張 華， 李照偉， 李 濤， 王 慧， 尹 鑫， 王偉丞

(貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng)550008)

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貴州省豬瘟血清學(xué)調(diào)查研究

張 華， 李照偉， 李 濤， 王 慧， 尹 鑫， 王偉丞

(貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng)550008)

為了解2012—2014年貴州省豬瘟免疫防控情況，采用間接ELISA檢測(cè)方法，對(duì)隨機(jī)采集我省9個(gè)市(州)11 390個(gè)場(chǎng)點(diǎn)113 342份經(jīng)過(guò)豬瘟疫苗免疫后的豬血清樣品，進(jìn)行豬瘟免疫抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，豬瘟免疫抗體平均合格率為80.92%； 2012—2014年豬瘟免疫抗體合格率分別為78.79%、 82.48%、 82.37%，連續(xù)3年均達(dá)到國(guó)家免疫合格標(biāo)準(zhǔn)70%以上，呈現(xiàn)穩(wěn)定的上升趨勢(shì)，且2013、 2014年樣品免疫抗體合格率顯著高于2012年；按照不同季度、不同場(chǎng)點(diǎn)、不同地區(qū)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，檢測(cè)樣品豬瘟免疫抗體合格率也均達(dá)到70%以上。研究結(jié)果表明，貴州省近3年豬瘟免疫防控工作較為理想。

豬瘟；間接ELISA；血清學(xué)調(diào)查；貴州省

豬瘟(Clssical swine fever, CSF)是由黃病毒科，瘟病毒屬的豬瘟病毒(Clssical swine fever virus, CSFV)引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病[1]。該病在世界各國(guó)廣泛流行，是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害嚴(yán)重的重要傳染病之一，造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2，3]。OIE將豬瘟列為必須通報(bào)的動(dòng)物疫病，在我國(guó)也被列為一類動(dòng)物疫病[4]。豬是該病唯一的自然宿主[1]?，F(xiàn)今集約化、規(guī)?；i飼養(yǎng)程度越來(lái)越高，大量引種、頻繁流通導(dǎo)致帶毒豬的存在和與其他豬病毒病混合感染的情況越來(lái)越嚴(yán)重，給豬瘟的免疫防控造成一些困難[5，6]。本調(diào)查旨在對(duì)2012—2014年連續(xù)3年采集豬瘟疫苗免疫后的豬血清樣品進(jìn)行豬瘟免疫抗體檢測(cè)，通過(guò)不同年份、不同季度、不同場(chǎng)點(diǎn)以及不同地區(qū)樣品免疫抗體合格率的統(tǒng)計(jì)和比較，分析得出貴州省近3年豬瘟免疫預(yù)防的整體情況，從而系統(tǒng)全面地研判我省豬瘟的免疫防控工作是否有效，相應(yīng)的免疫程序、技術(shù)措施是否合理，為今后更有針對(duì)性地防控豬瘟，以及對(duì)豬瘟免疫水平和免疫效果的評(píng)估提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品：2012—2014年間于豬瘟疫苗免疫后隨機(jī)采集豬血并及時(shí)分離血清，-20 ℃保存?zhèn)溆?。采集?chǎng)點(diǎn)覆蓋全省9個(gè)市(州)，包括貴陽(yáng)市、六盤水市、遵義市、安順市、銅仁市、畢節(jié)市、黔西南州、黔東南州和黔南州。

1.1.2 檢測(cè)試劑盒：豬瘟病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自武漢科前動(dòng)物生物制品有限公司。

1.1.3 儀器設(shè)備：微量移液器、震蕩器、溫箱、酶標(biāo)儀。

1.2 方法

1.2.1 血清樣品檢測(cè)方法：應(yīng)用間接ELISA檢測(cè)法，嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒內(nèi)的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。通過(guò)配制洗滌液，稀釋樣品及陰陽(yáng)性對(duì)照，設(shè)置陰性對(duì)照孔、陽(yáng)性對(duì)照孔和待檢樣品孔，加樣，溫育，洗板，加酶標(biāo)二抗，溫育，洗板，加酶結(jié)合底物，顯色，終止等操作，測(cè)定各孔的D630 nm值。

1.2.2 結(jié)果判定：在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔D630 nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔平均D630 nm值≥0.6，陰性對(duì)照孔平均D630 nm值<0.3。樣品D630 nm值≥0.35，判為陽(yáng)性；樣品D630 nm值<0.35，判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 豬瘟免疫抗體總體檢測(cè)結(jié)果 2012—2014年于貴州省9個(gè)市(州)11 390個(gè)場(chǎng)點(diǎn)隨機(jī)采集113 342份豬血清樣品，進(jìn)行豬瘟免疫抗體檢測(cè)。通過(guò)間接ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)出陽(yáng)性血清91 719份，免疫合格率為80.92%(91 719/113 342)。見(jiàn)表1。

