溫鵬濤，丁元欣

(佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002)

IGF-1蛋白聯(lián)合彩色多普勒影像對(duì)涎腺腫瘤的臨床評(píng)估①

溫鵬濤，丁元欣

(佳木斯大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002)

目的:研究涎腺腫瘤的彩色多普勒超聲影像表現(xiàn)、以及病理分級(jí)、分型與IGF-1蛋白表達(dá)的相關(guān)性，探討IGF-1蛋白聯(lián)合彩色多普勒影像對(duì)涎腺腫瘤的評(píng)估價(jià)值。方法: 選取125例經(jīng)病理證實(shí)的涎腺腫瘤患者的術(shù)前超聲檢查圖像及病理組織，并運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)S-P法對(duì)活檢切除的標(biāo)本進(jìn)行IGF-1蛋白的檢測(cè)。分析涎腺腫瘤的某些彩色多普勒特征性圖與IGF-1蛋白表達(dá)之間的關(guān)系。結(jié)果：①IGF-1蛋白在涎腺惡性腫瘤中都有較高的陽(yáng)性表達(dá)率，為71.4%； IGF-1蛋白在良性涎腺腫瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率為16.4%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；②在臨床分期中：Ⅰ～Ⅱ期涎腺惡性腫瘤IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)66.7%；Ⅲ～Ⅳ期惡性腫瘤IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)80%；臨床的Ⅰ～Ⅱ期與Ⅲ～Ⅳ期比較IGF-1蛋白表達(dá)有顯著性差異(P<0.05)。③ 在涎腺惡性腫瘤的彩色多普勒血流各級(jí)別IGF-1蛋白表達(dá)有明顯差異(P<0.05)，顯示隨著腫瘤內(nèi)血流分布的增多，IGF-1蛋白在涎腺腫瘤的表達(dá)也隨之增高。④從影像上特征性表現(xiàn)的評(píng)分來(lái)看，分值越低，IGF-1蛋白表達(dá)越低；分值越高，IGF-1蛋白表達(dá)越高。結(jié)論：IGF-1蛋白在涎腺惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用，其陽(yáng)性表達(dá)與涎腺惡性腫瘤的惡性度有一定的相關(guān)性呈正相關(guān)，并且涎腺瘤彩色多普勒超聲特征性表現(xiàn)與IGF-1蛋白表達(dá)有一定的相關(guān)性呈正相關(guān)。

彩色多普勒超聲；涎腺腫瘤；病理、免疫組織化學(xué)；IGF-1蛋白

IGF-1是胰島素樣生長(zhǎng)因子系統(tǒng)(IGFs)的一種多肽，其與涎腺腫瘤有著密切相關(guān)的聯(lián)系，并且主要存在于成人。它是一種具有促進(jìn)組織細(xì)胞分裂、物質(zhì)代謝、可以降低血糖等多種功能的細(xì)胞增殖調(diào)控因子，IGF1與胰島素結(jié)構(gòu)45% 相似。它是在正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中都具有較強(qiáng)的有絲分裂效應(yīng)的一種多肽類生長(zhǎng)因子，它除了刺激細(xì)胞增殖外，還抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)[1]。到目前為止，國(guó)內(nèi)尚無(wú)關(guān)于IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中如何表達(dá)的相關(guān)性研究報(bào)道。本研究是探討IGF-1蛋白表達(dá)與涎腺腫瘤的密切相關(guān)性，并將IGF-1蛋白的表達(dá)情況與彩色多普勒超聲影像學(xué)相結(jié)合，找出它們之間的相關(guān)性。將臨床彩色多普勒超聲醫(yī)學(xué)與生物分子學(xué)相結(jié)合共同研究，在國(guó)內(nèi)才剛剛起步，目前也只見(jiàn)有關(guān)于乳腺方面的報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010-01～2012-10在佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院進(jìn)行治療前彩色多普勒檢查，所有患者未做放化療，沒(méi)有進(jìn)行手術(shù)切除及病理證實(shí)的125例涎腺腫瘤患者，其中男58例，女67例，年齡16～72歲，平均49歲。經(jīng)病理診斷其中良性腫瘤97例包括腮腺混合瘤(也稱多形性腺瘤)61例，腺淋巴瘤22例，淋巴結(jié)核10例，炎性改變4例。惡性腫瘤28例，包括惡性多形性腺瘤8例，腺樣囊性癌10例，黏液表皮樣癌6例，腺鱗癌4 例。

