龐 棟 李曉燕 王 輝

·實(shí)驗(yàn)研究·

氨氯地平聯(lián)合辛伐他汀對(duì)高脂飲食兔肝臟高密度脂蛋白受體的影響

龐 棟 李曉燕 王 輝

目的 探討高脂飲食及氨氯地平、辛伐他汀對(duì)兔肝臟高密度脂蛋白受體的影響。方法 日本長(zhǎng)耳兔50只隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、氨氯地平組、辛伐他汀組、聯(lián)合用藥組, 各10只。分別給予普通飼料及高脂飼料并加用藥物。于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始、24周末測(cè)血脂水平, 測(cè)定肝臟高密度脂蛋白受體(HDLR)的表達(dá)。結(jié)果 模型組兔血漿總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。氨氯地平組TC、TG、LDL-C高于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。辛伐他汀組TC、TG、LDL-C降低, 高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)升高, 較模型組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。聯(lián)合用藥組TC、LDL-C、TG降低, HDL-C升高, 較對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 較模型組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論 氨氯地平不影響血脂水平, 增加肝臟HDLR表達(dá)；辛伐他汀可明顯調(diào)節(jié)血脂, 增加肝臟HDLR表達(dá)；辛伐他汀、氨氯地平聯(lián)合應(yīng)用較單藥更明顯增加肝臟HDLR表達(dá)。

高脂血癥；氨氯地平聯(lián)合辛伐他汀；高密度脂蛋白受體

作為臨床多發(fā)病, 高血壓、高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素且常合并存在, 如何選擇藥物以更好的控制病情, 預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生尤其重要。大規(guī)模臨床試驗(yàn)證實(shí)氨氯地平聯(lián)合辛伐他汀對(duì)改善預(yù)后有協(xié)同作用, 具體機(jī)制不明。本文就氨氯地平聯(lián)合辛伐他汀對(duì)高脂飲食兔肝臟HDLR的作用進(jìn)行研究, 為高血壓合并高血脂患者臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為日本長(zhǎng)耳兔(雄性)50只, 體重2.0～ 2.5 kg, 購(gòu)自山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2 儀器與試劑 主要儀器：美國(guó)羅氏日立生化儀Modular DPP；WMK-08型電熱恒溫培養(yǎng)箱, OLYMPUS BH-2型光學(xué)顯微鏡。主要試劑：HDL-C、LDL-C、TC、TG檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自四川省邁克科技有限責(zé)任公司；兔抗HDLR, 生物素化山羊抗兔IgG, SABC免疫組化試劑盒, DAB顯色試劑盒, 均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物分組與處理 50只日本長(zhǎng)耳兔隨機(jī)分為五組,分別為對(duì)照組、模型組、氨氯地平組、辛伐他汀組及聯(lián)合用藥組, 每組10只。對(duì)照組給予普通飼料；模型組及藥物組(氨氯地平組、辛伐他汀組及聯(lián)合用藥組)給予高膽固醇飼料, 12周后改為普通飼料12周。藥物組中12周后氨氯地平組給予氨氯地平5 mg/(kg· d)；辛伐他汀組給予辛伐他汀2 mg/(kg·d)；聯(lián)合用藥組給予氨氯地平5 mg/(kg·d)+辛伐他汀2 mg/(kg·d)灌胃, 自由飲水。

1.3.2 血脂 實(shí)驗(yàn)前后禁食, 后耳緣靜脈取血, 測(cè)HDL-C、LDL-C、TC、TG濃度。

1.3.3 肝臟HDLR表達(dá) 抗原修復(fù), 3%H2O2、封閉液孵育,加一抗4℃過(guò)夜, 加二抗37℃ 孵育, DAB顯色。按Fromowitz陽(yáng)性細(xì)胞半定量分級(jí)法［1］觀察結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兔血脂水平比較 對(duì)照組兔血脂實(shí)驗(yàn)前、后比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)前模型組與藥物組兔血脂與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)?zāi)? 模型組兔血漿TC、TG、LDL-C高于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。氨氯地平組TC、TG、LDL-C高于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。辛伐他汀組TC、TG、LDL-C降低, HDL-C升高, 較模型組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。聯(lián)合用藥組TC、LDL-C、TG降低, HDL-C升高, 較對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 較模型組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見(jiàn)表1。

