左 琳,宋 峰,趙 銳,李端端,石山慧,賀忠梅,劉慧榮

異丙腎上腺素對(duì)大鼠心臟功能的動(dòng)態(tài)影響

左 琳1,2,宋 峰1,趙 銳3,李端端1,2,石山慧1,2,賀忠梅1,2,劉慧榮4

目的觀察異丙腎上腺素(ISO)對(duì)在體大鼠心臟功能、心室肌細(xì)胞功能以及胞內(nèi)相關(guān)下游蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)影響。方法采用血流動(dòng)力學(xué)方法及乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng),觀察ISO對(duì)在體及離體大鼠心肌收縮能力的影響;通過(guò)Fura-2熒光探針?lè)ㄓ^察ISO對(duì)成鼠心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平的影響;Western blot檢測(cè)ISO下游胞內(nèi)相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果(5～500)nmo l/L ISO對(duì)成鼠在體心功能有一個(gè)劑量依賴性增強(qiáng)效應(yīng),100 nmo l/L為其最佳實(shí)驗(yàn)濃度:0.1μm o I/LISO作用大鼠心室肌細(xì)胞(1 000～1 200)s,胞內(nèi)游離鈣水平達(dá)高峰。0.1μmo I/LISO作用于乳鼠心肌細(xì)胞30min可使其跳動(dòng)頻率達(dá)高峰,維持至60min后開(kāi)始下降,與胞內(nèi)鈣變化規(guī)律一致。心室肌細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱ(Calm odulin kinaseⅡ,CaMKⅡ)水平在ISO干預(yù)后3 h達(dá)高峰;G蛋白偶聯(lián)受體激酶2 (GRK2)和β-arrestin也在ISO作用后48 h達(dá)高峰。結(jié)論 ISO可通過(guò)興奮胞內(nèi)Ca2+_CaMKⅡ信號(hào)通路參與心肌細(xì)胞功能活動(dòng)的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié);同時(shí),ISO長(zhǎng)期作用可升高胞內(nèi)GRK2-β-arrestin水平,參與受體的脫敏調(diào)節(jié)。

異丙腎上腺素;細(xì)胞內(nèi)游離鈣;心臟功能;鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱ;G蛋白偶聯(lián)受體激酶2;β-arrestin

在心肌重構(gòu)以及心衰的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中。體內(nèi)兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)的長(zhǎng)期持續(xù)升高是導(dǎo)致以上病理改變的主要原因[1]。長(zhǎng)期持續(xù)存在的兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)可通過(guò)興奮β1-腎上腺素受體(β1-AR),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)過(guò)去第二信使環(huán)磷酸腺苷(cAMP)水平的升高[2],激活蛋白激酶A(Pro tein Kinesse A,PKA)及下游信號(hào)通路引起心臟重塑、心功能降低,以致心力衰竭等嚴(yán)重后果[3]。

異丙腎上腺素(ISO)作為兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)的一種,可以同時(shí)作用于β1-AR和β2-AR[2],其中對(duì)于心臟的作用以興奮β1-AR為主。醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究中,ISO常被用于心律失常[4]及心肌重構(gòu)[5]動(dòng)物模型的制備,它同時(shí)也是實(shí)驗(yàn)最常用的β-AR激動(dòng)劑。體內(nèi)兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)長(zhǎng)期作用會(huì)導(dǎo)致其靶受體的脫敏[6]。具有類(lèi)激動(dòng)劑樣作用的β1-腎上腺素受體自身抗體(β1-AAbs)和ISO的作用類(lèi)似[7],二者都可以激動(dòng)β1-AR。本研究以ISO為切入點(diǎn),觀察ISO對(duì)大鼠心功能的動(dòng)態(tài)影響,以及其下游信號(hào)通路的變化情況,以期為ISO的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用提供資料。

1 材料與方法

1.1 材料 健康雄性成年W istar大鼠及乳鼠,由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 方法

