西藏自治區(qū)阿里地區(qū)出現(xiàn)小反芻獸疫疫病流行[9]。

2014年1月，甘肅省武威市某羊場(chǎng)綿羊與山羊先后發(fā)生疑似小反芻獸疫疫情，病羊發(fā)病急，體溫高(41 ℃以上)、食欲廢絕，眼睛、鼻腔、口腔流出淡黃色黏稠或膿性液體。病羊口腔、牙齦黏膜充血、出血，甚至出現(xiàn)大范圍潰爛。部分病羊腹瀉明顯，排帶血稀糞。該病導(dǎo)致羊場(chǎng)羊大量死亡。經(jīng)臨診初步判定為疑似羊小反芻獸疫。病料后經(jīng)國(guó)家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心和甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心分別確診為羊小反芻獸疫。為進(jìn)一步探討該病，并深入研究羊小反芻獸疫病理學(xué)變化特點(diǎn)，作者對(duì)病羊進(jìn)行了病原學(xué)診斷和系統(tǒng)病理學(xué)研究。

1 材料與方法

1.1 病料來(lái)源

對(duì)甘肅省武威市某羊場(chǎng)6例病綿羊(4♀2♂)臨診病理觀察后，放血處死，進(jìn)行系統(tǒng)病理剖檢。迅速無(wú)菌采取心、肝、脾、肺、腎、淋巴結(jié)、小腸和氣管等組織，液氮保存，再迅速移至實(shí)驗(yàn)室-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。同時(shí)，分別切取病羊心、肝、脾、肺、腎、支氣管、十二指腸、結(jié)腸、支氣管淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)數(shù)塊(約1 cm3)，4%多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1 mol·L-1pH7.4)中固定。

1.2 主要試劑

RNeasy Mini Kit 購(gòu)自 QIAGEN 公司；一步法RT-PCR試劑盒、DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、DNA 凝膠回收試劑盒均購(gòu)自大連 TaKaRa 公司；PPRV 弱毒疫苗購(gòu)自新疆天康控股(集團(tuán))有限公司。

1.3 尸體剖檢

對(duì)6例病羊進(jìn)行系統(tǒng)病理剖檢，外部檢查→剝皮與皮下相關(guān)組織、器官檢查→腹腔剖開(kāi)→腹腔器官的系統(tǒng)檢查(包括肝、脾、腎、胰、前胃、真胃、小腸、大腸、腸系膜及淋巴結(jié)等)→骨盆腔器官的檢查→胸腔剖開(kāi)→胸腔器官的系統(tǒng)檢查(包括心、肺、支氣管、支氣管淋巴結(jié)等)→氣管、鼻腔檢查。

1.4 RT-PCR檢測(cè)

1.4.1 病料處理 取適量肺、肝、小腸和氣管組織塊置于平皿中，用PBS清洗組織表面數(shù)次，然后移至研缽中，用剪刀剪碎組織，按1∶4 比例加入 PBS，充分研磨至組織完全被研碎，反復(fù)凍融3次。然后，在4 ℃下5 000 r·min-1離心 30 min，取上清，采用孔徑0.22 μm的一次性濾器過(guò)濾，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 病料組織中總RNA提取 將1.4.1中處理所得的組織上清和用生理鹽水溶解的小反芻獸疫活疫苗按RNeasy mini Kit 試劑盒說(shuō)明書(shū)方法提取總 RNA。

1.4.3 引物設(shè)計(jì)及RT-PCR 參照 GenBank 上登錄的 China/Tibet/Geg/07-30株全基因序列(序列號(hào)FJ905304.1)，用 Oligo 6.0軟件設(shè)計(jì)一對(duì)特異性擴(kuò)增PPRVN基因片段引物，引物由大連寶生物公司合成。NP1(1 288-1 310)：5′- TCTCGGAAA-TAGCCTCGCAGGCT-3′，NP2(1 617-1 638)：5′- CCTCCTCCTGGTCCTCCAGAATCT-3′以提取的病料RNA為模板，以小反芻獸疫活疫苗RNA為陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行RT-PCR，PCR 反應(yīng)條件為：50 ℃，60 min進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄；95 ℃，5 min進(jìn)行Taq酶的激活；30個(gè)循環(huán)的PCR(94 ℃ 2 min，60 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min)；72 ℃10 min延伸。RT-PCR 產(chǎn)物大小為351 bp。