2.2 不同年份豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 由表1、圖1可看出，隨機(jī)檢測(cè)的113 342份豬血清樣品中，2012年檢測(cè)了46 582份，抗體合格率為78.79%(36 700/46 582)； 2013年檢測(cè)了28 136份，抗體合格率為82.48%(23 206/28 136)； 2012年檢測(cè)了38 624份，抗體合格率為82.37%(31 813/38 624)， 2013年和2014年的免疫抗體合格率均高于2012年。

通過(guò)卡方檢驗(yàn)[7]，2013年的抗體合格率與2012年相比，以及2014年的抗體合格率與2012年相比，差異都是極顯著的。

表1 2012—2014年豬瘟樣品檢測(cè)情況

圖1 2012—2014年豬瘟樣品免疫合格率比較

2.3 不同季度豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 由表2、圖2可以看出，連續(xù)3年不同季度血清樣品的豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到了80%以上，其中第一季度的抗體合格率最高。

表2 2012—2014年不同季度豬瘟免疫抗體合格率 %

圖2 不同季度樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

2012年4個(gè)季度的豬瘟免疫抗體合格率呈現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)，在第3、4季度下降到了80%以下； 2013年4個(gè)季度的豬瘟免疫抗體合格率則較平穩(wěn)，都保持在80%以上；而2014年4個(gè)季度的豬瘟免疫抗體合格率呈現(xiàn)先降后升的趨勢(shì)，總體也都保持在80%以上。

2.4 不同場(chǎng)點(diǎn)豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 由表3、圖3可看出，連續(xù)3年不同場(chǎng)點(diǎn)血清樣品豬瘟免疫抗體的合格率水平存在一定的差異，其抗體合格率由大到小依次為種豬場(chǎng)>商品代飼養(yǎng)場(chǎng)>散養(yǎng)戶>其他>交易市場(chǎng)，5個(gè)場(chǎng)點(diǎn)均達(dá)到70%以上免疫抗體水平，其中種豬場(chǎng)和商品代飼養(yǎng)場(chǎng)樣品的抗體合格率都達(dá)到了80%以上；連續(xù)3年中散養(yǎng)戶樣品的抗體合格率是逐年升高的。

圖3 不同場(chǎng)點(diǎn)樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

表3 2012—2014年不同場(chǎng)點(diǎn)豬瘟免疫抗體合格率 %

2.5 不同地區(qū)豬瘟免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 由表4、圖4可以看出，連續(xù)3年9個(gè)市(州)的血清樣品豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到了70%以上，其中7個(gè)市(州)的抗體合格率達(dá)到了80%以上；連續(xù)3年中六盤水市、銅仁市和畢節(jié)市的免疫抗體合格率都是逐年上升的。

表4 2012—2014年不同地區(qū)豬瘟免疫抗體合格率 %

圖4 不同地區(qū)樣品豬瘟免疫抗體合格率比較

3 討論

3.1 研究表明，2012—2014年于貴州省9個(gè)市(州)11 390個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集的113 342份豬血清樣品中，共檢出豬瘟免疫抗體陽(yáng)性血清91 719份，免疫合格率為80.92%(91 719/113 342)。不同年份樣品的免疫合格率分別為78.79%、82.48%、82.37%，呈現(xiàn)上升且趨于穩(wěn)定的趨勢(shì)，2013年和2014年免疫合格率(80%以上)較2012年顯著上升，達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫抗體合格率 70%以上要求，這表明貴州省對(duì)于豬瘟的免疫預(yù)防是合理有效的，且免疫效果是顯著的。

3.2 對(duì)于不同季度樣品的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到80%以上，其中以第一季度的抗體合格率最高。在豬瘟高發(fā)的春秋季節(jié)，免疫抗體合格率都能保持在80%以上，這證明相應(yīng)的豬瘟免疫程序和方法是行之有效的。

3.3 對(duì)于不同場(chǎng)點(diǎn)樣品的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到70%以上，抗體合格率依次為種豬場(chǎng)>商品代飼養(yǎng)場(chǎng)>散養(yǎng)戶>其他>交易市場(chǎng)，其中種豬場(chǎng)和商品代飼養(yǎng)場(chǎng)的抗體合格率達(dá)到了80%以上，這與其規(guī)范化的飼養(yǎng)管理、科學(xué)的免疫預(yù)防、系統(tǒng)的免疫監(jiān)測(cè)是密不可分的。與此同時(shí)，連續(xù)3年散養(yǎng)戶的樣品免疫抗體合格率逐年升高，這說(shuō)明散養(yǎng)戶對(duì)于豬瘟免疫工作的重視程度在不斷增高，對(duì)于豬瘟免疫預(yù)防的意識(shí)在不斷加強(qiáng)。

3.4 對(duì)于不同地區(qū)樣品的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，豬瘟免疫抗體合格率均達(dá)到70%以上，其中7個(gè)市(州)的抗體合格率達(dá)到80%以上，且連續(xù)3年六盤水市、銅仁市和畢節(jié)市的免疫抗體合格率都在逐年上升，這說(shuō)明豬瘟免疫防控成效在我省是較普遍的。