1.2.1 血流動(dòng)力學(xué)測(cè)定[8]健康成年雄性SD大鼠20只,隨機(jī)分為ISO處理組和PBS組。2%三溴乙醇(阿佛丁)腹腔麻醉后,沿頸部前正中線做一縱向切口,將帶有探頭的導(dǎo)管(TX)通過(guò)右頸總動(dòng)脈進(jìn)入左心室腔,通過(guò)左側(cè)頸外靜脈給入不同濃度的ISO,記錄大鼠心功能的各項(xiàng)參數(shù):心率、室內(nèi)壓上升和下降的最大速率(±dp/dtmax)。

1.2.2 乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng) 出生(2～3)d的SD大鼠,采用組織塊酶解法分離單個(gè)心肌細(xì)胞[9]。用F10完全培養(yǎng)基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素)重懸細(xì)胞,按照1×106的密度接種于6孔板上,第二天施加處理因素,收集細(xì)胞用于Western blot實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 胞內(nèi)游離鈣測(cè)定 采用Langendorff離體心臟灌流法分離單個(gè)心室肌細(xì)胞[10]。將分離獲得的單個(gè)心室肌細(xì)胞與鈣離子熒光指示劑Fura 2-AM(5 μm o l/L)避光孵育30min(37℃),PBS洗滌后,采用O lym pus FV1000采集ISO給藥前后胞內(nèi)游離鈣水平的動(dòng)態(tài)變化,用蔡司LSM 5軟件分析胞內(nèi)游離鈣熒光強(qiáng)度的平均值(F值)。

1.2.4 Western b lo t[11]培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞加入ISO(終濃度0.1μmo l/L),分別作用0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后收集細(xì)胞標(biāo)本,用4%～ 20%的梯度膠進(jìn)行電泳;TBS-T洗膜后加顯影劑(超敏發(fā)光液,App lygentechno logies Inc,北京),用KODAK X-OMAT blue Autoradiography進(jìn)行顯影。

2 結(jié) 果

2.1 ISO可劑量依賴性引起大鼠在體心功能的增強(qiáng)隨著ISO劑量的增加,心功能逐漸增強(qiáng)。100 nmol/L ISO可使+dp/dtmax增加到(10 183±564.4)mmHg/s,顯著高于PBS組(6 279±625.3 mmHg/s,P<0.05);同時(shí),可使-dp/dtmax增加到(-8 163±475.2)mmHg/s,顯著高于PBS組(-4 818±448.2 mmHg/s,P<0.05)。同時(shí),ISO對(duì)心率也產(chǎn)生一個(gè)劑量依賴性的增強(qiáng)作用。在100 nmo l/L時(shí),ISO可顯著增加大鼠的心率(621± 7.8次/min,vs 507±11.7次/min PBS,P<0.05)。在ISO濃度達(dá)到100 nm ol/L以上時(shí),其對(duì)心功能的增強(qiáng)作用逐漸減緩。詳見(jiàn)圖1。

2.2 ISO可誘發(fā)成鼠心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平先升高后降低 0.1μm o l/L ISO可對(duì)單個(gè)心室肌細(xì)胞0內(nèi)游離鈣水平產(chǎn)生一過(guò)性增強(qiáng)效應(yīng)。加入ISO后400 s可出現(xiàn)游離鈣水平的升高(612±34 vs PBS組509±13, P<0.05);1 000 s達(dá)到高峰(1 104±34 vs PBS組525±19,P<0.05),并維持約200 s;此后,游離鈣水平開(kāi)始快速下降;在ISO作用1 400 s時(shí)基本接近基線水平(719±19 vs PBS組530±14,P<0.05)。詳見(jiàn)圖2。