1.5 病理組織學(xué)觀察

組織樣品固定完成后，常規(guī)石蠟包埋，制備連續(xù)切片。經(jīng)HE染色、Masson三色染色、高碘酸-Schiff(PAS)染色、甲基綠派洛寧(Methyl green-Pyronin，MGP)染色及甲苯胺藍(lán)(MTB)染色，光學(xué)顯微鏡觀察。采用OLYMPUS BX-UCB/ BX61 圖像分析系統(tǒng)觀察、拍照。

2 結(jié) 果

2.1N基因片段RT-PCR結(jié)果

根據(jù) PPRVN基因片段RT-PCR擴(kuò)增結(jié)果，4個(gè)樣品(小腸和氣管)，均擴(kuò)增出350 bp 左右特異性擴(kuò)增條帶，與陽(yáng)性對(duì)照一致(圖1)。圖1中2、3分別為病羊的氣管組織和小腸組織，4為小反芻獸疫活疫苗RNA陽(yáng)性對(duì)照，5為陰性對(duì)照。上述結(jié)果證明該檢測(cè)樣品中有PPRV存在，可判斷該羊病為羊小反芻獸疫。

1.DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；2.氣管病料；3.小腸病料；4.陽(yáng)性對(duì)照；5.陰性對(duì)照1.DNA marker；2.Tracheal samples；3.Small intestine samples；4.Positive control；5.Negative control圖1 N 基因片段RT-PCR結(jié)果Fig.1 The RT-PCR results of N gene fragments

2.2 臨床診斷與剖檢病理變化

6例病羊?yàn)?～5月齡綿羊，臨床診斷上均呈現(xiàn)急性高燒，平均體溫高達(dá)41.5 ℃。病羊精神沉郁，被毛粗亂，食欲廢絕，呼吸困難，其中3例臥地不起，4例病羊有程度不等腹瀉，排出黃綠色、褐色稀糊狀有惡臭糞便。6例病羊鼻腔、眼睛均有多量亮黃色稀薄或黏膿性分泌物，眼結(jié)膜和鼻黏膜潮紅、充血、出血，有的病羊眼睛和鼻孔因黏膿性分泌物導(dǎo)致眼瞼粘連和鼻孔堵塞。病羊口腔有多量灰白色黏稠分泌物，口腔黏膜程度不等充血、出血，且5例病羊口腔黏膜有大片潰爛(圖2A)。

胸腔及肺，6例病羊胸腔有多少不等炎性滲出液蓄積，滲出液呈淡黃色或黃紅色不等，2例病羊胸腔滲出液中蓄積多量纖維素。6例病羊肺的尖葉、心葉及膈葉邊緣有程度不等肺炎病變。有的病變肺內(nèi)形成大小不等化膿性病灶，有的肺表面覆蓋多少不等的纖維素，在肺炎病變區(qū)周圍常有水腫和氣腫。氣管、支氣管黏膜程度不等充血、出血，黏膜表面覆有大量黃白色黏稠混有泡沫的液體。支氣管淋巴結(jié)、縱膈淋巴結(jié)明顯腫大、充血、出血，切面濕潤(rùn)，有的切面可見(jiàn)針尖大小黃白色散在病灶。

心，6例病羊心包積有多少不等黃紅色渾濁液體，右心衰竭，質(zhì)地變軟、色澤變淡。冠狀溝周圍及心尖有程度不等出血，嚴(yán)重時(shí)，整個(gè)心表面及內(nèi)膜下密布斑點(diǎn)狀或條紋狀出血。