1.2 主要試劑與設(shè)備

兔抗人IGF- 1多克隆抗體、ELIVISON試劑盒、PBS、DAB顯色液 彩色多普勒超聲儀(飛利蒲影像之星、西門(mén)子—S2000彩超聲儀)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 彩色多普勒影像檢查方法

患者仰臥位或側(cè)臥位，使頸后部墊高，頭轉(zhuǎn)向健側(cè)，使檢查區(qū)充分暴露。所有被檢查者均要患側(cè)與健側(cè)做對(duì)比檢查。使用高頻探頭掃查，應(yīng)對(duì)病變部位作縱橫切面的十字交叉位掃查。作縱切和橫切掃查、同時(shí)也要檢查頸部淋巴結(jié)情況。超聲主要觀察：(1)腫瘤的位置，并鑒別是腺體內(nèi)還是腺體外；(2)腫瘤的數(shù)量、形態(tài)、大小、邊界、內(nèi)部回聲是實(shí)性、囊性或是混合性，初步鑒別良惡性；(3)腫瘤周邊及內(nèi)部血流情況，有助于良惡性的鑒別；(4)腫瘤是否是呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)；(5)周邊淋巴結(jié)的情況。

1.4 結(jié)果判斷

采用SP法來(lái)檢測(cè)IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中的表達(dá)。每一批染色均設(shè)陰性和陽(yáng)性進(jìn)行對(duì)照。IGF-1的陽(yáng)性染色為胞質(zhì)和(或)胞核著色，呈現(xiàn)為棕黃色或黃褐色均勻性顆粒狀。光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選5個(gè)視野，每個(gè)視野記數(shù)為100個(gè)細(xì)胞，陽(yáng)性比例的計(jì)算方法為：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比，然后取平均值[1]。根據(jù)計(jì)分的方法：陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)為0的為0分；陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)為<10%的為1分；陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)為 10%～50%的為2 分；陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)為51%～80%的為3分；陽(yáng)性細(xì)胞比例數(shù)為>80%為4 分[2]。根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度進(jìn)行計(jì)分，細(xì)胞無(wú)顯色的為0分；淺黃色的為l分；棕黃色的2為分；黃褐色的為3分。兩項(xiàng)相加得數(shù)0～1分為陰性，2～3分為+，4～5分為，6分以上為。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，Spearman等級(jí)相關(guān)分析IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中表達(dá)以及腫瘤在彩色多普勒特征性表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在涎腺腫瘤中IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)

在97例良性涎腺腫瘤組中IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)為16 例(16.4%)明顯低于惡性涎腺腫瘤組中IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)20例(71.4%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 IGF-1蛋白在涎腺良、惡性腫瘤中的表達(dá)

*與良性腫瘤組比較：P<0.05。

2.2 涎腺惡性腫瘤的病理分級(jí)與IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)關(guān)系

IGF-1蛋白在不同病理類型的良性涎腺腫瘤中的陽(yáng)性表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)；IGF-1蛋白在不同病理類型的惡性涎腺腫瘤中的陽(yáng)性表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)；8例有發(fā)生轉(zhuǎn)移的涎腺惡性腫瘤病例中，IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)7例(87.5%)；在20例無(wú)發(fā)生轉(zhuǎn)移的涎腺惡性腫瘤病例中，IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)13(65%)。在涎腺惡性腫瘤中，有、無(wú)轉(zhuǎn)移發(fā)生與IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。在臨床分期中，18例Ⅰ～Ⅱ期的涎腺惡性腫瘤中IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)12例(66.7%)；10例Ⅲ～Ⅳ期涎腺惡性腫瘤中IGF-1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)8例(80%)；在臨床的Ⅰ～Ⅱ期與Ⅲ～Ⅳ分期中，涎腺惡性腫瘤中的IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)有顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中的表達(dá)與臨床病理的關(guān)系

2.3 彩色多普勒血供分級(jí)與IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中表達(dá)的關(guān)系

在良惡性涎腺腫瘤對(duì)比中，IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)在彩色多普勒血供分級(jí)中存在顯著性差異(P<0.05)：良性組0級(jí)12.5%(1/8)，Ⅰ級(jí)14.1%(10/71)，Ⅱ級(jí)21.4%(3/14)，Ⅲ級(jí)2%(2/4)；惡性組0級(jí)50%(1/2)，Ⅰ級(jí)50%(3/6)，Ⅱ級(jí)72.3%(8/11)，Ⅲ級(jí)88.9%(8/9)。見(jiàn)表3。