2.3 ISO可導(dǎo)致乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率先增快后減慢的動(dòng)態(tài)性改變 通過(guò)乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率(圖3A)的觀察來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證ISO的作用特點(diǎn)是否具有脫敏性。用ISO組與PBS組心率的比值來(lái)表示。0.1 μm o l/L ISO作用于跳動(dòng)的乳鼠心肌細(xì)胞后,可時(shí)間依賴性增強(qiáng)心肌細(xì)胞的跳動(dòng)頻率,該效應(yīng)在ISO作用后的30 min達(dá)高峰(2.46±0.10,P<0.05,vs PBS組,圖3B),并維持至60 min(2.46±0.07,P<0.05,vs PBS組);此后,ISO對(duì)心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率的影響逐漸減弱,在作用后72 h基本恢復(fù)至基礎(chǔ)水平。詳見(jiàn)圖3。

圖1 ISO對(duì)成鼠心功能影響的血流動(dòng)力學(xué)影響

圖2 ISO對(duì)成鼠心肌細(xì)胞胞內(nèi)游離鈣水平的影響

圖3 ISO對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率的影響

2.4 ISO可導(dǎo)致乳鼠心肌細(xì)胞中CaMKⅡ、GRK2及β-arrestin蛋白水平漸增高后降低 Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示:0.1μm o l/L ISO作用于乳鼠心肌細(xì)胞后,可在作用后3顯著升高細(xì)胞內(nèi)CaMKⅡ水平(0.48± 0.004,P<0.05,vs 0.27±0.004 0 h),此后CaMKⅡ水平逐漸下降,在24 h時(shí)接近給藥前水平(0.26± 0.004,P>0.05,vs 0 h),并一直維持至48 h;72 h的CaMKⅡ的胞內(nèi)水平略有下降,低于給藥前水平(0.17± 0.005,P<0.05,vs 0 h)。細(xì)胞內(nèi)GRK2水平在ISO作用后3h開(kāi)始顯著升高(0.57±0.0 06,P<0.05,vs 0 h 0.48±0.002),并在48 h達(dá)到高峰(0.88± 0.005,P<0.05,vs 0 h),72 h時(shí)GRK2略低于給藥前水平(0.46±0.002,P>0.05,vs 0 h)。β-arrestin的檢測(cè)結(jié)果顯示:在ISO作用后的觀察時(shí)間內(nèi),β-arrestin水平從3 h開(kāi)始升高(0.42±0.004,P<0.05,vs 0h 0.38±0.0 06),48 h達(dá)高峰(0.5 3± 0.003,P<0.05,vs 0 h),72 h時(shí)β-arrestin水平開(kāi)始下降(0.44±0.011,P<0.05,vs 0 h)。詳見(jiàn)圖4。

圖4 ISO對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞內(nèi)CaMkⅡ、GRK2以及βa-rrestin表達(dá)的影響

3 討 論

心衰過(guò)程中,體內(nèi)存在兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)升高現(xiàn)象[12],這些物質(zhì)長(zhǎng)期存在會(huì)通過(guò)興奮心肌細(xì)胞膜表面的β1受體引起心臟正性調(diào)節(jié)作用[13],但其在體內(nèi)長(zhǎng)期高水平存在時(shí),機(jī)體會(huì)保護(hù)性下調(diào)位于心肌細(xì)胞膜表面的β1受體密度[14],以此來(lái)對(duì)抗兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)的作用,也稱為脫敏現(xiàn)象。ISO也是一類(lèi)重要的兒茶酚胺類(lèi)物質(zhì)[15]。在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究中,其常被用作β受體激動(dòng)劑[16],但多數(shù)研究只把ISO當(dāng)做對(duì)照,而對(duì)ISO生物學(xué)功能的研究常常不夠深入,其脫敏現(xiàn)象的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律尚不十分清楚。

