謝娜娜

摘要：清潔驗(yàn)證是進(jìn)行遺留物質(zhì)清除，較小交叉污染的一項(xiàng)驗(yàn)證性活動(dòng)。清潔驗(yàn)證對(duì)于有效減小內(nèi)毒素以及微生物等方面的風(fēng)險(xiǎn)具有重要的意義。對(duì)于玻璃、不銹鋼以及塑料等不同材質(zhì)容器采用不同菌種進(jìn)行回收率對(duì)比分析，論述了在清潔驗(yàn)證中不同材質(zhì)容器回收率之間的關(guān)系，為提升清潔驗(yàn)證工作的效果以及方法科學(xué)化提供了重要的參考。結(jié)論表明，無細(xì)胞百白破聯(lián)合疫苗及傷寒Vi多糖疫苗生產(chǎn)過程中對(duì)與產(chǎn)品相接觸的塑料、玻璃、硅膠、不銹鋼表面進(jìn)行取樣采用的取樣方法是有效的。

關(guān)鍵詞：清潔驗(yàn)證；不同材質(zhì)；容器；回收率

中圖分類號(hào)：TQ460文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2015）06（a）-0000-00

清潔驗(yàn)證活動(dòng)要以可是實(shí)行較強(qiáng)的文件作為證據(jù)的一項(xiàng)驗(yàn)證活動(dòng)，其主要目的是對(duì)去除生產(chǎn)過程中遺留物質(zhì)的方法的有效性進(jìn)行證明，并能夠最大程度減少微生物以及內(nèi)毒素交叉污染。回收率的驗(yàn)證則主要是針對(duì)不同的清潔驗(yàn)證對(duì)象對(duì)清潔中所采用的取樣方案進(jìn)行的驗(yàn)證活動(dòng)。實(shí)踐過程中，驗(yàn)證不同材質(zhì)的容器對(duì)于相同物質(zhì)取樣的有效性。文中主要是驗(yàn)證了卡介苗等不同產(chǎn)品生產(chǎn)過程中與容器表明接觸取樣時(shí)，所應(yīng)用取樣方案的科學(xué)性與有效性。

1.基本概念界定

1.1 清潔驗(yàn)證

驗(yàn)證方案是為了能夠得到相應(yīng)的數(shù)據(jù)，在實(shí)施過程中以操作性文件為基本依據(jù)，對(duì)清除容器上的殘留物所使用的方法的有效性進(jìn)行證明的實(shí)驗(yàn)過程。其主要目的是盡量減少交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)，在驗(yàn)證過程中一般都采用不同的容器，針對(duì)特定的驗(yàn)證對(duì)象進(jìn)行對(duì)比分析，找出最優(yōu)的方案以及相應(yīng)的流程。

1.2 回收率

容器使用后，會(huì)受到一定的污染，因此進(jìn)行取樣方式有效性的考察方案驗(yàn)證要對(duì)回收率進(jìn)行必要的統(tǒng)計(jì)與研究。本例子主要考核在不同容器中回收率的數(shù)據(jù)對(duì)比。

1.3 其他概念

被測(cè)物，在清潔驗(yàn)證活動(dòng)中主要指的是最難清潔的殘留物；檢測(cè)限（LOD），樣品濃度分析過程中，可以被檢測(cè)到但不需要量化到精確值的最低量。定量限一般認(rèn)為是在樣品濃度檢測(cè)過程中，檢測(cè)結(jié)果的精確性以及準(zhǔn)確度要能夠有最低的保證（或者成為保證的最低量）；產(chǎn)品接觸表面，在清潔驗(yàn)證活動(dòng)中，與產(chǎn)品生產(chǎn)直接相關(guān)、與工藝過程直接相關(guān)等具有接觸的任何生產(chǎn)設(shè)備、容器等都屬于產(chǎn)品接觸表面的范疇（文章主要分析的是容器表面）；線性指的是在一定的檢測(cè)范圍內(nèi)，驗(yàn)證過程獲取數(shù)據(jù)的能力?；靖拍罾迩搴?，對(duì)于驗(yàn)證過程方案的確定以及驗(yàn)證過程的準(zhǔn)確實(shí)施以及效果評(píng)價(jià)具有重要的意義。

