郝志香 盧曉輝

(新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 新鄉(xiāng) 453002)

1 概述

小反芻獸疫(pestedespetitsruminants，PPR)，又名小反芻獸偽牛瘟，是由小反芻獸疫病毒引起的一種急性病毒性傳染病。主要感染小反芻動(dòng)物，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征。OIE將其列為A類(lèi)疫病。我國(guó)規(guī)定為一類(lèi)動(dòng)物疫病。免疫血清是緊急預(yù)防和早期治療相應(yīng)傳染病的有效制劑。近期，我市報(bào)道有小反芻獸疫發(fā)生，為了快速控制快速控制疫情的傳播，降低成本，提高治療效果，促進(jìn)畜牧業(yè)的健康發(fā)展，特制備當(dāng)?shù)囟局甑母呙庋濉?/p>

2 方法

2.1 制備高免血清，對(duì)綿羊的選擇

制備高免血清應(yīng)選用近期有過(guò)典型臨床表現(xiàn)且明顯康復(fù)綿羊或者將采集有典型臨床癥狀的病山羊的含毒組織接種體質(zhì)健壯，無(wú)特殊病原體感染的健康綿羊。

2.2 制備高免血清的程序

2.2.1 抗原制備與接種

采集有典型臨床癥狀的病山羊含毒組織作抗原，接種體質(zhì)健壯，無(wú)特殊病原體感染的健康綿羊?？乖臃N：動(dòng)物在免疫過(guò)程中分為基礎(chǔ)免疫及高度免疫?；A(chǔ)免疫一般是注射疫苗，然后連續(xù)多次注射強(qiáng)毒進(jìn)行高度免疫，每次注射劑量，要隨著注射次數(shù)的增加而增加。接種抗原的次數(shù)和劑量，應(yīng)根據(jù)制造抗血清的品種和動(dòng)物健康情況加以調(diào)整。為了獲得效價(jià)高的抗血清，動(dòng)物飼養(yǎng)條件必須保持良好。

2.2.2 血清抗體的檢測(cè)

免疫程序接近結(jié)束時(shí)，測(cè)定血清的抗體效價(jià)，如果效價(jià)已達(dá)規(guī)定的要求，即可視作免疫成功，開(kāi)始采血。若經(jīng)試血，血清效價(jià)不合格，則可繼續(xù)增加注射抗原次數(shù)或劑量，如再試血仍不合格，應(yīng)將動(dòng)物淘汰。測(cè)定免疫血清效價(jià)是及時(shí)掌握采血時(shí)機(jī)的重要步驟。如果用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)測(cè)定血清效價(jià)時(shí),若在抗原孔與抗體孔之間出現(xiàn)沉淀線者,即為陽(yáng)性。最高稀釋倍數(shù)血清孔出現(xiàn)的沉淀線,即為該血清的抗體效價(jià)。瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的效價(jià)通常比環(huán)狀沉淀反應(yīng)稍低。

2.2.3 血清的采集與提取

免疫后，經(jīng)試血，抗體滴度達(dá)到要求后可采血。動(dòng)物采血應(yīng)在上午空腹時(shí)進(jìn)行，禁食一夜，可避免血中出現(xiàn)乳糜而獲得澄清的血清。在操作過(guò)程中,應(yīng)該注意的是,血清的分離應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行,并應(yīng)盡量防止溶血。采血用的器械、容器等用前要進(jìn)行滅菌,以無(wú)菌操作采血,分離的血清加防腐劑經(jīng)檢驗(yàn)合格后分裝和保存。

2.2.4 免疫血清的檢驗(yàn)

抗血清的檢驗(yàn)包括物理性狀檢驗(yàn)、無(wú)菌檢驗(yàn)、支原體檢驗(yàn)、外源病毒檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)、效力檢驗(yàn)和苯酚或汞類(lèi)防腐劑殘留量測(cè)定。物理性狀檢驗(yàn)、無(wú)菌檢驗(yàn)、支原體檢驗(yàn)、外源病毒檢驗(yàn)均按“質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)”中成品檢驗(yàn)的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行。效力檢驗(yàn)則按不同病原的抗血清規(guī)定方法和劑量進(jìn)行。苯酚或汞類(lèi)防腐劑殘留量測(cè)定應(yīng)符合獸用生物制品通則的規(guī)定。

3 注意事項(xiàng)

動(dòng)物的選擇；應(yīng)選擇體質(zhì)健壯，無(wú)特殊病原體感染的動(dòng)物，并且動(dòng)物的飼養(yǎng)條件要好；抗原制備與接種：采集含毒組織時(shí)要做好個(gè)人防護(hù)及無(wú)菌操作，防止抗原的污染；試驗(yàn)全程都要做好無(wú)菌操作，采血用的器械、容器等用前要進(jìn)行滅菌，以無(wú)菌操作采血，所有的采血均需要一動(dòng)物一注射器，并且盡量防止溶血；制備的免疫血清一定要進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)，確保做到無(wú)菌后再進(jìn)行免疫，防止因免疫而造成其他疾病的傳播。

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