為了研究ISO對(duì)大鼠心肌細(xì)胞的脫敏性生物學(xué)效應(yīng)及其可能的機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)觀察了ISO對(duì)正常大鼠在體心功能的劑量依賴性效應(yīng),結(jié)果表明:在(5～500) nmol/L濃度范圍內(nèi),ISO對(duì)成鼠心功能有一個(gè)劑量依賴性的增強(qiáng)效應(yīng)。在ISO濃度達(dá)到100 nmol/L時(shí),± dp/d t以及心率的升高幅度都基本接近峰值;在500 nmol/L時(shí),心功能增強(qiáng)已不十分顯著。這與已有的研究報(bào)道相一致[17]。ISO對(duì)成年大鼠在體心功能有一個(gè)劑量依賴性的增強(qiáng)作用;100 nmol/L的ISO可產(chǎn)生比較顯著的增強(qiáng)效應(yīng),因此,在接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)中會(huì)以該濃度作為觀察濃度。

Ca2+是和心肌收縮密切相關(guān)的偶聯(lián)因子,其胞內(nèi)水平的高低直接影響心肌收縮力的強(qiáng)弱[18]。本研究采用離子成像技術(shù),觀察了100 nmol/L ISO對(duì)成鼠心室肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平的影響,100μmo l/L ISO作用400s時(shí),胞內(nèi)游離鈣水平開(kāi)始顯著升高;在(1000～ 1 200)s時(shí)達(dá)高峰,此后又逐漸降低。ISO對(duì)在體心功能的增強(qiáng)效應(yīng)是通過(guò)增加胞內(nèi)游離鈣水平實(shí)現(xiàn)的。與此同時(shí),Ca2+下游的重要調(diào)節(jié)蛋白CaMKⅡ的水平在ISO干預(yù)后3 h達(dá)高峰,此后逐漸下降。ISO的作用可使收縮期內(nèi)流進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的鈣離子增多,其一方面可以直接通過(guò)和肌鈣蛋白結(jié)合誘發(fā)肌肉收縮的增強(qiáng)[19];同時(shí)Ca2+還可與鈣調(diào)蛋白結(jié)合,并活化下游的CaMKⅡ[20],有可能參與了心肌肥厚[21]、心律失常[22]以及心肌頓抑等疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。但在ISO作用1 200 s后,胞內(nèi)游離Ca2+開(kāi)始下降,出現(xiàn)這一變化的機(jī)制尚不十分清楚。

為了搞清楚ISO細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平下降的原因,通過(guò)乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)態(tài)觀察了ISO對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率的影響。0.1μm o l/L ISO亦可導(dǎo)致乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率的增加。在ISO干預(yù)后30 min,乳鼠心肌細(xì)胞的跳動(dòng)頻率達(dá)高峰,該效應(yīng)維持至60 min后開(kāi)始下降,在ISO作用72 h后,乳鼠心肌細(xì)胞跳動(dòng)頻率基本接近靜息水平。這與以往的研究相一致[23],同時(shí)也能解釋ISO對(duì)大鼠在體心功能影響的變化規(guī)律,但由于在體及離體實(shí)驗(yàn)條件的差異,因此,關(guān)鍵作用時(shí)間點(diǎn)并不完全重疊。

在心肌細(xì)胞膜受體脫敏研究中存在兩個(gè)關(guān)鍵蛋白,即GRK2和β-arrestin。GRK2作為一種激酶,可以磷酸化底物蛋白-G蛋白-上的特定位點(diǎn),使之不能與G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)結(jié)合,反而與β-arrestin結(jié)合,終止了GPCRs下游G蛋白信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo);而結(jié)合了GPCRs的β-arrestin可作為銜接蛋白進(jìn)一步結(jié)合網(wǎng)格蛋白和β2銜接蛋白,形成內(nèi)吞小窩,在動(dòng)力蛋白Dynamin的幫助下形成胞吞囊泡,促進(jìn)GPCRs的內(nèi)化和脫敏[24]。因此,GRK2和β-arrestin表達(dá)的改變可在一定程度上代表GPCRs內(nèi)化的程度。針對(duì)ISO干預(yù)后出現(xiàn)以上脫敏現(xiàn)象的可能原因,對(duì)ISO干預(yù)乳鼠心肌細(xì)胞后不同時(shí)間點(diǎn)的胞內(nèi)相關(guān)蛋白水平進(jìn)行了檢測(cè),參與受體脫敏調(diào)節(jié)的蛋白GRK2和β-arrestin也在ISO作用后出現(xiàn)了表達(dá)水平的上調(diào),其中GRK2和β-a rrestin均在ISO作用4 8 h達(dá)高峰,此后開(kāi)始下降。

