王素茹++林靖凌++湯建彪

摘 要 采用高效液相色譜法研究熱帶地區(qū)海南田間條件下唑螨酯和炔螨特在柑橘及土壤中的消解動(dòng)態(tài)和最終殘留。樣品經(jīng)乙腈提取、NH2固相萃取小柱凈化后，采用HPLC-UV檢測(cè)。結(jié)果表明：2009至2010年唑螨酯在柑橘與土壤中的半衰期分別為7.5、7.8 d與14.4、14.7 d，炔螨特在柑橘與土壤中的半衰期分別為7.6、8.4 d與13.1、15.1 d，這2種農(nóng)藥在柑橘與土壤中的消解規(guī)律相似。在收獲期時(shí)，未在柑橘中檢出唑螨酯和炔螨特的最終殘留，但在土壤中距末次施藥14、21 d時(shí)，有殘留檢出，范圍為0.08～0.43 mg/kg。

關(guān)鍵詞 唑螨酯 ；炔螨特 ；柑橘 ；殘留分析 ；消解動(dòng)態(tài)

分類(lèi)號(hào) X592

Residue and Dissipation Dynamics of Fenpyroximate and Propargite

in Citrus of Tropical Areas

WANG Suru LIN Jingling TANG Jianbiao

（Analysis and Testing Center， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences / Hainan Provincial

Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables， Haikou， Hainan 571101）

Abstract The residue and dissipation dynamics of fenpyroximate and propargite in citrus and soil from Hainan's field trials were analyzed by HPLC. The samples were extracted with acetonitrile， cleaned up by NH2 SPE column， determined by HPLC-UV. The results showed that the half-lives of fenpyroximate and propargite in citrus were 7.5 d， 7.8 d and 14.4 d， 14.7 d， and that in soil were 7.6 d， 8.4 d and 13.1 d， 15.1 d in 2009 and 2010. Dissipation dynamics of fenpyroximate and propargite in citrus and soil were similar. Final residues of fenpyroximate and propargite were not detected in citrus but were found to be in the range of 0.08～0.43 mg/kg in soil during the period of harvest.

Keywords dynamics ； fenpyroximate ； citrus ； residue ； dissipation dynamic

唑螨酯（fenpyroximate），化學(xué)名稱(chēng)為E-（-（1，3-二甲基-5-苯氧基吡唑-4-亞甲基氨基氧）對(duì)甲苯甲酸叔丁酯；炔螨特（propargite），化學(xué)名稱(chēng)為2-（4-特丁基苯氧基）環(huán)己基丙炔-2-基亞硫酸酯，二者均為殺螨劑[1-2]，對(duì)柑橘上的紅蜘蛛有較好地防效[3-5]。目前，有關(guān)唑螨酯和炔螨特的殘留分析已有報(bào)道，如吳俐勤等[6]報(bào)道了唑螨酯在柑桔和土壤中殘留的研究，樓正云等[7]報(bào)道了炔螨特在柑橘和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)，Kumar等[8]報(bào)道了炔螨特在蘋(píng)果、茶和土壤中殘留的消解行為，Halvorsen等[9]報(bào)道了超臨界流體萃取法結(jié)合液相色譜-紫外檢測(cè)技術(shù)測(cè)定唑螨酯在蘋(píng)果中的殘留，Zhang等[10]報(bào)道了離子液體微萃取-液相色譜法分析唑螨酯等殺螨劑在果汁中的殘留，徐敦明等[11]報(bào)道了加速溶劑萃取和氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定唑螨酯等在茶葉中的殘留。本研究采用乙腈提取，液相色譜法測(cè)定柑橘和土壤中唑螨酯和炔螨特的殘留量， 并研究二者在熱帶島嶼海南柑橘和土壤中的殘留消解動(dòng)態(tài)和最終殘留，旨在為唑螨酯和炔螨特在熱帶地區(qū)柑橘上的安全使用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試藥劑為13%唑螨酯-炔螨特乳油（其中有效成分唑螨酯占3%，炔螨特占10%）；試驗(yàn)品種為紅江橙。

主要儀器與試劑Waters液相色譜儀（2487紫外檢測(cè)器、1525二元梯度泵、717自動(dòng)進(jìn)樣器）、電子天平、攪拌機(jī)、勻漿機(jī)、漩渦混勻器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；甲醇（色譜純），乙腈、二氯甲烷（分析純），氯化鈉（140℃烘烤4 h），NH2固相萃取小柱（500 mg/6 mL）；標(biāo)準(zhǔn)品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）。

1.2 方法

1.2.1 田間試驗(yàn)