表1 五組兔血漿脂質(zhì)水平檢測(cè)指標(biāo)比較(, mmol/L)

表1 五組兔血漿脂質(zhì)水平檢測(cè)指標(biāo)比較(, mmol/L)

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.01,cP＜0.05；與模型組比較,bP＜0.01

組別 TC HDL-C LDL-C TG實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后對(duì)照組 1.65±0.40 1.68±0.38 0.87±0.28 0.90±0.25 0.61±0.11 0.60±0.14 0.85±0.26 0.87±0.22模型組 1.63±0.34 9.07±1.86a 0.83±0.13 0.89±0.16 0.64±0.28 7.96±1.78a 0.78±0.24 1.13±0.32a氨氯地平組 1.73±0.33 8.71±1.81a 0.77±0.16 1.07±0.25 0.79±0.19 7.42±1.55a 0.85±0.25 1.13±0.31a辛伐他汀組 1.67±0.24 2.28±0.34b 0.83±0.19 1.19±0.27b 0.68±0.11 0.86±0.27b 2.28±0.34 1.91±0.35b聯(lián)合用藥組 1.73±0.31 2.08±0.45bc 0.99±0.34 0.93±0.30bc 0.77±0.27 0.68±0.11bc 2.08±0.45 1.96±0.48bc

2.2 肝臟HDLR的表達(dá) 光鏡下見(jiàn)胞漿內(nèi)棕色顆粒。對(duì)照組陽(yáng)性率90%, 強(qiáng)陽(yáng)性率10%；模型組陽(yáng)性率90%, 強(qiáng)陽(yáng)性率30%, 較對(duì)照組增加, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；氨氯地平組陽(yáng)性率100%, 強(qiáng)陽(yáng)性率40%, 辛伐他汀組陽(yáng)性率100%,強(qiáng)陽(yáng)性率30%, 均較模型組增多, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；聯(lián)合用藥組陽(yáng)性率100%, 強(qiáng)陽(yáng)性率50%, 較模型組增多, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01), 與辛伐他汀組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

3 討論

高密度脂蛋白主要在肝臟合成, 是機(jī)體膽固醇從肝外周組織逆向轉(zhuǎn)運(yùn)回肝臟的主要形式, 可能通過(guò)抗氧化應(yīng)激作用、抗炎作用等［2］發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。肝內(nèi)HDLR可能通過(guò)促進(jìn)發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化部位膽固醇的流出, 并攝取高密度脂蛋白(HDL)中氧化膽固醇酯以形成保護(hù)體系從而發(fā)揮預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的作用, 其表達(dá)受多種因素的影響［3］。

氨氯地平是常用的二氫吡啶類(lèi)長(zhǎng)效鈣通道阻滯劑, 既往研究顯示不僅可以平穩(wěn)、高效的降壓, 還可通過(guò)改善血管內(nèi)皮功能來(lái)抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成, 甚至逆轉(zhuǎn)已形成的動(dòng)脈粥樣硬化, 更加顯著的減緩頸總動(dòng)脈內(nèi)-中膜的增厚［4］。他汀類(lèi)藥物是作用極強(qiáng)的降膽固醇藥物, 有抑制血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖、遷移, 改善內(nèi)皮依賴(lài)性血管舒張功能等非調(diào)脂作用［5］, 能有效減緩冠狀動(dòng)脈病變進(jìn)展。Oqihara等［6］大規(guī)模臨床試驗(yàn)顯示, 氨氯地平聯(lián)合他汀類(lèi)藥物在穩(wěn)定斑塊、治療穩(wěn)定性冠心病等方面有協(xié)同、疊加作用。

綜上所述, 氨氯地平對(duì)兔血脂無(wú)明顯作用, 但可影響肝臟脂蛋白受體表達(dá)；辛伐他汀能升高血漿HDL水平, 使兔肝臟HDLR的表達(dá)增加。氨氯地平與辛伐他汀聯(lián)合應(yīng)用對(duì)血脂有與辛伐他汀相似的作用, 但對(duì)肝臟脂蛋白受體表達(dá)的調(diào)節(jié)較單藥明顯, 提示兩者聯(lián)用可以更好的調(diào)節(jié)脂代謝。

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10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.28.206

2015-04-02］

250013 濟(jì)南醫(yī)院(龐棟 王輝)；榮成市人民醫(yī)院(李曉燕)