2 驗(yàn)證方案的確定

2.1 驗(yàn)證方案的期間準(zhǔn)備階段

首先是目標(biāo)殘留物的確定，根據(jù)選擇的基本依據(jù)，一般而言都是采用在生產(chǎn)過程中最難以清潔的物質(zhì)或者化學(xué)活性最強(qiáng)物質(zhì)作為待檢測(cè)的目標(biāo)殘留物；其次要正確選擇合理的取樣方案，目前業(yè)內(nèi)通常的取樣方案有最終淋洗水取樣以及擦拭取樣兩種方案，在本次驗(yàn)證中采用測(cè)定被測(cè)物的TOC濃度。制備被測(cè)物的稀釋液，并提交用于做TOC濃度檢測(cè)，測(cè)出稀釋液的TOC濃度。根據(jù)這些檢測(cè)結(jié)果，可以計(jì)算出未稀釋被測(cè)物的TOC濃度，并可用于之后回收率研究的TOC濃度計(jì)算；最后對(duì)檢測(cè)的數(shù)據(jù)與實(shí)際的規(guī)定值進(jìn)行對(duì)比分析，確定取樣方案的有效性與科學(xué)性。

2.2 驗(yàn)證方案的技術(shù)要求

明確的驗(yàn)證方案對(duì)于整體的驗(yàn)證過程具有重要的指導(dǎo)意義，在驗(yàn)證方案起草中，要能夠包含以下幾個(gè)方面的內(nèi)容。驗(yàn)證方案要符合驗(yàn)證的技術(shù)需求，驗(yàn)證必須符合科學(xué)、合理的檢驗(yàn)要求，能夠?yàn)榍鍧嶒?yàn)證中殘留物的檢驗(yàn)方法提供必要的依據(jù)；同時(shí)要根據(jù)殘留物的種類以及技術(shù)需求確定驗(yàn)證的閾值大小，最后要能夠形成驗(yàn)證小組，有效實(shí)施對(duì)于項(xiàng)目的驗(yàn)證，并申請(qǐng)項(xiàng)目編碼。

3 不同材質(zhì)容器回收率分析

3.1 驗(yàn)證過程中的原則要求

在驗(yàn)證過程中，要能夠嚴(yán)格遵守以下的原則性要求，保證驗(yàn)證的科學(xué)與準(zhǔn)確性。所有的數(shù)據(jù)均需填入對(duì)應(yīng)表格中，并簽署姓名和日期；實(shí)施本方案的人員均需在附件1的簽名頁(yè)簽名；在執(zhí)行本方案過程中遇到的所有不符合性或異常情況均需記錄到附件12不符合性描述中。所有的不符合項(xiàng)均需經(jīng)由QMS.MA8.3.0-S001《不符合性控制指南》處理；方案實(shí)施結(jié)束后，制作一份總結(jié)報(bào)告和數(shù)據(jù)分析，內(nèi)容包括測(cè)試數(shù)據(jù)或結(jié)果的總結(jié)、數(shù)據(jù)分析和驗(yàn)證方案的結(jié)論；完成方案執(zhí)行可能需要復(fù)印方案的數(shù)據(jù)頁(yè)。 按實(shí)際需要復(fù)印并在每頁(yè)附件右上角注明頁(yè)碼，書寫方式為“X of Y”，X代表第幾頁(yè)，Y代表總頁(yè)數(shù)。標(biāo)注頁(yè)碼號(hào)的人員必須在頁(yè)碼號(hào)后面簽名并寫上日期；接受此驗(yàn)證要求，在實(shí)施過程中實(shí)施結(jié)果應(yīng)符合本方案中所有部分的可接受標(biāo)準(zhǔn)，所有不符合項(xiàng)及糾正措施均有記錄。驗(yàn)證“通過”或“失敗”取決于本方案中指定的可接受標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 驗(yàn)證過程

首先進(jìn)行被測(cè)物信息的等級(jí)，以進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，其次進(jìn)行被測(cè)物TOC濃度測(cè)定，在此過程中需要完成的工作主要由以下幾個(gè)方面，首先是被測(cè)物稀釋液的制備，用WFI作稀釋劑，制備一組被測(cè)物稀釋液（如，1：100， 1：10，000， 1：100，000，共3份樣品），盡量使被測(cè)物稀釋液的TOC濃度在TOC分析儀的線性操作范圍內(nèi)。在一個(gè)潔凈的TOC采樣瓶中加入約40 ml的WFI，并做相應(yīng)編號(hào)，作為空白對(duì)照，同時(shí)將已編號(hào)的TOC采樣瓶送去做TOC濃度檢測(cè)，最后進(jìn)行最大倍數(shù)稀釋液的檢測(cè)，如果檢測(cè)結(jié)果大于1 ppm C，應(yīng)考慮是否放 棄檢測(cè)其它被測(cè)物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測(cè)限度，造成儀器損壞進(jìn)行最大倍數(shù)稀釋液的檢測(cè)，如果檢測(cè)結(jié)果大于1 ppm C，應(yīng)考慮是否放 棄檢測(cè)其它被測(cè)物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測(cè)限度，造成儀器損壞進(jìn)行最大倍數(shù)稀釋液的檢測(cè)，如果檢測(cè)結(jié)果大于1 ppm C，應(yīng)考慮是否放 棄檢測(cè)其它被測(cè)物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測(cè)限度，造成儀器損壞。