依據(jù)《農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》[12]施藥處理，在海南省澄邁縣進(jìn)行了2 a的消解動(dòng)態(tài)及最終殘留試驗(yàn)。土壤消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)施藥濃度為13%唑螨酯-炔螨特乳油195 mg/kg，在柑橘園旁另選20 m2施藥1次；柑橘消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)施藥濃度為1 950 mg/kg（由于紅江橙不易著藥，為增加初始著藥量而增加施藥濃度），施藥1次。最終殘留試驗(yàn)施藥濃度分別設(shè)置為130、195 mg/kg，施藥次數(shù)分別為2次和3次，施藥間隔7 d。柑橘消解動(dòng)態(tài)和最終殘留試驗(yàn)各處理小區(qū)均為3株柑橘，每處理重復(fù)3次。消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)于施藥后0、1、3、7、14、21、28、42 d分別采集土壤、全果樣本；最終殘留距末次施藥后14、21、30 d分別采集全果和土壤樣本。對(duì)照噴灑清水。

1.2.2 樣品的制備

將柑橘樣本沿縱向均勻切成4瓣，分取對(duì)角2瓣，分離橘肉和橘皮，分別稱(chēng)量后勻漿，各分別取200 g樣品；土壤樣本用四分法取小樣，將樣品碾碎并過(guò)20目篩。分取后的樣品密封貯存于-20℃冰柜中。

1.2.3 樣品的前處理

柑橘樣品的提?。悍Q(chēng)?。?0.00±1）g樣品置于高型燒杯中，加入50.0 mL乙腈，勻漿2 min后用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，劇烈震蕩2 min，靜置使乙腈相和水相分層。移取上清液10.0 mL于100 mL圓底燒瓶中，減壓濃縮（40℃）至干，加入5.0 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）溶解混勻，待凈化。

土壤樣品的提?。悍Q(chēng)取（20.00±1）g的樣品，置于200 mL具塞錐形瓶中，加入50.0 mL乙腈，在往復(fù)式振蕩器上振蕩提取2 h后用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有10.0 mL過(guò)飽和氯化鈉食鹽水的100 mL具塞量筒中，劇烈震蕩2 min，靜置使乙腈相和水相分層，移取上清液10.0 mL于100 mL圓底燒瓶中，減壓濃縮（40℃）至干，加入5.0 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）溶解混勻，待凈化。

樣品凈化：柑橘樣品、土壤樣品： NH2固相萃取小柱用5.0 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）預(yù)淋洗，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即倒入待凈化溶液，用50 mL圓底燒瓶收集，用5.0 mL二氯甲烷-甲醇（95∶5，V/V）沖洗圓底燒瓶殘留物后淋洗NH2小柱，重復(fù)3次。收集液減壓濃縮（40℃）至干，用2.50 mL甲醇定容后用0.22 μm濾膜過(guò)濾，待測(cè)。

1.2.4 檢測(cè)條件

色譜柱：Diamonsil 150 mm×4.60 mm（id.），5 μm不銹鋼柱，內(nèi)填C18；紫外檢測(cè)器：波長(zhǎng)220 nm；流動(dòng)相：甲醇-水（體積比為80∶20）；柱溫：40℃；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的靈敏度、精確度與準(zhǔn)確度

以唑螨酯、炔螨特混合標(biāo)樣為標(biāo)準(zhǔn)，外標(biāo)法定量，UPLC-UV檢測(cè)，在上述色譜條件下，唑螨酯、炔螨特的保留時(shí)間分別為20.0、22.58 min?；鞓?biāo)中唑螨酯的濃度范圍為0.10～2.00 μg/mL，炔螨特的濃度范圍為0.50～20.00 μg/mL，唑螨酯的回歸方程和決定系數(shù)為：Y=36 200X-4 390，R2=0.999 2；炔螨特的回歸方程和決定系數(shù)為Y=15 800X-15 900，R2=0.998 0，這表明在試驗(yàn)條件范圍內(nèi)儀器響應(yīng)信號(hào)與進(jìn)樣量呈良好線性關(guān)系。

根據(jù)我國(guó)殘留限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，柑橘中唑螨酯的農(nóng)藥最高殘留限量（MRL）值為0.2 mg/kg，炔螨特的MRL值為5 mg/kg[13]，采用本方法，柑橘肉、皮、全果和土壤中唑螨酯和炔螨特的最低檢測(cè)濃度分別為0.05、0.1 mg/kg，滿(mǎn)足農(nóng)殘檢測(cè)要求。在20 g空白樣品中分別添加0.10、0.25、0.50 mg/kg的唑螨酯和1.00、2.50、5.00 mg/kg的炔螨特的標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)5次，按所建立的提取、凈化和分析方法測(cè)定回收率。唑螨酯的平均回收率在71%～99%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.7～10.7；炔螨特的平均回收率在77%～96%，RSD值在1.1～8.9，符合農(nóng)藥殘留分析的要求。

2.2 唑螨酯、炔螨特在柑橘肉、皮和土壤中的消解動(dòng)態(tài)

