王紀(jì)坤等

摘 要 為縮短橡膠樹(shù)籽苗芽接苗育苗期，加快籽苗芽接苗接穗萌發(fā)與生長(zhǎng)，采用4種植物激素對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗的萌發(fā)情況和2種植物調(diào)節(jié)劑對(duì)籽苗芽接苗生長(zhǎng)情況的影響進(jìn)行研究。結(jié)果表明：400 μmol/L 6-BA和200 μmol/L GA3均有促進(jìn)籽苗芽接苗萌發(fā)、縮短抽芽時(shí)間的作用。500 μmol/L NAA和20 μmol/L ZT對(duì)萌發(fā)沒(méi)有作用。萌發(fā)后，10～40 μmol/L ZT和50 μmol/L DA-6有促進(jìn)接穗增長(zhǎng)的作用，并提高葉片光合效率和葉綠素含量。

關(guān)鍵詞 巴西橡膠樹(shù) ；籽苗芽接苗 ；激素 ；萌發(fā) ；生長(zhǎng)

分類(lèi)號(hào) S794.1

橡膠樹(shù)籽苗芽接技術(shù)是在傳統(tǒng)芽接技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新的橡膠樹(shù)良種繁育技術(shù)[1]，它應(yīng)用催芽沙床培育2周齡籽苗進(jìn)行離土芽接，移栽入容器培育成芽接全苗，具有育苗時(shí)間短，植株根系完整，成活率高，土地利用率高，芽接勞動(dòng)強(qiáng)度低，便于運(yùn)輸和定植等諸多技術(shù)優(yōu)勢(shì)[2]。目前國(guó)內(nèi)科研人員已對(duì)籽苗芽接苗生長(zhǎng)相關(guān)的礦質(zhì)元素[4]、培養(yǎng)基質(zhì)[5]、砧木處理[6]、低溫[7]、非生產(chǎn)期[8]等多種因素對(duì)籽苗芽接苗的萌發(fā)和生長(zhǎng)均進(jìn)行了初步研究。在橡膠樹(shù)幼苗培育中，植物激素對(duì)促進(jìn)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗萌動(dòng)也有所應(yīng)用[9]。但目前利用激素、新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑以葉面肥形式噴施對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗的萌發(fā)及生長(zhǎng)情況的反應(yīng)鮮有報(bào)道。本研究為研發(fā)新型籽苗芽接苗生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，采用了生長(zhǎng)素、赤霉素等多種植物調(diào)節(jié)劑處理，研究其對(duì)籽苗芽接苗的萌發(fā)和生長(zhǎng)調(diào)控機(jī)制，以期為培育優(yōu)良的籽苗芽接苗提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)材料選取中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院橡膠研究所三隊(duì)已接芽成活、但尚未萌動(dòng)的橡膠樹(shù)熱研7-33-97籽苗芽接苗1 500株，分5個(gè)處理，每處理3組，每組100株?；|(zhì)采用土壤∶牛糞∶椰糠∶甘蔗渣2∶1∶1∶1的比例混勻。不同濃度植物調(diào)節(jié)劑促進(jìn)接穗生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)選取已處于第一蓬葉穩(wěn)定期的接穗籽苗芽接苗270株。芽接苗分為9個(gè)處理，每處理3組，每組10株。實(shí)驗(yàn)試劑6-BA（6-芐基腺嘌呤）、GA3（赤霉素）、NAA（萘乙酸）、ZT（玉米素）和DA-6（胺鮮酯），均購(gòu)自Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 萌發(fā)率測(cè)定

籽苗芽接苗分5個(gè)處理，每處理3組，每組100株，每株分別移栽至單獨(dú)的育苗容器中。激素處理為6-BA濃度為400 μmol/L、GA3濃度200 μmol/L、NAA濃度為500 μmol/L和ZT 20μmol/L，以清水為對(duì)照。分別采用4種激素和清水對(duì)籽苗芽接苗進(jìn)行葉面噴灑，10 d后觀察記錄接穗萌發(fā)情況，15 d觀察萌發(fā)株數(shù)，20 d后加測(cè)接穗抽穗整齊度并計(jì)算最終出芽率。

1.2.2 不同藥劑濃度對(duì)接穗形態(tài)指標(biāo)的影響

將ZT母液分別稀釋至濃度為0、10、20、40和80 μmol/L 5個(gè)梯度；DA-6稀釋至濃度為0、50、100、200和400 μmol/L 5個(gè)濃度梯度。將ZT、DA-6不同濃度的稀釋液對(duì)籽苗芽接苗進(jìn)行葉面噴灑。每14 d對(duì)橡膠苗株高和莖圍進(jìn)行測(cè)定。最后測(cè)定不同處理56 d后籽苗芽接苗的葉綠素和光合參數(shù)含量。

