季順鋒

公共場所大型中央空調(diào)冷卻塔水、冷凝水中軍團菌污染的調(diào)查研究

季順鋒

目的調(diào)查研究蘇州相城區(qū)公共場所大型中央空調(diào)冷卻塔水、冷凝水中軍團菌污染情況。方法于2015年8～9月，采集蘇州相城區(qū)22家賓館、5家醫(yī)療機構(gòu)及7家大型商場中央空調(diào)冷卻水，采用GVPC及BCYE培養(yǎng)基，對其實施嗜肺軍團菌分離培養(yǎng)操作，并采取血清分型及相應(yīng)檢定。結(jié)果經(jīng)分析，在冷卻塔冷卻水當(dāng)中，其嗜肺軍團菌的污染率為26.47%（9/34），分離出軍團菌公有11株。在血清分型中以LPI為主，所占比例為37.5%（6/16）。結(jié)論蘇州相城區(qū)公共場所大型中央空調(diào)冷卻塔水、冷凝水存在高的的軍團菌檢出率，嚴(yán)重威脅市民的健康，特別是相關(guān)醫(yī)療機構(gòu)，其軍團菌污染率所占比重高于其他，需要對其實施嚴(yán)格控制。

公共場所；冷卻塔水；冷凝水；軍團菌；調(diào)查

上個世紀(jì)70年代首次發(fā)現(xiàn)軍團菌，由于其所具有的普遍性及高病死率，引起人類社會的廣泛關(guān)注。當(dāng)前引起軍團菌流行及擴散的主要原因為中央空調(diào)中的冷凝水及冷卻水［1］。為了對公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷卻水中的軍團菌污染情況進行詳細(xì)了解，蘇州相城區(qū)于近期實施相關(guān)調(diào)查工作，將本市相城區(qū)醫(yī)療機構(gòu)、大型商場及賓館飯店等34家單位作為本次調(diào)查對象，分析污染現(xiàn)狀。

1 資料與方法

1.1 一般資料

針對本次調(diào)查，試劑選用主要包括軍團菌診斷血清及BCYEQ、GVPL培養(yǎng)基；所采用設(shè)備為體視顯微鏡、濾膜濾器、培養(yǎng)箱及蠕動泵等。

1.2 方法

1.2.1 水樣采集 自2015年8～9月，按照隨機方式對蘇州相城區(qū)22家賓館、5家醫(yī)療機構(gòu)及7家大型商場中央空調(diào)冷卻水進行采集，采用450 ml無菌玻璃瓶予以密封，對軍團菌實施檢測。

1.2.2 水樣預(yù)處理 針對每個冷卻塔，均給與450 ml冷卻水采集，并利用0.22 μm過濾膜及蠕動泵，對其實施富集操作；然后將濾膜剪碎，并對其實施酸處理，將0.01 mol/L鹽酸1 ml加入其中，給與混合，然后實施10～15 min靜置，采用0.02 mol/L氫氧化鉀中和，將pH值控制在7.0左右［1］。

1.2.3 軍團菌的分離培養(yǎng) 將經(jīng)過酸處理后的混合液，在FVPC瓊脂平板上予以接種，利用三角環(huán)推勻至干，然后將其放置于濃度為5% CO2培養(yǎng)箱，在37℃恒溫下，孵育3～12 d，對乎板上菌落生長情況進行每天觀察，對生長的菌落，應(yīng)及時實施挑取轉(zhuǎn)種操作［2］。

1.2.4 軍團菌的培養(yǎng)鑒定 對在GVPC平板上生長的濕潤光滑、圓形稍凸及灰白色等特征的可疑菌落進行挑選。并將其在無半胱氨酸BCYEa培養(yǎng)基、血平板及BCYEa培養(yǎng)基實施轉(zhuǎn)種，放置于培養(yǎng)箱當(dāng)中，在37℃恒溫下，培養(yǎng)3 d后，對結(jié)果進行觀察。如若僅在BCYEa培養(yǎng)基上生長，而在無半胱氨酸BCYEa培養(yǎng)基及血平板上則不生長，則可對其初步判定為軍團菌。實施涂片染色鏡檢操作，進行觸酶、胞內(nèi)熒光、明膠液化及氧化酶試驗，利用玻片凝集法，實施血清凝集鑒定分型，利用標(biāo)準(zhǔn)分型表，對結(jié)果進行判定［3］。

2 結(jié)果

2.1 軍團菌檢驗結(jié)果

針對所選取的34家單位，對其中央空調(diào)系統(tǒng)冷卻水及冷凝水實施軍團菌檢測。其中，所抽查的22家賓館/飯店，有6家軍團菌檢測結(jié)果為陽性；在5家醫(yī)療結(jié)構(gòu)當(dāng)中，其中1家被檢測出軍團菌為陽性；而在7家大型商場當(dāng)中，其中2家被檢測出軍團菌為陽性。34家抽選單位當(dāng)中，有9家單位中央空調(diào)系統(tǒng)冷卻塔當(dāng)中被檢測出軍團菌，其嗜肺軍團菌的污染率為26.47%。見表1。