唑螨酯在柑橘全果和土壤中的原始沉積量分別為2.40～1.50和3.98～3.11 mg/kg；炔螨特在柑橘全果和土壤中的原始沉積量分別為4.50～3.20和8.51～7.10 mg/kg。二者殘留量最高值出現(xiàn)在施藥后的當(dāng)天（見(jiàn)圖1），隨后均隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈逐漸下降趨勢(shì)，2 a的試驗(yàn)結(jié)果均呈現(xiàn)相似的消解趨勢(shì)（見(jiàn)表1）。唑螨酯在柑橘和土壤中的平均半衰期分別為7.6、14.6 d，炔螨特的則為8、14.1 d。

2.3 最終殘留分析

由表2可知，未在柑橘樣品中檢出農(nóng)藥殘留，在最后一次施藥后14、21 d的土壤樣品中有檢出農(nóng)藥殘留，唑螨酯的殘留范圍在0.07～0.18 mg/kg，炔螨特的殘留范圍在0.15～0.43 mg/kg， 30 d時(shí)已完全降解。

3 討論與結(jié)論

研究結(jié)果表明，唑螨酯和炔螨特在柑橘中的降解速率比在土壤中快，二者在柑橘中的半衰期均明顯短于在土壤中的半衰期。此次消解試驗(yàn)開(kāi)始于果實(shí)剛著色時(shí)，此時(shí)果實(shí)已充分成長(zhǎng)，因此生長(zhǎng)稀釋作用較小，這主要和紅江橙不易著藥，也易于被雨水淋洗有關(guān)（在本試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)紅江橙不易著藥，不能滿(mǎn)足消解試驗(yàn)的要求，因此加大了在果實(shí)上的消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)的施藥濃度）。最終殘留結(jié)果顯示，柑橘中均未檢出農(nóng)藥殘留，距最后一次施藥14、21 d時(shí)，在土壤樣品中有檢出農(nóng)藥殘留。由于海南澄邁位于邊緣熱帶氣候帶[14]，全年光照時(shí)間長(zhǎng)，降雨量大，雨季主要集中在下半年[8]，本試驗(yàn)于8～10月開(kāi)展，正是雨季時(shí)期，這些因素都有可能促進(jìn)唑螨酯和炔螨特在柑橘和土壤中的降解和淋溶，但最終農(nóng)藥可能進(jìn)入到水系中，因此，對(duì)于其風(fēng)險(xiǎn)需進(jìn)一步確定。使用建議：13%唑螨酯-炔螨特乳油在海南地區(qū)防治柑橘紅蜘蛛，用藥量在86.7～130 mg/kg時(shí)，最多可使用2次，施藥間隔期7 d，施藥方法采用植株噴霧，采收間隔期30 d。

本研究采用高效液相色譜儀測(cè)定柑橘中唑螨酯與炔螨特的農(nóng)藥殘留量，實(shí)驗(yàn)方法通俗易懂，回收率高，靈敏度高，重現(xiàn)性好，適于柑橘中唑螨酯與炔螨特農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)分析。

參考文獻(xiàn)

[1] 張一賓. 農(nóng)藥[M]. 北京：物資出版社，1998：25-28.

[2] 馬奇祥. 常用農(nóng)藥使用簡(jiǎn)明手冊(cè)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001：130-133.

[3] 鐘 珺，徐善忠. 幾種藥劑防治柑橘紅蜘蛛藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)[J]. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2013，19（5）：68-69.

[4] 田如海，陸 爽，陳時(shí)健，等. 4種殺螨劑防治柑橘全爪螨效果初探[J]. 上海農(nóng)業(yè)科技，2013，43（2）：113-114.

[5] 鐘玉榮. 不同藥劑防治柑橘紅蜘蛛藥效試驗(yàn)[J]. 吉林農(nóng)業(yè)，2013，10（1）：15.

[6] 吳俐勤，朱亞紅，許海忠，等. 唑螨酯在柑桔和土壤中的殘留研究[J]. 農(nóng)藥，1996，3（7）：21-23.

[7] 樓正云，湯富彬，陳宗懋，等. 炔螨特在柑橘和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008，20（4）：282-286.

[8] Kumar V， Sood C， Jaggi S， et al. Dissipation behavior of propargite-an acaricide residues in soil，apple（Malus pumila）and tea（Camellia sinensis）[J]. Chemosphere， 2005， 58（6）： 837-843.

[9] Halvorsen B L， Thomsen C， eibrokk T， et al. Determination of fenpyroximate in apples by supercritical fluid extraction and packed capillary liquid chromatography with UV detection[J]. Journal of Chromatography A， 2000， 880（1-2）： 121-128.

[10] Zhang J H， Liang Z， Guo H. Ionic liquid-based totally organic solvent-free emulsification microextraction coupled with high performance liquid chromatography for the determination of three acaricides in fruit juice[J]. Talanta，2013（115）：556-562.

[11] 徐敦明，盧聲宇，陳達(dá)捷. 加速溶劑萃取-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中10種吡唑和吡咯類(lèi)農(nóng)藥的殘