1.2.3 光合活性測(cè)定

光合參數(shù)的測(cè)定使用光合儀LI-6400進(jìn)行測(cè)定，在固定光強(qiáng)1 000 μmol/（m2·s）條件下測(cè)定接穗的光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度及胞間二氧化碳濃度，利用SPAD測(cè)定穩(wěn)定葉片的葉綠素含量。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析和作圖

實(shí)驗(yàn)測(cè)定均為3次重復(fù)。采用IBM-SPSS 21.0單因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并采用OriginPro 9.1軟件進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種激素處理對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗接穗萌發(fā)的作用

4種激素處理第一個(gè)芽接苗接穗萌發(fā)時(shí)間和15 d后萌發(fā)株數(shù)的影響見(jiàn)圖1。由圖1可以看出，6-BA、GA3處理橡膠樹(shù)芽接苗抽芽時(shí)間比NAA、ZT和清水對(duì)照明顯縮短，第一株抽芽時(shí)間在4 d以下。說(shuō)明400 μmol/L 6-BA、200 μmol/L GA3有利于促進(jìn)籽苗芽接苗抽芽。500 μmol/L NAA處理籽苗芽接苗第一個(gè)抽芽所需時(shí)間最長(zhǎng)，顯著長(zhǎng)于對(duì)照。20 μmol/L ZT對(duì)抽芽沒(méi)有影響。在噴施藥劑15 d后，橡膠樹(shù)芽接苗接穗不斷萌發(fā)，其中6-BA和GA3 2組萌發(fā)率顯著高于NAA、ZT和清水對(duì)照。GA3萌發(fā)株數(shù)是對(duì)照2.4倍，說(shuō)明在本試驗(yàn)濃度下，GA3對(duì)接穗萌發(fā)具有顯著的促進(jìn)作用。NAA萌發(fā)株數(shù)為對(duì)照的0.43倍，說(shuō)明NAA對(duì)接穗萌發(fā)起到明顯抑制作用。

2.2 25 d后芽接苗接穗萌發(fā)及生長(zhǎng)情況

4種激素處理芽接苗接穗萌發(fā)株數(shù)、長(zhǎng)度和總萌發(fā)率的影響見(jiàn)圖2。由圖2可知，噴施藥劑25 d后6-BA和GA3 2組接穗萌發(fā)數(shù)均大于NAA、ZT和清水對(duì)照。6-BA、GA3、NAA、ZT和清水對(duì)照接穗長(zhǎng)度在10 cm以上占總萌發(fā)比率分別為37.1%、48%、25.9%、27.7%和30.6%，表明6-BA和GA3抽穗整齊度高于NAA、ZT和清水對(duì)照，且GA3萌發(fā)整齊度最高，說(shuō)明GA3對(duì)橡膠樹(shù)芽接苗接穗萌發(fā)生長(zhǎng)的促進(jìn)作用最強(qiáng)，顯著高于其它激素處理。

2.3 2種激素對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗接穗生長(zhǎng)的影響

表1和表2分別是5種濃度玉米素和DA-6處理籽苗芽接苗0～56 d株高和莖圍增長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn)。由表1、2可以看出，2種激素不同濃度對(duì)接穗株高和莖圍增長(zhǎng)的促進(jìn)作用存在顯著差異。10、20、40和80 μmol/L玉米素56 h后株高增長(zhǎng)量分別為4.95、4.18、4.72和4.35 cm，顯著高于對(duì)照0 μmol/L的3.43c m。10、20、40和80 μmol/L玉米素莖圍增長(zhǎng)量分別為2.41、2.44、2.42和2.43 mm，顯著高于對(duì)照0 μmol/L的2.13 mm。50、100、200和400 μmol/L DA-6處理56 h后株高增長(zhǎng)量分別為4.07、3.26、2.70和1.67cm。50、100、200和400 μmol/L DA-6莖圍增長(zhǎng)量分別為2.17、2.05、1.95和2.01 mm，與對(duì)照差異不顯著。其中，玉米素所有濃度噴施的接穗增長(zhǎng)量均顯著大于對(duì)照，而DA-6濃度中，只有50 μmol/L DA-6處理后接穗增長(zhǎng)量大于對(duì)照，高濃度DA-6處理則呈現(xiàn)抑制作用。

