張 鐵，邵 茁，李 江，王云亭

（1.中日友好醫(yī)院 檢驗(yàn)科；2.中日友好醫(yī)院，北京 100029）

我國(guó)醫(yī)療資源配置呈倒三角形， 優(yōu)質(zhì)資源大多集中在一線省會(huì)等大城市，又以中心城區(qū)居多。而鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢驗(yàn)設(shè)備和檢測(cè)能力都遠(yuǎn)不及城市大醫(yī)院，檢驗(yàn)人員素質(zhì)也參差不齊，無(wú)法保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 相當(dāng)數(shù)量的基層醫(yī)院選擇將標(biāo)本外送至第三方實(shí)驗(yàn)室。 第三方實(shí)驗(yàn)室在儀器、設(shè)備、技術(shù)方面優(yōu)勢(shì)明顯，檢驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制基本比較完善， 而分析前標(biāo)本收集為較薄弱的環(huán)節(jié)[1]，這個(gè)環(huán)節(jié)在許多醫(yī)院及第三方實(shí)驗(yàn)室往往被忽視。 據(jù)統(tǒng)計(jì)，約70%檢驗(yàn)結(jié)果的差錯(cuò)可溯源到分析前因素[2]。 為探討這一問(wèn)題，我實(shí)驗(yàn)室于2014 年9～12 月對(duì)標(biāo)本放置時(shí)間和溫度對(duì)胃泌素釋放肽前體 （pro-gastrin-releasing peptide，ProGRP）檢驗(yàn)結(jié)果的影響進(jìn)行分析，并提出解決措施。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2008 年5 月在本院參加健康體檢的20名志愿者為檢測(cè)對(duì)象，男、女各10 名，年齡30～50歲，平均38 歲。

1.2 儀器與試劑

采用美國(guó)雅培I-2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)，試劑、標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控為美國(guó)雅培公司提供。

1.3 采血與檢測(cè)

受試者隔夜空腹12h 后， 真空采血管收集非抗凝血，分離血清，采用美國(guó)雅培I-2000 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀檢測(cè)血清ProGRP。 標(biāo)本分離后，每份血清分裝13 管，分別放置20℃， 4℃和-20℃冰箱保存， 分析存放時(shí)間和方式對(duì)ProGRP 測(cè)定值的影響。 檢測(cè)時(shí)間的設(shè)置分別為：20℃： 即刻、6h、24h、48h、96h；4℃和-20℃：6h、24h、48h、96h。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。存放時(shí)間和保存方式對(duì)ProGRP 檢測(cè)的影響采用方差檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 不同溫度及保存條件下的ProGRP 濃度變化

對(duì)即刻、6h、24h、48h、96h 在20℃放置標(biāo)本進(jìn)行ProGRP 濃度測(cè)定， 同時(shí)對(duì)4℃和-20℃低溫冰箱保存標(biāo)本進(jìn)行6h、24h、48 h、96h 時(shí)間點(diǎn)的Pro-GRP 測(cè)定。 20℃條件下，ProGRP 測(cè)定值隨放置時(shí)間呈現(xiàn)逐漸顯著下降趨勢(shì)， 各時(shí)段間的測(cè)定值均差異有顯著性， 與即刻ProGRP 測(cè)得值間差異顯著 （P<0.05，P<0.01）；4℃保存的標(biāo)本測(cè)定值隨放置時(shí)間呈現(xiàn)逐漸顯著下降趨勢(shì)，6h 的測(cè)得值與即刻ProGRP 測(cè)得值間無(wú)顯著差異，24h、48h、96h 的ProGRP 與即刻ProGRP 測(cè)得值間有顯著差異（P<0.05，P<0.01），-20℃冰箱保存的ProGRP 測(cè)定值間均無(wú)顯著性差異，見(jiàn)表1。

2.2 相同時(shí)間點(diǎn)不同保存條件下的ProGRP 濃度變化

同一時(shí)間點(diǎn)不同保存條件下ProGRP 檢測(cè)值間差異顯著，6h、24h、48h、96h 時(shí)20℃放置標(biāo)本測(cè)得值顯著低于4℃和-20℃保存標(biāo)本（均P<0.05），4℃保存標(biāo)本ProGRP 檢測(cè)值顯著低于-20℃保存標(biāo)本（均P<0.05）。

