戴盡波 徐振林 劉鳳銀 楊金易 孫遠(yuǎn)明 王弘 雷紅濤 沈玉棟
摘 要 建立了呋喃它酮代謝物5嗎啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮(AMOZ)間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析(icCLEIA)檢測(cè)方法,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了包被原濃度、抗體稀釋倍數(shù)、反應(yīng)緩沖體系及濃度、競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)時(shí)間等參數(shù),結(jié)果表明icCLEIA最佳反應(yīng)條件為:包被抗原濃度為10 ng/mL,抗體稀釋60000倍,最佳競(jìng)爭(zhēng)時(shí)間為50 min,體系緩沖液0.01 mol/L PBS(pH 7.4)。在優(yōu)化的條件下,本方法的線性檢測(cè)范圍為0.026~3.52 μg/L, IC50為0.29 μg/L,檢出限(LOD,IC10)為0.012 μg/L。對(duì)魚(yú)肉樣品的平均添加回收率在101.4%~115.5 %之間。建立的icCLEIA方法可用于實(shí)際樣品中AMOZ殘留檢測(cè)。
關(guān)鍵詞 呋喃它酮; 5嗎啉甲基3氨基2GFDA1唑烷基酮; 間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析; 多克隆抗體; 魚(yú)肉endprint