3.5 目前，我國(guó)對(duì)豬瘟實(shí)施了強(qiáng)制免疫計(jì)劃[8]，由上述調(diào)查結(jié)果分析可知我省近幾年實(shí)施的豬瘟強(qiáng)制免疫措施是積極有效的，為進(jìn)一步穩(wěn)定和提高豬瘟免疫抗體水平，應(yīng)該在合理的免疫程序指導(dǎo)下，加強(qiáng)免疫抗體的監(jiān)測(cè)[9,10]，以此規(guī)劃免疫時(shí)間，并結(jié)合豬瘟病原學(xué)的檢測(cè)，雙重評(píng)價(jià)疫苗免疫效果。此外，還應(yīng)注重豬瘟的綜合防控，加強(qiáng)種豬群凈化[11,12]，設(shè)置合理的飼養(yǎng)環(huán)境、飼養(yǎng)密度，定期清洗消毒，帶毒豬及時(shí)淘汰并無(wú)害化處理，向飼養(yǎng)管理人員普及相關(guān)知識(shí)等，尤其是散養(yǎng)戶應(yīng)多借鑒規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)、管理和免疫預(yù)防接種經(jīng)驗(yàn)等[13]。這些都將為豬瘟從全面免疫、盲目免疫到重點(diǎn)免疫、針對(duì)性免疫打下基礎(chǔ)，對(duì)于預(yù)防控制該病具有重要意義。

[1] Moennig V, Floegel-Niesmann G, Greiser-Wilke I. Clinical signs and epidemiology of classical swine fever: a review of new knowledge[J]. The Veterinary Journal, 2003, 165(1): 11～20.

[2] 趙德明，張中秋，等譯.豬病學(xué)[M].第8版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2000.157～173.

[3] 童發(fā)斌. 影響豬瘟防治效果的原因及對(duì)策[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009，(18): 311～315.

[4] 殷震.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第2版.北京：科學(xué)出版社，1997.633～641.

[5] 黃寶學(xué)，蒙振畝，韋顯凱.2010～2013年田東縣豬瘟免疫效果調(diào)查分析[J].大眾科技，2015，(5): 110～112.

[6] 王永斌, 向傳述.非典型豬瘟的綜合防控[J].畜禽業(yè), 2015，(7): 6～7.

[7] 陳繼明, 黃保續(xù).重大動(dòng)物疫病流行病學(xué)調(diào)查指南[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社,2009，221～227.

[8] 呂惠序. 豬瘟免疫的關(guān)鍵點(diǎn)控制[J].今日畜牧獸醫(yī)，2009，(12):14～16.

[9] 馬宗兵, 高麗娜, 趙海山,等.北京市部分規(guī)?；i場(chǎng)偽狂犬病和豬瘟的血清學(xué)調(diào)查[J].豬業(yè)科學(xué)，2010，(11): 84～86.

[10] 董骎, 高洪, 嚴(yán)玉霖，等.云南省楚雄部分地區(qū)豬場(chǎng)豬瘟血清學(xué)調(diào)查[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2015(1): 38～39.

[11] 王健青,尹建波,洪偉彬,等.東莞市2008—2012年豬瘟血清學(xué)調(diào)查與分析[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2013，(7):23～25.

[12] 李達(dá), 馬萍, 湯德元,等.規(guī)?；i場(chǎng)豬瘟和偽狂大病的凈化方案[J].畜牧與獸醫(yī)，2015，(7):119～123.

[13] 修金生, 吳順意, 周倫江,等.不同規(guī)模豬場(chǎng)種豬豬瘟抗體檢測(cè)與豬瘟凈化[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，25(2): 235～238.

Serological Survey of Classic Swine Fever in Guizhou Province

Zhang Hua, Li Zhaowei, Li Tao, Wang Hui, Yin Xing, Wang Weicheng

(Animal Disease Prevention and Control Center in Guizhou Province，Guiyang Guizhou 550008，China)

To investigate the immune and prevention situation of classic swine fever in Guizhou province from 2012 to 2014, a total of 113 342 swab samples were collected from 11 390 sites in our 9 city (state). We detected the antibody of classic swine fever by indirect ELISA method. Results showed that the qualified rate of antibody was 80.92%, and the qualified rate from 2012 to 2014 respectively was 78.79%, 82.48% and 82.37%. Three consecutive years reached the national immunization standard, which also assumed ascending and stable trend. According to different seasons, different sites and different regions for statistical analysis, the qualified rate of the samples of classic swine fever antibody also reached more than 70%. These results suggested that the work of immunization prevention and control was ideal in our province in recent 3 years.

Clssical Swine Fever； ELISA； Serological Survey； Guizhou Province

2015-08-27

貴州省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目：貴州省主要人畜共患病綜合防控技術(shù)研究(黔科合NY字[2011]3061號(hào))

張華(1969—)，男，高級(jí)獸醫(yī)師，貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心副主任。

S858.28

A

1007-1474(2015)06-0001-04