2.4 2種激素對(duì)接穗葉片光合效率和葉綠素含量的影響

不同玉米素濃度對(duì)接穗光合效率和葉綠素含量的影響見(jiàn)圖3。從圖3可以看出，不同濃度的2種激素對(duì)接穗葉片光合效率和葉綠素影響差異顯著。10、20和40 μmol/L玉米素對(duì)接穗的光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度和葉綠素含量均有顯著的促進(jìn)作用。但80 μmol/L玉米素處理的葉片的蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度和葉綠素含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。說(shuō)明玉米素促進(jìn)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗接穗生長(zhǎng)與提高光合效率和葉綠素含量有關(guān)。

不同DA-6濃度對(duì)接穗光合效率和葉綠素含量的影響見(jiàn)圖4。從圖4可以看出，僅50 μmol/L DA-6對(duì)接穗的光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度和葉綠素含量有顯著的促進(jìn)作用。但100、200和400 μmol/L DA-6處理的葉片的蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度和葉綠素含量呈現(xiàn)波動(dòng)或者下降趨勢(shì)。

3 討論與結(jié)論

植物激素作為重要的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)植物萌發(fā)和生長(zhǎng)調(diào)控具有重要作用[10]，在枸杞[11]、羊草[12]、擬南芥[13]和云南松[14]等多種植物中均有報(bào)道。6-BA具有促進(jìn)ATP合成[15]、延緩衰老[16]、促進(jìn)離體器官發(fā)生[17]和菌絲體生長(zhǎng)[18]等多種生理學(xué)作用。GA3具有解除休眠[19]、促進(jìn)萌發(fā)[20]、促進(jìn)木質(zhì)化[21]和增加纖維長(zhǎng)度[22]等生理學(xué)作用。本研究證明，6-BA與GA3可促進(jìn)籽苗芽接苗接穗的萌發(fā)和提高接穗萌發(fā)的整齊度。其中，GA3噴施15 d后接穗萌發(fā)數(shù)量高出對(duì)照組114.3%，25 d后高出對(duì)照組44.6%，GA3處理后接穗整齊度最高，說(shuō)明GA3對(duì)籽苗芽接苗接穗萌發(fā)和接穗整齊度有明顯的促進(jìn)作用。6-BA在噴施15 和25 d后從萌發(fā)率分別比對(duì)照組高出50%和27.8%，說(shuō)明6-BA對(duì)接穗萌發(fā)也有一定的促進(jìn)作用，但不及GA3作用顯著。

NAA具有調(diào)控生長(zhǎng)發(fā)育和花期[23]、促進(jìn)生根[24]、提高葉綠素含量[25]和誘導(dǎo)愈傷組織[26]等生理學(xué)功能。ZT具有促進(jìn)光合產(chǎn)物合成與分配[27-28]、影響結(jié)實(shí)率[29]和育性[30]等生理學(xué)作用。本研究發(fā)現(xiàn)，NAA對(duì)接穗萌發(fā)起到明顯抑制作用，而ZT對(duì)接穗萌發(fā)的作用與對(duì)照無(wú)差異。雖然本試驗(yàn)初步篩選出促進(jìn)接穗萌發(fā)的藥劑，但試驗(yàn)并沒(méi)有對(duì)濃度進(jìn)行篩選。至于NAA和ZT對(duì)抽穗萌發(fā)促進(jìn)作用不明顯，可能是藥劑濃度過(guò)高對(duì)植物體本身帶來(lái)了傷害。

DA-6是一種新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有提高光合速率和促進(jìn)生長(zhǎng)[31-32]、提高抗寒性[33]和促進(jìn)葉綠素合成[34]等多種生理學(xué)功能。本研究發(fā)現(xiàn)，ZT 4種濃度對(duì)接穗株高和莖圍增長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，并與光合效率和葉綠素含量的提高呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系。研究還發(fā)現(xiàn)，ZT的促進(jìn)作用存在劑量效應(yīng)，10～40 μmol/L促進(jìn)效果明顯，而濃度過(guò)高反而呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。同樣，DA-6在低濃度時(shí)促進(jìn)效果明顯，高濃度時(shí)則對(duì)株高和莖圍的增長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用。因此，在研發(fā)新型籽苗芽接苗促進(jìn)劑時(shí)應(yīng)探索低濃度梯度的激素處理模式。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示：400 μmol/L 6-BA和200 μmol/L GA3對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗的萌發(fā)促進(jìn)作用最好，10～40 μmol/L ZT對(duì)橡膠樹(shù)籽苗芽接苗的生長(zhǎng)促進(jìn)最好。本研究結(jié)果可為研發(fā)新型籽苗芽接苗生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑打下良好的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。

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