李少麗 李艷麗/杭州薦量獸用生物制品有限公司 李新華/中國農業(yè)科學院家禽研究所

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豬圓環(huán)病毒病疫苗的應用

李少麗 李艷麗/杭州薦量獸用生物制品有限公司 李新華/中國農業(yè)科學院家禽研究所

一、豬圓環(huán)病毒病的概況

豬圓環(huán)病毒病是最近幾年才被發(fā)現的一種以仔豬斷奶后多系統衰竭綜合征和皮炎腎病綜合征為主要臨床特征的一種新的豬病，由豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus，PCV）引起。1991年加拿大首先報道了該病。1997年，Clark首次證實了PMWS的主要致病原是PCV2病毒。2000年，郎洪武等通過對多個省份采集血清樣本的檢測，證實了PCV2在我國的存在。

PCV2屬于圓環(huán)病毒科，圓環(huán)病毒屬，無囊膜，由單股、共價閉合的環(huán)狀DNA組成，病毒粒子直徑約17 nm，呈二十面體對稱，是目前發(fā)現的最小的一種脊椎動物病毒。該病毒可分為兩種血清型，即PCV1 和PCV2。其中PCV1對豬無致病性，廣泛存在于豬體內和豬源傳代細胞系中，PCV2可在豬群內引發(fā)多種傳染病，如斷奶仔豬多系統衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）等。PCV2不僅可造成仔豬生長緩慢，還會侵害豬的免疫系統，導致豬群免疫抑制，直接引起其他傳染病免疫的失敗，并引發(fā)其他病原的繼發(fā)感染。PCV1基因組全長1 759 bp，PCV2為1 767 bp或1 768 bp，共包括ORF1和ORF2在內的11個ORF。目前已證實，PCV2的ORF1編碼與病毒復制有關的蛋白（Rep蛋白），ORF2編碼病毒衣殼蛋白（Cap蛋白），Cap蛋白為病毒的主要結構蛋白，是刺激機體產生免疫應答的主要抗原，成為該病在流行病學診斷和疫苗研究中的熱點。

二、國內外PCV2疫苗的開發(fā)和應用情況

2001年前后，一些規(guī)?；i場嘗試用PCV2典型發(fā)病豬的病變組織制作PCV2組織苗以預防該病，效果很好。但因考慮到組織滅活苗的生物安全性，實際應用的豬場并不多。在商品化疫苗出現之前，PCV2曾對我國養(yǎng)豬業(yè)造成了很大損失。目前我國養(yǎng)豬場PCV2的血清陽性率高達90%，針對該病的國內外商品化疫苗主要為全病毒滅活疫苗、嵌合病毒疫苗。

1.全病毒滅活疫苗。

我國自2009年以來，已有多個PCV2疫苗產品上市，農業(yè)部批準上市的疫苗均為不同毒株和劑型的全病毒滅活疫苗。如浙江大學周繼勇教授與薦量生物、諾倍威等共同開發(fā)的ZJ/C株、水包油（O/W）型豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗，該毒株在PK-15細胞上生長良好，滅活前半成品病毒含量可高達107.5TCID50/ml。其余均為油包水（W/O）型疫苗，如福州大北農與成都天邦開發(fā)的DBNSX07株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量105.5TCID50/ml以上；武漢中博、科前生物、永順等開發(fā)的WH株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在107.0TCID50/ml以上；江蘇南農高科與洛陽普萊柯等開發(fā)的SH株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在106.0TCID50/ml以上；哈維科與上海海利等開發(fā)的LG株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在105.5TCID50/ml以上。進口的全病毒滅活疫苗主要是法國梅里亞動物保健公司研發(fā)的PCV2礦物油佐劑疫苗，推薦用于母豬的免疫，仔豬獲得的母源抗體可以在5周內有效抵抗PCV2的侵襲。其免疫方式為間隔3～4周免疫2次，但必須在分娩前2周完成，并且在下次懷孕期再次免疫。

2.PCV1-PCV2嵌合病毒疫苗。

美國富道公司研制的PCV2嵌合病毒滅活苗，是將PCV2的ORF2片段置換不致病的PCV1的ORF2片段，獲得PCV1-PCV2嵌合病毒，使其具有與PCV2類似的免疫原性。主要為4周齡以上豬使用，一次肌肉免疫注射。

3.PCV2亞單位疫苗。

勃林格殷格翰動物保健公司的PCV2疫苗（CircoFlex）和英特威/先靈葆雅動物保健公司的PCV2疫苗（Circumvent））均是用昆蟲桿狀病毒表達PCV2的ORF2基因，大量獲得具有免疫原性的PCV2核衣殼蛋白，再加入佐劑制成PCV2亞單位疫苗。勃林格疫苗的免疫方式是對3周齡仔豬給予一次免疫肌肉注射。大量田間試驗表明，該疫苗可為仔豬提供良好的保護。先靈葆雅疫苗的免疫方式為3周齡以上豬，間隔3周給予2次肌肉注射。

4.PCV2疫苗應用情況。

進口疫苗價格昂貴，如勃林格的PCV2亞單位疫苗是獲得我國農業(yè)部批文的唯一一家外資企業(yè)，其市場標價為28元/頭份（國內疫苗約10元/頭份），雖可對仔豬提供良好的免疫保護效果，但由于價格太高，導致一些養(yǎng)殖場“用不起”，國內養(yǎng)殖場一般對種公豬、種母豬、后備母豬等才使用進口疫苗，而對于生產用肉豬不免疫或只免疫國產疫苗。

針對PCV2滅活苗存在著病毒滅活不徹底，疫苗副反應大，免疫持續(xù)期短而需二次免疫，以及進口疫苗價格昂貴等特點，目前國內有些疫苗生產廠家已經開始致力于基因工程疫苗的開發(fā)，如2014年斯澳生物的豬圓環(huán)病毒基因工程疫苗已獲農業(yè)部臨床試驗批文，青島易邦的豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗“易圓凈”也已經發(fā)布上市；這些都標志著豬圓環(huán)病毒基因工程苗已進入國產化階段，并將逐步取代價格昂貴的進口疫苗，成為百姓“用得起”的疫苗產品。

三、展望

豬圓環(huán)病毒病是全球公認的危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病，該病可造成T、B淋巴細胞在外周血中含量降低，并可誘導CD4、CD8等細胞凋亡，造成免疫抑制，不僅造成該類疫苗的免疫失敗，而且容易繼發(fā)或并發(fā)副豬嗜血桿菌、豬附紅細胞體、豬藍耳病、偽狂犬等病原，業(yè)內稱之為豬的“艾滋病”。由于豬PCV2疫苗的免疫普及率僅在20%～30%左右，按我國每年生豬出欄量6億頭，50%免疫比例，10元/頭份計算，未來我國圓環(huán)疫苗的市場銷售額將高達30億元左右。PCV2疫苗已成為繼豬瘟、口蹄疫、藍耳病、偽狂犬等疫苗之后的首個使用量最大的疫苗品種，有很大的發(fā)展前景。因此研制開發(fā)高效、安全、廉價的PCV2疫苗成為防控該病的必然趨勢。

參考文獻（略）