沈志勇
利用消毒劑對(duì)禽舍內(nèi)環(huán)境、物品以及墊料稻殼進(jìn)行消毒以殺滅致病微生物,切斷疫病傳播途徑,已成為預(yù)防和控制家禽傳染病流行的一項(xiàng)重要措施。化驗(yàn)室監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)不論是種雞場(chǎng)還是種鴨場(chǎng),空舍期消毒后,活菌檢出率很低,但是鋪上稻殼后,細(xì)菌總數(shù)反而大幅度增加,所以稻殼是養(yǎng)殖場(chǎng)重點(diǎn)消毒的對(duì)象。針對(duì)稻殼消毒目前沒有統(tǒng)一的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),針對(duì)各養(yǎng)殖場(chǎng)消毒模式眾多但消毒效果并不理想的現(xiàn)狀,本試驗(yàn)通過對(duì)稻殼過篩、消毒劑滅菌兩種方式的消毒效果探討,旨在篩選稻殼消毒的最佳方案,也為養(yǎng)殖場(chǎng)制定稻殼消毒的生物安全技術(shù)規(guī)程提供數(shù)據(jù)支持。
1 試驗(yàn)材料與方法
1.1 主要材料
稻殼:源自同一供貨商,同一批次新進(jìn)的。培養(yǎng)基:平板計(jì)數(shù)瓊脂、孟加拉紅均購(gòu)自北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司。篩:養(yǎng)殖場(chǎng)自己制作的小方格邊長(zhǎng)為0.25cm。消毒劑:A(過硫酸氫鉀)、B(=氯異氰尿酸鈉)、C(季銨鹽)、D(戊二醛)、F(過氧化氫)、CuS04、甲醛溶液。
1.2 主要儀器設(shè)備
稻殼過篩機(jī)、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、超凈臺(tái)、注射器等。
1.3 方法
1.3.1 消毒模式過篩處理:稻殼過篩前后細(xì)菌總數(shù)減少率及霉菌總數(shù)減少率的對(duì)比;消毒劑消毒:過篩以后的同一批稻殼,隨機(jī)抽取3份,每份稻殼稱取50g,用大號(hào)注射器抽取對(duì)應(yīng)濃度的消毒劑,每種濃度均噴灑20mL,邊噴灑邊攪拌均勻。
1.3.2 采樣方法樣及樣品處理分別無菌采取消毒前和消毒后的樣品,放人無菌包裝袋中,立即置入4℃保溫盒中,送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。消毒前后的稻殼根據(jù)國(guó)標(biāo)進(jìn)行處理。菌落總數(shù)測(cè)定根據(jù)GB4789.2-2010菌落總數(shù)測(cè)定中的方法進(jìn)行,霉菌根據(jù)GB4789.10-2010霉菌和酵母計(jì)數(shù)中的方法進(jìn)行處理。
1.3.3 檢測(cè)指標(biāo)過篩處理細(xì)菌總數(shù)減少率及霉菌總數(shù)減少率、消毒劑及其最低滅菌濃度的篩選、消毒劑最佳作用時(shí)間的確定。
2 結(jié)果
2.1 稻殼過篩前后細(xì)菌及霉菌檢測(cè)結(jié)果列表(表1)
表1數(shù)據(jù)說明:過篩后細(xì)菌減少率較高,在82.3%~95.4%;過篩后霉菌也有不同程度的減少,減少率在14.3%~61.5%。
2.2 消毒劑及其最低滅菌濃度篩選
2.2.1 消毒劑對(duì)細(xì)菌總數(shù)的影響室溫21℃下,消毒劑作用6h、12h、24h時(shí),細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)結(jié)果(如表2-3)。
從表2、表3看出:在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),7種消毒劑甲醛殺菌效果最好,其濃度≥4%,作用12 h時(shí)就能將每克稻殼所含的細(xì)菌數(shù)控制在10以內(nèi),其次是CuS04(濃度>6%)有一定的殺菌效果,其最佳作用時(shí)間是12h,其他5種消毒劑殺菌效果不明顯。
2.2.2 消毒劑的滅霉效果室溫21℃下,消毒劑作用6h、12h、24h時(shí),霉菌總數(shù)檢測(cè)結(jié)果(如表4-5)。
從表4、表5看出:在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi),甲醛殺滅霉菌效果最好,其濃度在3%,作用24 h時(shí)就能將每克稻殼所含的霉菌數(shù)控制在10以內(nèi),其次是F其濃度≤1:500作用24h時(shí)殺滅霉菌的效果好,CuS04(濃度>6%)有一定的滅霉效果,其他4種消毒劑效果均不明顯。
2.3 消毒劑有效作用時(shí)間的監(jiān)測(cè)
2.3.1 細(xì)菌消毒劑(表6)
上表數(shù)據(jù)說明用4%甲醛溶液消毒稻殼時(shí),6h即可將細(xì)菌1000-/0殺滅,且一直持續(xù)到消毒后48 h;用6%的CuS04消毒時(shí)消毒后12~48h的滅菌效果均比較理想。
2.3.2 霉菌消毒劑(表7)
上表數(shù)據(jù)說明用3%甲醛溶液消毒稻殼時(shí),6h即可將霉菌100%殺滅,且一直持續(xù)到消毒后48 h;用6%的CuS04消毒后6~48h的滅菌效果均比較理想,但不能100%將霉菌殺滅;歐克(1:500)消毒稻殼時(shí),作用6h不能達(dá)到理想效果,作用時(shí)間為24h時(shí)效果理想。
3 結(jié)論
1)稻殼過篩后,細(xì)菌總數(shù)有大幅度降低,細(xì)菌總數(shù)減少率在82.3%~95.4%;霉菌有相對(duì)較小幅度的降低,霉菌減少率在14.29%~61.54%。
2)過篩后的稻殼再用種禽場(chǎng)常用的7種消毒劑消毒,用4%甲醛溶液消毒時(shí),6h即可將稻殼中的細(xì)菌100%殺滅,且一直持續(xù)到消毒后48h;用6%的CuS04消毒后12~48h的滅菌效果均比較理想。用3%甲醛溶液消毒稻殼時(shí),6h即可將霉菌100%殺滅,且一直持續(xù)到消毒后48h;用6%的Cu-S04消毒后6~48h的滅菌效果均比較理想,但不能100%將霉菌殺滅;F(1:500)消毒稻殼時(shí),作用6h不能達(dá)到理想效果,作用時(shí)間為24h時(shí)效果理想。
3)推薦稻殼的最佳滅菌方案是:稻殼先過篩,之后再用4%甲醛噴灑混勻消毒6h;也可以先過篩,再用4%甲醛+6%CuS04作用12h的方案,也能達(dá)到較理想的消毒效果。