陜西省人民醫(yī)院(西安710068)

梁 磊 李秀紅 鄒 敏△ 侯玉霞△#

雌激素對(duì)SD大鼠舌下神經(jīng)核電生理的影響*

陜西省人民醫(yī)院(西安710068)

梁 磊 李秀紅 鄒 敏△侯玉霞△#

目的：研究雌激素對(duì)SD大鼠舌下神經(jīng)核電生理的影響。探討雌激素保護(hù)上氣道穩(wěn)定性的機(jī)制，為OSAHS的臨床預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。方法：選取成年7周齡雌性Sprague-Dawley大鼠30只, 隨機(jī)等量分為假手術(shù)組(SHAM組)，去卵巢組(OVX組)，去卵巢+雌二醇組(OVX+E2組)。通過(guò)卵巢切除與雌激素回補(bǔ)建立不同雌激素水平的SD大鼠模型，通過(guò)在體細(xì)胞外記錄技術(shù)檢測(cè)雌激素對(duì)舌下神經(jīng)核自發(fā)電活動(dòng)的影響。結(jié)果：OVX組與SHAM組和OVX+E2組相比，舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電頻率低(小)于其他兩組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P < 0. 05)。結(jié)論：雌激素可以通過(guò)某種途徑來(lái)改變舌下神經(jīng)核的興奮性，進(jìn)而改變頦舌肌及其他舌內(nèi)外肌的緊張性來(lái)影響上氣道的穩(wěn)定。

阻塞性睡眠呼吸暫停及低通氣綜合征(Obstructive sleep apnea syndrome hypopnea，OSAHS)是一種臨床常見的睡眠呼吸紊亂性疾病，以睡眠時(shí)上氣道反復(fù)塌陷阻塞引起呼吸暫停和通氣不足并伴有打鼾為特征[1]。男性發(fā)病率約為女性的2～4倍，絕經(jīng)后女性患病率較絕經(jīng)前明顯升高，提示雌激素對(duì)OSAHS的發(fā)病可能具有保護(hù)作用[2]。頦舌肌是重要的上氣道擴(kuò)大肌，其收縮使舌前伸和壓低，被稱為上氣道的“安全肌”。本研究通過(guò)對(duì)不同雌激素水平大鼠舌下神經(jīng)核電生理特征的研究，探索雌激素影響影響上氣道穩(wěn)定性的可能機(jī)制。

材料與方法

1 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?選取SD大鼠30只，體重300g左右，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供(許可證號(hào):SCXK(陜)2007-001)。將30只SD大鼠隨機(jī)等量分為假手術(shù)組(SHAM組)，去卵巢組(OVX組)，去卵巢+雌二醇(OVX+E2組)，大鼠去卵巢一周后，通過(guò)頸部皮下注射雌激素法建立不同水平的動(dòng)物研究模型。

2 實(shí)驗(yàn)方法 10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠(0.4 ml/100g)，維持體溫在36.5℃。大鼠俯臥位，用耳桿將頭固定于腦立體定位儀上，核團(tuán)定位：根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜后囟后4.90±0.02mm、旁開0.10±0.02mm做標(biāo)志, 鉆孔、去除邊緣骨碎屑，硬腦膜。將溫?zé)崾炗偷稳脬@孔內(nèi)，平齊骨面。測(cè)量囟后13.7mm骨面與前后囟水平高度差。玻璃微電極用直徑0.8mm的玻璃毛胚管固定在微電極拉制儀上，電極管內(nèi)注入2%的膀胺天藍(lán)。小心安放玻璃微電極，打開儀器，連接電極。再次調(diào)整定位坐標(biāo)，根據(jù)監(jiān)聽器監(jiān)測(cè)的聲音變化,以及監(jiān)視器顯示基線突然變細(xì)的現(xiàn)象,判斷電極尖端進(jìn)入空氣與石蠟油界面，記錄高度為0。用推進(jìn)操縱器將微電極2-10um/s緩慢推送至進(jìn)針至7000um左右深度。當(dāng)電信號(hào)進(jìn)入靜息狀態(tài)，繼續(xù)推進(jìn)至出現(xiàn)電信號(hào)或者電位變化，再推進(jìn)200um左右觀察放電情況并記錄。根據(jù)大概核團(tuán)位置和舌下神經(jīng)核神經(jīng)元自發(fā)簇發(fā)放電的電生理特性尋找鑒別舌下神經(jīng)元。若出現(xiàn)簇發(fā)性自發(fā)放電至少觀察平穩(wěn)后放電5min,并保存。