同時(shí)要進(jìn)行被測(cè)物TOC濃度分析，收集的數(shù)據(jù)并記錄，如果沒有一個(gè)樣品的TOC濃度在分析儀的線性操作范圍內(nèi)，則重復(fù)操作，直至制備的被測(cè)物稀釋液TOC濃度在分析儀的線性操作范圍內(nèi)。用各個(gè)樣品的TOC濃度減掉空白對(duì)照TOC濃度，校正所有檢測(cè)值。

3.3 回收率檢測(cè)

使用微量移液器，吸取制備的被測(cè)物稀釋液1ml，均勻滴在設(shè)備樣板上，每種濃度滴三塊樣板。將樣板置于超凈工作臺(tái)中，使其過夜干燥（最少12小時(shí)但不超過36小時(shí)）。稀釋液應(yīng)均勻分布于樣板上。均勻滴加稀釋液的方法。如圖1所示

圖1 均勻滴加稀釋液法示意圖

取與樣板數(shù)量等量的TOC采樣瓶，取制備的被測(cè)物稀釋液1ml加入到TOC采樣瓶中，用注射用水補(bǔ)充TOC采樣瓶?jī)?nèi)溶液量至40ml。標(biāo)記樣品做為被測(cè)物稀釋液陽(yáng)性對(duì)照。 按照檢驗(yàn)方法，對(duì)于濃度為10、20及40 ppm C的每份被測(cè)物稀釋液，都應(yīng)獲取3份陽(yáng)性對(duì)照樣品（總共9份）將所有樣品渦旋30秒以確保溶液混勻；提交陽(yáng)性對(duì)照樣品進(jìn)行TOC濃度檢測(cè)；獲取陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果并填至數(shù)據(jù)表。

4 數(shù)據(jù)處理及分析

質(zhì)量檢定室使用提供的樣品進(jìn)行本試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果記錄在附件上，并反饋給驗(yàn)證組。結(jié)果由驗(yàn)證組進(jìn)行評(píng)估。未符合可接受標(biāo)準(zhǔn)的試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)標(biāo)明“失敗”，并進(jìn)行調(diào)查確定失敗原因。調(diào)查，根本原因，糾正和預(yù)防措施，以及結(jié)論應(yīng)在不符合性記錄中進(jìn)行概述。在達(dá)到以下驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的情況下，該方案可以被認(rèn)為已完成：已經(jīng)附上所有支持測(cè)試結(jié)果的數(shù)據(jù)。所有產(chǎn)生失敗步驟的偏差已經(jīng)得到解決和批準(zhǔn)，并且已經(jīng)附在文件中。所有參與執(zhí)行此方案的人員都在簽名欄中簽名。對(duì)于可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)算，分析在不銹鋼、玻璃等不同材質(zhì)下的回收率。通過統(tǒng)計(jì)分析得知，不同材質(zhì)的清潔驗(yàn)證回收率在50-120%之間，符合驗(yàn)證的目的。不同材質(zhì)回收率測(cè)定表格如圖2所示。

圖2不同材質(zhì)回收率測(cè)定表

5 結(jié)論

為了證明在生產(chǎn)過程中對(duì)與產(chǎn)品相接觸的塑料、玻璃、硅膠、不銹鋼表面進(jìn)行取樣采用的取樣方法是有效的。采用了熟料、玻璃、不銹鋼扥各不同容器對(duì)卡介苗等生產(chǎn)過程中最難清除的殘留物進(jìn)行了清潔驗(yàn)證分析。驗(yàn)證過程中，首先需要取確定最難清潔殘留物，在此基礎(chǔ)上根據(jù)驗(yàn)證方案進(jìn)行溶液的制備以及濃度的檢測(cè)，根據(jù)驗(yàn)證工藝要求，與可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，結(jié)論表明，不銹鋼等幾種不同材質(zhì)的容器回收率都符合驗(yàn)證要求。

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