肝，6例病羊肝均程度不等腫大、淤血、出血，肝表面與切面有針尖至粟粒大小灰白色或黃白色病灶呈散在或彌漫性分布。膽囊腫脹，膽汁淤積。

脾，6例病羊脾程度不等腫大、淤血，脾質(zhì)地軟化，表面與切面可見(jiàn)針尖至粟粒大小灰白色或黃白色病灶呈散在或彌漫性分布。

腹腔與胃腸道，6例病羊腹腔均有多少不等腹水蓄積，瘤胃、網(wǎng)胃與瓣胃黏膜程度不等充血。皺胃黏膜程度不等出血，3例病羊皺胃黏膜有小潰瘍形成。小腸與大腸黏膜均程度不等充血、出血，甚至呈條紋狀出血(圖2B)。腸淋巴濾泡明顯腫大、突出，部分腫大的腸淋巴濾泡壞死形成潰瘍，尤以小腸明顯。腸系膜淋巴結(jié)程度不等腫大、充血，切面濕潤(rùn)，有的切面也見(jiàn)針尖大小黃白色病灶散在。

腎，6例病羊腎均程度不等淤血、出血，切面皮質(zhì)增寬，色黃、質(zhì)脆。

胰呈程度不等淤血、出血。

2.3 病理組織學(xué)變化

肺，4例病羊肺呈程度不等的支氣管間質(zhì)性肺炎，1例為間質(zhì)性肺炎合并化膿性肺炎，1例呈纖維素性肺炎。在支氣管間質(zhì)性肺炎病例中，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞增生、脫落，肺泡腔內(nèi)聚集大量巨噬細(xì)胞(圖3A、圖3B)，并可見(jiàn)數(shù)量不等的多核巨細(xì)胞出現(xiàn)，小的多核巨細(xì)胞僅2～3個(gè)細(xì)胞核，大的多核巨細(xì)胞可有數(shù)個(gè)或十?dāng)?shù)個(gè)細(xì)胞核(圖3A、圖3B)，其中有圓形嗜酸性包涵體。肺泡間隔、支氣管周圍有大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞浸潤(rùn)。細(xì)支氣管腔內(nèi)常有脫落的黏膜上皮細(xì)胞和炎性滲出物，有的細(xì)支氣管腔內(nèi)有數(shù)量不等多核巨細(xì)胞。后期，結(jié)締組織大量增生，肺泡內(nèi)炎性滲出物被機(jī)化。在間質(zhì)性肺炎與化膿性肺炎混合病例中，病變肺組織中散在或融合形成大小不等的化膿灶?；搮^(qū)周圍肺組織呈程度不等的間質(zhì)性肺炎。

A.病羊口腔黏膜潰爛；B.小腸出血條紋A.Ulcer on oral cavity mucous membrane；B.Hemorrhagic stripe on small intestinal mucosa圖2 剖檢病理變化Fig.2 The changes of anatomopathology

肝，6例病羊肝均呈程度不等的變質(zhì)性肝炎。肝細(xì)胞廣泛變性、壞死，小葉中央靜脈及肝竇淤血。肝小葉內(nèi)中央靜脈周圍、局部肝竇周圍、以及門管區(qū)血管與膽管周圍常有大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。有的肝小葉間質(zhì)明顯水腫。4例病羊肝小葉內(nèi)有多核巨細(xì)胞增生，有的呈單個(gè)散在分布于肝細(xì)胞間，有的則呈灶狀聚集分布于肝小葉內(nèi)。小的多核巨細(xì)胞只有2～3個(gè)細(xì)胞核，大的多核巨細(xì)胞體積巨大，其細(xì)胞質(zhì)染色較淡，細(xì)胞質(zhì)中有十?dāng)?shù)個(gè)細(xì)胞核，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形不等，細(xì)胞質(zhì)豐富，其中可見(jiàn)明顯圓形嗜酸性包涵體(圖3C)。進(jìn)一步發(fā)展，多核巨細(xì)胞可發(fā)生變性、壞死。