ISO作為經(jīng)典的β-AR激動(dòng)劑,對(duì)心臟的早期效應(yīng)表現(xiàn)為通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)游離鈣水平,產(chǎn)生正性調(diào)節(jié)作用,該效應(yīng)具有劑量依賴性;ISO對(duì)心臟的晚期效應(yīng)表現(xiàn)為生物學(xué)功能的脫敏,主要是由于胞內(nèi)GRK2及β-a rrestin蛋白表達(dá)增加導(dǎo)致了該現(xiàn)象的發(fā)生。對(duì)于ISO作用后,心肌細(xì)胞膜表面β1-AR的密度及親和力的改變將是進(jìn)一步研究的重點(diǎn)。

[1] 彭應(yīng)心.兒茶酚胺-β受體-cAMP系統(tǒng)在高血壓和心力衰竭中的調(diào)控作用[D].杭州:浙江大學(xué),2005.

[2] Lohse MJ,Engelhard t S,Eschenhagent.What is the role of beta-adrenergic signa ling in heart failure[J].Circ Res,2003,93: 896-906.

[3] Ma X,Song Y,Chen C,et al.Distinct actions of intermittent and sustainedβadrenocep to rstim ulation on cardiacrem odeling [J].Sci China Life Sci,2011,54(6):493-501.

[4] Kumar N,Aksoy I,Phan K,et al.Coronary spasm during card-i ac electrophysio logical study fo llow ing isop rotereno l infusion [J].Interv Med App l Sci,2014,6(4):183-186.

[5] W illis BC,Sa lazar-CantúA,Silva-Platas C,et al.Impaired oxidative m etabolism and ca lcium m ishand ling unde rlie card iac dysfunction in a ratmode l of post acu te isopro terenol-induced cardiom yopathy[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2014:19.

[6] Cannavo A,Rengo G,Liccardo D,et al.β1-adrenergic receptor and sphingosine-1-phospha te receptor 1(S1PR1)reciproca l downregulation influences cardiac hypertrophic response and progression to heart failure:pro tective role of S1PR1 card iac gene therapy[J].Circu lation,2013,128(15):1612-1622.

[7] Zuo L,Zhao R,Wang L,et al.Presence of autoantibodies againstβ1-ad renocepto r aggrava tes the kidney inju ry in rats[J]. Acta Physio logica Sinica,2014,66(2):175-185.

[8] Gao E,Lei YH,Shang X,et al.A novel and efficient m odel of coronary artery liga tion and m yocardial infarction in the mouse [J].Circ Res,2010,107(12):1445-1453.

[9] Qian F,Mai Chen,Lin Zuo,et al.Myocardial ablation of G protein-coup led recepto r kinase 2(GRK2)decreases ischem ia/ reperfusion in jury through an anti-in trinsic apopto tic pathway [J].Plos One,2013,8(6):e66234.

[10] Wang W,Zhu W,Wang S,et al.Sustained beta1-ad renergic stimu lation modulates ca rdiac contractility by Ca2+/calmodulin kinase signaling pathway[J].Circ Res,2004,95(8):798-806.

[11] 左琳,王可,田玨,等.抗β1腎上腺素受體細(xì)胞外第二環(huán)自身抗體長(zhǎng)期存在對(duì)大鼠心肌組織鈣調(diào)蛋白激酶Ⅱδ-亞型表達(dá)的影響[J].中國(guó)心血管病研究,2009,7(8):604-608.