表1 不同溫度及保存條件下的ProGRP 濃度變化

3 討論

胃泌素釋放肽（GRP）是小細(xì)胞肺癌（SCLC）組織的重要產(chǎn)物， 被認(rèn)為是小細(xì)胞肺癌的特異性腫瘤標(biāo)志物。 早在1978 年McDonald 等就從豬的胃組織細(xì)胞中分離出了GRP，GRP 被認(rèn)為是SCLC 的自主生長(zhǎng)因子[3]， 然而血中GRP 極不穩(wěn)定，不能用于臨床檢測(cè)。 后續(xù)大量研究證實(shí)Pro-GRP（31-98） 水平能夠代表GRP 水平和GRP 基因表達(dá)[4]，是一種新的腫瘤標(biāo)志物，這使得以Pro-GRP 作為SCLC 的重要腫瘤標(biāo)志物成為可能。ProGRP 于1994 年被開(kāi)發(fā)為小細(xì)胞肺癌患者的腫瘤標(biāo)志物。 目前，由于血中ProGRP 測(cè)定已成為一種高精度、高靈敏度、易實(shí)行的檢測(cè)方法，在臨床應(yīng)用領(lǐng)域大大增加， 其在醫(yī)學(xué)上的價(jià)值也得到廣泛驗(yàn)證和認(rèn)可，所以當(dāng)前臨床標(biāo)本量也大大增加，有必要對(duì)標(biāo)本的不同保存條件對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響進(jìn)行探討[5]，以避免檢驗(yàn)前影響因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在6h 內(nèi)4℃保存的標(biāo)本對(duì)檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有影響，-20℃保存的標(biāo)本在4d內(nèi)結(jié)果與即刻測(cè)定結(jié)果間均無(wú)顯著差異，20℃保存的標(biāo)本測(cè)得值隨放置時(shí)間呈現(xiàn)逐漸顯著下降趨勢(shì)， 各時(shí)段測(cè)定值間均存在顯著性差異， 與即刻ProGRP 測(cè)定值間差異顯著，這與文獻(xiàn)報(bào)道相符[6]。綜上所述，ProGRP 的標(biāo)本4℃條件下可保存6h，-20℃保存可延長(zhǎng)至4d， 應(yīng)盡量避免室溫放置。臨床檢驗(yàn)工作的任務(wù)是保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，為臨床診斷提供有力的依據(jù)， 在方法的準(zhǔn)確性和靈敏度得到保證的情況下， 檢測(cè)標(biāo)本采集和存放必須符合檢測(cè)要求。ProGRP 的標(biāo)本要求盡量及時(shí)檢測(cè)[7]，如不能及時(shí)檢測(cè)，可將標(biāo)本在-20℃保存，對(duì)檢測(cè)結(jié)果基本沒(méi)有影響， 能很好地滿足臨床診療的需求， 如將標(biāo)本外送至第三方醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最好采用-20℃冷鏈運(yùn)輸。

[1] 黃斯瑜，李爾凡.血液標(biāo)本采集過(guò)程對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（2）：191-192.

[2] 陳江敏.探究血液標(biāo)本采集質(zhì)量與檢驗(yàn)結(jié)果關(guān)系[J].中外醫(yī)療，2013，32（15）：39-40，42.

[3] Molina R，F(xiàn)ilella X，Augé JM.ProGRP：a new biomarker for small cell lung cancer [J].Clin Biochem，2004，37 （7）：505-511.

[4] 胡義德，錢桂生.小細(xì)胞肺癌綜合治療：實(shí)踐指南[J/CD].中華肺部疾病雜志（電子版），2011，4（5）：356-359.

[5] 彭夕芝，徐杰，李慧軍.臨床實(shí)驗(yàn)室分析前的質(zhì)量控制[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，5：635-636.

[6] Stieber P.Pro-gastrin-releasing peptide（ProGRP）-a diagnostic biomarker for small-cell lung cancer [J].Chinese Journal of Lung Cancer，2009，183-186.

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