脾，6例病羊脾程度不等淤血、出血、水腫，原有脾淋巴細(xì)胞廣泛變性、壞死，脾小體數(shù)量減少、體積縮小，中央動(dòng)脈程度不等纖維素樣壞死，白髓與紅髓界限不清。同時(shí)，在脾中以巨噬細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞廣泛增生、浸潤(rùn)。4例病變脾中也有多核巨細(xì)胞呈散在或灶狀聚集，其中可見(jiàn)明顯圓形嗜酸性包涵體(圖3D)。

心，6例病羊心臟呈程度不等變質(zhì)性心肌炎。心肌纖維程度不等變性、壞死，間質(zhì)充血、出血、水腫及巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

腎，6例病羊腎小管上皮細(xì)胞廣泛變性和壞死，管腔內(nèi)有脫落的細(xì)胞及透明蛋白膜形成。腎間質(zhì)充血、出血、水腫以及巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

腸道，6例病羊小腸與大腸呈急性卡他性與出血性炎。腸黏膜上皮廣泛變性、壞死、脫落，固有層程度不等充血、出血、水腫，有大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。

淋巴結(jié)，6例病羊全身淋巴結(jié)，尤其是腸系膜淋巴結(jié)、支氣管淋巴結(jié)等呈急性漿液性與出血性淋巴結(jié)炎。淋巴組織廣泛充血、出血、水腫，淋巴竇擴(kuò)張，其中充滿大量漿液、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。甚至，在擴(kuò)張的淋巴竇內(nèi)也有多核巨細(xì)胞散在或聚集分布(圖3E)。原有淋巴細(xì)胞程度不等壞死。

3 討 論

依據(jù)PPRVN基因片段RT-PCR檢測(cè)結(jié)果，作者從小腸和氣管樣品中均擴(kuò)增出350 bp 左右特異性片段，并與陽(yáng)性對(duì)照一致，證明被檢樣品中有PPRV 的存在。同時(shí)，比對(duì)國(guó)家外來(lái)動(dòng)物疫病研究中心和甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心的診斷結(jié)果，再次證明2014年1月，甘肅省武威市某羊場(chǎng)發(fā)生的羊病為小反芻獸疫。

胃腸道和呼吸道的損傷是羊小反芻獸疫(PPR)重要病理變化[1-2，4，6]。本研究表明，PPR病羊呼吸道與胃腸道有明顯眼觀損傷。病羊鼻腔、口腔均有多量黏稠或黏膿性分泌物；口腔黏膜程度不等充血、出血、潰爛；病羊程度不等腹瀉，排出黃綠色、褐色稀糊狀有惡臭糞便，腸道出血明顯，呈條紋狀或斑塊狀。除胃腸道與呼吸道損傷性變化外，肺、肝、脾及全身淋巴結(jié)等也具有重要眼觀病理改變。肺有程度不等灰紅色肺炎區(qū)；肝、脾表面與切面常有針尖至粟粒大小灰白色或黃白色病灶呈散在或彌漫性分布；全身淋巴結(jié)高度腫大，呈漿液性或出血性淋巴結(jié)炎。這些全身性綜合性宏觀病理變化在綿羊PPR初步診斷中具有一定意義。

A.肺泡內(nèi)多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)(↑)及大量巨噬細(xì)胞；B.呼吸性細(xì)支氣管內(nèi)多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)及大量巨噬細(xì)胞；C.肝內(nèi)多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有圓形嗜酸性包涵體(↑)；D.脾一多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有數(shù)個(gè)嗜酸性圓形包涵體(↑)；E.腸系膜淋巴結(jié)，擴(kuò)張的淋巴竇內(nèi)多核巨細(xì)胞A.A multiple nuclear giant cell or syncytial cell(↑)and numerous macrophage in alveolus；B.Multiple nuclear giant cells or syncytial cells and numerous macrophages in respiratory bronchiole；C.Multiple nuclear giant cells or syncytial cells in liver and eosinophil viral inclusions (↑)in it’s cytoplasm；D.A multiple nuclear giant cell or syncytial cell in spleen and eosinophil viral inclusions (↑)in it’s cytoplasm；E.Mesenteric lymph nodes，cortical sinus is strongly dilated and filled with numerous multiple nuclear giant cells or syncytial cells圖3 病理組織學(xué)變化(HE染色) 400×Fig.3 The changes of histopathology(HE staining) 400×