表3 彩色多普勒血供分級(jí)與IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中表達(dá)的關(guān)系

2.4 涎腺惡性腫瘤彩色多普勒超聲特征性表現(xiàn)與IGF-1蛋白表達(dá)的關(guān)系

影像上特征性表現(xiàn)的評(píng)分分值越低，IGF-1蛋白表達(dá)越低；分值越高，IGF-1蛋白表達(dá)越高(rs=0.8216,P<0.01)。見(jiàn)表4。

涎腺惡性腫瘤彩色多普勒超聲特征性表現(xiàn)與IGF-1蛋白表達(dá)的關(guān)系惡性腫瘤超聲的基本特征性表現(xiàn)：邊緣及輪廓是否清晰、是否有周浸潤(rùn)、內(nèi)部回聲是否均勻、內(nèi)部是否有微鈣化、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，具有以上一種表現(xiàn)為1分，以此類推。

表4 涎腺惡性腫瘤超聲特征性表現(xiàn)與IGF-1蛋白表達(dá)的關(guān)系

rs=0.8216,P<0.01。

3 討論

根據(jù)惡性腫瘤在超聲上特征性表現(xiàn)(邊緣及輪廓是否清晰、是否有周浸潤(rùn)、內(nèi)部回聲是否均勻、內(nèi)部是否有微鈣化、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，具有以上一種表現(xiàn)為1分，以此類推)給予評(píng)分，并與IGF-1蛋白的表達(dá)進(jìn)行比較。本組資料結(jié)果顯示，多普勒超聲影像學(xué)上的分值越低，IGF-1蛋白陽(yáng)性強(qiáng)度越弱；多普勒超聲影像學(xué)上的分值越高，IGF-1蛋白陽(yáng)性強(qiáng)度越高；換而言之，IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)越強(qiáng)，腫瘤在超聲上的影像越具有特征性，越容易判斷腫瘤的良惡性；反之，IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)越弱，腫瘤在超聲影像上的表現(xiàn)就越接近于良性腫瘤的表現(xiàn)。通過(guò)數(shù)據(jù)表明，在涎腺良性腫瘤的彩色多普勒血供分級(jí)中IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)與在涎腺惡性腫瘤的彩色多普勒血供分級(jí)中IGF-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)有明顯差異(P<0.05)，顯然隨著腫瘤內(nèi)血供級(jí)別的增加[2]，IGF-1蛋白在涎腺腫瘤中表達(dá)陽(yáng)數(shù)也隨之增高。這可能與IGF-1蛋白能促進(jìn)血管生成的機(jī)制有關(guān)：IGF-Ⅰ能刺激人類癌細(xì)胞株產(chǎn)生VEGF， 促進(jìn)腫瘤血管的生成，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有重要的作用。 因此，IGF-1蛋白的過(guò)度表達(dá)促使新生血管生成啟動(dòng)，腫瘤的血流相應(yīng)豐富，用彩色多普勒檢測(cè)到的血流信號(hào)明顯增多。

把影像學(xué)與生物分子學(xué)有效地結(jié)合起來(lái)研究，找出它們之間的相關(guān)性，從而在治療前，通過(guò)影像學(xué)信息就能有效地推斷出腫瘤的良惡性、及惡性程度，相信無(wú)論對(duì)臨床醫(yī)生還是臨床患者都有很大的幫助。涎腺腫瘤彩色多普勒超聲特征性表現(xiàn)與IGF-1蛋白表達(dá)有一定的相關(guān)性，根據(jù)超聲影像上的特征性表現(xiàn)及腫瘤中IGF-1蛋白表達(dá)的情況，為判斷涎腺腫瘤的良惡性，及惡性程度提供科學(xué)依據(jù)。

[1]鄧艷，陳莉，張美云.IGF-1在卵巢漿液性腫瘤中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)婦幼保健，2008，58:96

[2]溫鵬濤，吳紹宇，李榮雪，等．涎腺腫瘤中的p-AKT蛋白表達(dá)與彩色多普勒影像的相關(guān)性研究[J]．黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2014，37(1)：50

黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目，編號(hào)：12531691。

溫鵬濤(1975～)女，黑龍江佳木斯人，碩士研究生，副主任醫(yī)師。

R445.1；R

B

1008-0104(2015)02-0015-02

2014-11-16)