表1 軍團菌檢驗結(jié)果 ［n，%］

2.2 血清型檢測

針對本次公共場所中央空調(diào)冷卻塔水檢測，其所檢測的9家軍團菌為陽性的單位中，在血清型分析主要包含有4種類型，分別為Lb、Lm、LP6及LP1。見表2。

3 討論

軍團菌在病死率方面高達20%，其所具有的高病死率及特征受到關(guān)注，國內(nèi)外大量資料證實軍團菌為非典型性肺炎的重要病原菌，當(dāng)前已被WHO列入到相應(yīng)傳染病范疇。軍團菌的氣溶膠當(dāng)中利用空氣予以傳播，當(dāng)人吸入引起肺泡發(fā)病，這成為軍團菌病癥得以傳播的最主要形式。對于氣溶膠來講，其產(chǎn)生途徑多種，其中最為重要的則是空調(diào)冷卻塔，且許多證據(jù)均證明其是造成軍團菌爆發(fā)的主要原因。

表2 蘇州相城區(qū)公共場所中央空調(diào)冷卻塔分型結(jié)果［n（%）］

針對所選取的34家單位，其中，所抽查的22家賓館/飯店，有6家軍團菌檢測結(jié)果為陽性；在5家醫(yī)療結(jié)構(gòu)當(dāng)中，其中1家被檢測出軍團菌為陽性；而在7家大型商場當(dāng)中，其中2家被檢測出軍團菌為陽性。34家抽選單位當(dāng)中，有9家單位中央空調(diào)系統(tǒng)冷卻塔當(dāng)中被檢測出軍團菌，其嗜肺軍團菌的污染率為26.47%。此結(jié)論與國內(nèi)外相應(yīng)空調(diào)冷卻水軍團菌檢出率（42%～49%）相比，結(jié)果偏低。造成此種狀況的主要原因為：（1）軍團菌在生長的過程中存在季節(jié)性，比如在夏季時，所采集的水樣軍團菌的陽性檢測率為24%，而在秋季時，其所具有的陽性率低于夏季，甚至存在較小的菌株分離率，主要是因為軍團局在寒冷的氣候下，其生長緩慢。（2）人為因素影響。由于進行采樣的季節(jié)為秋季，部分空調(diào)已經(jīng)開始停用，因此冷卻塔當(dāng)中的水已經(jīng)得到消毒，因此所采集的水樣，存在難分離菌株的狀況。針對軍團菌的流行學(xué)調(diào)查及診斷，均需要對病原菌進行相應(yīng)的確認(rèn)工作。針對軍團菌的培養(yǎng)來講，其容易受到雜質(zhì)及其它形式的微生物污染及抑制，因此，軍團菌分離陽性率結(jié)果偏低［4］。針對軍團菌的流行學(xué)調(diào)查及診斷來講，均需要對病原菌進行相應(yīng)的確認(rèn)工作。針對軍團菌的培養(yǎng)來講，其容易受到雜質(zhì)及其它形式的微生物的污染及抑制，因此，培養(yǎng)的軍團菌分離出的陽性率比較低。

綜上所述，蘇州相城區(qū)公共場所大型中央空調(diào)冷卻塔水、冷凝水存在高的的軍團菌檢出率，嚴(yán)重威脅市民的健康，特別是相關(guān)醫(yī)療機構(gòu)，其軍團菌污染污染率所占比重高，需要對其實施嚴(yán)格控制。

［1］ 商曉春，朱水榮，張睿，等. 杭州市下城區(qū)公共場所中央空調(diào)冷卻水冷凝水軍團菌污染調(diào)查分析［J］. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18（10）：2103-2105.

［2］ 龍一兵，陳文革，陳智，等. 武漢市2007年公共場所中央空調(diào)冷卻塔水軍團菌污染調(diào)查［J］. 中國公共衛(wèi)生管理，2009，25（1）：75-76.

［3］ 侯鳳伶， 申志新， 李建國，等. 河北省中央空調(diào)冷卻水及冷凝水軍團菌污染調(diào)查［J］. 環(huán)境與健康雜志， 2008， 25（4）：984-986.

［4］ 龍彩云，廖國東，許銘清. 茂名市公共場所中央空調(diào)冷卻水中軍團菌污染狀況調(diào)查［J］. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2008，2（2）：177-178.

Investigation on Legionella Contamination in Cooling Tower Water and Condensation Water in the Large Central Air Conditioning in Public Places

JI Shunfeng Centers for Disease Control of Xiangcheng District，Suzhou City，Suzhou 215131，China

Objective Investigation and study of suzhou city in public places large central air conditioning legionella in cooling tower water of condensed water pollution.MethodsFrom Augustto September 2015， acquisition of suzhou city 22 hotel，five medical institutions and seven malls. Central air conditioning cooling water use GVPC and BCYE medium， imposed heavy lung cultivation legionella in operation，and adopt serotyping and corresponding verification.ResultsThrough the analysis of the cooling tower water，its eosinophilic lung legionella pollution rate was 26.47%（9/34），legionella was isolated public 11 strains. In serotyping，its was mainly LPI，the percentage was 37.5%（6/16）.ConclusionPublic places of large central air-conditioning cooling tower water in Suzhou city has high rate of legionella bacteria. It is a serious threat to people's health，especially related to medical institutions，the pollution of legionella pollution rate proportion is higher than other， need strict control.

Public places，Cooling tower water，Condensate， Legionella， Investigation

R126.4

A

1674-9316（2015）30-0015-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2015.30.011

215131 蘇州相城區(qū)疾控中心