已有研究表明[6-8，10]，PPR病羊病理組織學(xué)變化的重要特點(diǎn)之一是在損傷的呼吸道和腸道黏膜形成含有嗜酸性包涵體的合胞體。P.Kumar等[3]和N.Toplu[2]分別報(bào)道了PPRV在導(dǎo)致羊口腔黏膜、 鼻甲和氣管黏膜形成糜爛性、 潰瘍性損傷的同時(shí)，在損傷部位黏膜出現(xiàn)多量含2～10個(gè)細(xì)胞核和嗜酸性胞漿包涵體的合胞體細(xì)胞，并且在PPR病羊的病變肺和肝也有含嗜酸性胞漿包涵體的合胞體細(xì)胞出現(xiàn)。M.A.Al-Dubaib[7]甚至報(bào)道PPR病羊腎小管內(nèi)也有含嗜酸性胞漿包涵體的合胞體細(xì)胞出現(xiàn)。本研究分別在PPR病羊肺泡、細(xì)支氣管、肝、脾、淋巴結(jié)中均觀察到數(shù)量不等、形態(tài)不同的含有圓形嗜酸性胞漿包涵體的多核巨細(xì)胞，這些多核巨細(xì)胞也就是合胞體細(xì)胞。小的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)僅有2～3個(gè)細(xì)胞核，大的多核巨細(xì)胞胞質(zhì)中有十?dāng)?shù)個(gè)細(xì)胞核，其胞質(zhì)中含有明顯嗜酸性包涵體。這也進(jìn)一步證明，PPR病羊病變組織中合胞體細(xì)胞的出現(xiàn)是該病的重要病理組織學(xué)特征之一。本研究除在肺、支氣管、肝觀察到大量多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)外，還首次在脾、淋巴結(jié)中觀察到大量含有嗜酸性包涵體的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)出現(xiàn)。

有關(guān)PPR病羊病變組織中多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)的來(lái)源，筆者認(rèn)為有兩方面。一種形式是由于PPRV具有明顯的上皮細(xì)胞親嗜性[3，7-8，11]，因此，PPRV作用于局部組織器官的上皮細(xì)胞，導(dǎo)致上皮細(xì)胞增殖、分化異常而相互融合形成。如在肝、細(xì)支氣管黏膜出現(xiàn)的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)是PPRV作用于肝細(xì)胞和細(xì)支氣管黏膜上皮所形成的融合細(xì)胞體。另一種形式是PPRV引起了機(jī)體全身性單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)活化，巨噬細(xì)胞廣泛增生，進(jìn)一步可引起巨噬細(xì)胞增殖、分化異常而相互融合形成。如在脾、淋巴結(jié)和肺泡內(nèi)出現(xiàn)的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)就屬于巨噬細(xì)胞融合體。本研究觀察到，在PPR病羊不同組織器官中形成的多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)，其不僅細(xì)胞形態(tài)不完全相同，而且細(xì)胞核形態(tài)也存在差異，表明這些多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)在來(lái)源上并不完全相同，可由不同細(xì)胞融合形成。至于PPRV是如何引起上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞增殖、分化異常，并進(jìn)一步相互融合形成多核巨細(xì)胞(合胞體細(xì)胞)的機(jī)制尚需深入研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體全身多器官組織巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的廣泛增生也是羊PPR病理組織學(xué)變化的又一特點(diǎn)。病羊肺大量巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的增生形成廣泛的支氣管間質(zhì)性肺炎和巨噬細(xì)胞性肺泡炎，如有繼發(fā)感染則肺炎形式復(fù)雜化，可形成化膿性肺炎、纖維素性肺炎等。此外，在肝門管區(qū)，脾、淋巴結(jié)、腎間質(zhì)血管周圍以及腸道固有層等都可見(jiàn)廣泛的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞增生。因此，可以認(rèn)為全身多器官組織巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的廣泛增生也是羊PPR重要病理組織學(xué)變化之一。已有研究也證明[2，4，7，11]，PPRV不僅對(duì)上皮細(xì)胞具有親嗜性，而且對(duì)機(jī)體淋巴細(xì)胞也具有明顯的親嗜性。到后期PPRV可導(dǎo)致機(jī)體嚴(yán)重的淋巴細(xì)胞溶解和相關(guān)淋巴組織的損傷，使機(jī)體免疫器官嚴(yán)重受損，抵抗力進(jìn)一步下降，并誘發(fā)機(jī)體繼發(fā)性感染發(fā)生。