[12] Szentm iklosi AJ,Szentandrassy N,Hegyi B,et al.Chem istry, physiology,and pha rmaco logy of βAdrenergic m echanism sin the heart.Why areβ-b locker antiarrhythm ics superior[J].Curr Pharm Des,2015,21(8):1030-1041.

[13] Wengrowski AM,Wang X,Tapa S,et al.Optogenetic re lease of norepineph rine from card iac sym pa thetic neurons a lters mechanicaland electrica lfunction[J].Card iovas Res,2015,105(2): 143-150.

[14] de Lucia C,Femmine lla GD,Gam bino G,et al.Ad renal ad renoceptors in heart failure[J].Front Physiol,2014,5:246.

[15] Jing L,Wang Y,Zhao XM,et al.Cardiopro tective e ffect of hydrogen-rich saline on isop rotereno l-induced m yocardial in farction in rats[J].Heart Lung Circ,2014S1443-9506(14)00800-802.

[16] Copik AJ,Baldys A,Nguyen K,et al.Isoprote reno l acts as a b-i ased agonist of the alpha-1A-ad renoceptor that selective ly activates the MAPK/ERK Pathway[J].PloS One,2015,10(1): e0115701.

[17] W oodallMC,Cicca relliM,Wooda ll BP,et al.G protein-coup led recepto r kinase 2:A link be tween m yocardial contractile function and ca rdiac me tabo lism[J].Circ Res,2014,114(10):1661-1670.

[18] Zuèhlke RD,Pitt GS,Deisseroth K,et al.Calmodulin supports bo th inactivation and facilitation of L-type ca lcium channe ls[J]. Natu re,1999,399(6732):159-162.

[19] Camors E,Moh ler PJ,Bers DM,et al.Ankyrin-B reduction enhances Ca spark-med iated SR Ca release p romo ting card iac myocyte arrhythm ic activity[J].JMol Cell Cardio l,2012,52(6): 1240-1248.

[20] Pagel PS,Kro likowski JG,Ne ff DA,et al.Inhibition of g lycogen synthase kinase enhances isoflurane-induced protection againstm yocard ial infarction du ring early reperfusion in vivo[J]. Anesthesia&Ana lgesia 2006,102(5):1348-1354.

[21] Branco AF,Sam paio SF,W ieckowski MR,et al.Mitochondrial disrup tion occurs downstream fromβad rene rgic ove ractivation by isopro terenol in d ifferentiated,but not und ifferentiated H9c2 cardiom yoblasts:Diffe rentia l activation of stress and su rvival pa thways[J].In t J Biochem Ce ll Bio l,2013,45(11):2379-2391.

[22] Pe reira L,Cheng H,Lao DH,et al.Epac2 mediates cardiacβ1 adrenergic-dependent sa rcop lasm ic reticu lum Ca2+leak and arrhythm ia[J].Circulation,2013,127(8):913-922.

[23] Panda S,Kar A.Combined e ffects of vincristine and que rcetin in reducing isop roterenol-induced cardiac necrosis in ra ts[J]. Ca rdiovasc Toxico l,2014,24.

[24] 范恒,廖奕,唐慶,等.βarrestin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在炎癥性腸病發(fā)生過(guò)程中的作用機(jī)制[J].世界華人消化雜志,2010,18(29): 3114-3120.

R285 R255

A

10.3969/j.issn.1672-1349.2015.05.011

1672-1349(2015)05-0589-05

2014-06-30)

(本文編輯 王雅潔)

國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No.81200120);山西省回國(guó)留學(xué)人員科研資助項(xiàng)目(No:2014-036);山西醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生理學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任基金(No.2010-14)

1.山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系(太原030001);2.山西醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞生理學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;3.山西省兒童醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心;4.首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系

劉慧榮,E-m ail:liuihr2000@126.com