結(jié) 果

OVX組舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電頻率低于OVX+E2組和SHAM組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，OVX+E2組與SHAM組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(附圖)。

附圖 舌下神經(jīng)核細(xì)胞外自發(fā)放電記錄結(jié)果(A：舌下神經(jīng)核自發(fā)放電單個(gè)動(dòng)作電位；B：舌下神經(jīng)核細(xì)胞外自發(fā)放電記錄結(jié)果)

討 論

舌下神經(jīng)核是參與呼吸運(yùn)動(dòng)的重要神經(jīng)核團(tuán)，在維持OSAHS患者上呼吸道的通暢方面發(fā)揮著重要的作用[3]。舌下神經(jīng)元接收高級(jí)中樞及周圍神經(jīng)元和神經(jīng)遞質(zhì)的多方面調(diào)控，具有一定的自動(dòng)節(jié)律性[3-5]。雌激素為一種類固醇激素，主要由卵巢合成，擴(kuò)散到靶組織后與其特異性受體結(jié)合發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)[6]。其可通過(guò)與中樞神經(jīng)細(xì)胞的ERα、β結(jié)合，調(diào)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)的蛋白質(zhì)的合成,影響細(xì)胞的分化、提高多種中樞神經(jīng)細(xì)胞的活性[7]。

本研究通過(guò)建立不同雌激素水平大鼠模型和在體細(xì)胞外放電記錄技術(shù)，初步探索雌激素對(duì)舌下神經(jīng)核的影響。實(shí)驗(yàn)中我們記錄到波寬1.5ms左右的自發(fā)周期性簇發(fā)性放電活動(dòng)，這種電形式是常見的神經(jīng)元胞體的一種放電模式，且與Peever等[5]記錄到的舌下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元放電模式一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SD大鼠體內(nèi)雌激素水平降低，可使舌下神經(jīng)核的自發(fā)放電活動(dòng)明顯減弱，而且通過(guò)雌激素回補(bǔ)能夠增強(qiáng)或維持舌下神經(jīng)核的放電活動(dòng)，說(shuō)明雌激素可以通過(guò)某種途徑來(lái)改變舌下神經(jīng)核的興奮性，進(jìn)而改變頦舌肌及其他舌內(nèi)外肌的緊張性來(lái)影響上氣道的穩(wěn)定。但是我們對(duì)雌激素是通過(guò)哪種通路來(lái)改變舌下神經(jīng)核電活性的還并不了解，今后可以通過(guò)在體多通道同步記錄技術(shù)研究雌激素對(duì)舌下神經(jīng)核及周圍相關(guān)通路神經(jīng)元的影響，來(lái)全面了解雌激素對(duì)舌下神經(jīng)核影響機(jī)制。

[1] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)睡眠呼吸疾病學(xué)組.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(草案)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2002，25(4):195-196.

[2] Bixler EO, Vgontzas AN, Lin HM,etal.Prevalence of sleep-disordered breathing in women:effects of gender[J]. Am J Respi Crit Care Med,2001, 163(3 Pt 1): 608-613.

[3] Awczuk A, Mosier KM. Neural Control of Tongue Movement With Respect To Respiration and Swallowing[J]. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine，2001，12(1)：18-37.

[4] Peever JH，Necakov A，Duffin J. Nucleus raphe obscurus modulates hypoglossal output of neonatal rat in vitro transverse brain stem slices. Journal Of Applied Physiology,2001,90(1):269-279.

[5] 萬(wàn)選才. 大鼠舌下神經(jīng)核分組的肌肉布局式定位及神經(jīng)調(diào)控回路[J]. 遼寧畜牧獸醫(yī). 1997(4): 42-43.

[6] Anderson DC. Sex-hormone-binding globulin[J].Clin Endocrinol (Oxf) 1974;3:69-96.

[7] Christian J. Gruber MD. Walter Tschugguel. Production and Actions of Estrogens[J]. N Engl J Med，2002，346：340-352.

(收稿：2015-04-08)

*國(guó)家自然基金青年項(xiàng)目(81000030)

睡眠呼吸暫停，阻塞性 @低通氣綜合征 舌下神經(jīng) 雌激素類 動(dòng)物，實(shí)驗(yàn) 大鼠

R562

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.08.005

△西安交通大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科

#通訊作者