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(編輯 白永平)

Studies on the Pathology of the Peste des Petits Ruminants of Sheep

WANG Guang-xiang1，2，JIA Ning1*，F(xiàn)ANG Mei1，SUN Bao1

(1.CollegeofVeterinaryMedicine,GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China；2.LanzhouVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Lanzhou730046，China)

This experiment was conducted to explore the pathological changes of the peste des petits ruminants (PPR) of sheep.On the basis of clinical diagnosis，then the six doubtful sheep of the PPR were definite diagnosed by RT-PCR detection technology.The pathological changes were observed by macroscopy and light microscope and special staining technique.The results showed that the specificNgene fragment of 350 bp of peste des petits ruminants virus (PPRV) were amplified and the PPRV was definite diagnosed as the pathogen of the six sick sheep.The anatomopathological changes showed there were a lot of yellow mucopurulent nasal discharge in nasal cavities of the sheep and there were also many secretions around the eyes.The ulcers of oral cavity mucous membrane were frequently observed.The sheep had pneumonia of different degree and there were numerous yellowish-white lesions from pinpoint-shaped to millet-shaped on the surface of the livers and spleen.The lymphoglandulae of the sheep were obviously swelling and showed serous lymphadenitis and hemorrhagic lymphadenitis.Hemorrhagic stripes，plaques and ulcers were observed on intestinal mucosa and especially on small intestinal mucosa.The histopathological changes indicated that a great number of multiple nuclear giant cells or syncytial cells were observed in lung，bronchus，liver，spleen and lymphoglandulae.The multiple nuclear giant cells or syncytial cells showed decentralized and concentrated distribution in the tissues and organs and there were eosinophil viral inclusions in their cytoplasm.Lung lesions of bronchointerstitial pneumonia were seen obviously in the sheep.There were numerous macrophages，lymphocytes in alveoli and interstitial tissue of the lungs.The parenchymal cells of the liver，kidney and spleen showed widely degeneration and necrosis.A great number of macrophages，plasma cells and lymphocytes were seen in the interstitial tissue of the liver，kidney and spleen.Those results confirmed the proliferation of multiple nuclear giant cells or syncytial cells and bronchointerstitial pneumonia were importantly histopathological changes of the peste des petits ruminants of sheep.

sheep；the peste des petits ruminants；pathology；multiple nuclear giant cells；syncytial cells；bronchointerstitial pneumonia

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.06.018

2014-09-19

王光祥(1976-)，男，甘肅武威人，助理研究員，碩士，主要從事病毒分子生物學(xué)及免疫學(xué)研究，E-mail：wanggx666@163.com

*通信作者：賈 寧(1963-)，男，教授，博士，主要從事獸醫(yī)病理學(xué)與分子病理學(xué)研究，E-mail：1963jianing@163.com

S858.265.3

A

0366-6964(2015)06-1011-07