孟 美

(山東中醫(yī)藥大學(xué)理工學(xué)院，濟(jì)南 250355)

四氧嘧啶（al loxan，ALX）可以對胰島B細(xì)胞產(chǎn)生特異性破壞，終止胰島素的分泌，進(jìn)而引起動物持續(xù)性的血糖升高。根據(jù)其作用機(jī)理而制取的糖尿病動物模型與人類I型糖尿病相類似，因此，該種動物模型被廣泛用于糖尿病相關(guān)治療和藥物研發(fā)中。本人在探究四氧嘧啶不同劑量致小鼠糖尿病的相關(guān)試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，小劑量的四氧嘧啶引起了小鼠低血糖甚至死亡，在以往文獻(xiàn)中并無相關(guān)報(bào)道，故重復(fù)此試驗(yàn)，并將試驗(yàn)結(jié)果作一報(bào)道。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動物健康雄性4周齡昆明種小鼠26只，體重均為18-20g，購自山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動物中心，許可證號：SCXK(魯)20130001。

1.1.2試劑與器械四氧嘧啶，阿拉丁試劑(中國)有限公司產(chǎn)品，批號K13130001。強(qiáng)生穩(wěn)豪型血糖儀、血糖試紙，強(qiáng)生（中國）醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1動物分組將健康小鼠正常飼養(yǎng)7d，之后禁食6h，針刺尾靜脈取血，按照血糖儀及試紙說明，測定試驗(yàn)前血糖。選擇血糖值在3.9～6.1mmol/l的健康小鼠作為實(shí)驗(yàn)用動物,并根據(jù)血糖值隨機(jī)分為對照組、小劑量組、大劑量組，對照組6只，小、大劑量組各10只。

1.2.2模型建立各組小鼠均禁食10h，之后配制9mg/ml四氧嘧啶溶液，小劑量組每只腹腔注射0.2ml溶液，大劑量組每只腹腔注射0.4ml溶液，對照組每只腹腔注射0.4ml生理鹽水。溶液配制到注射結(jié)束在5min內(nèi)完成，注射過程中將四氧嘧啶溶液置于冰浴鍋中。

1.2.3血糖測定與分析分別于腹腔注射后12h、48h后，尾靜脈取血測定每只小鼠血糖，并記錄。每次測量前均禁食6h。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用X±S表示,組間用t 檢驗(yàn)方法進(jìn)行處理。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1血糖值變化

實(shí)驗(yàn)前根據(jù)血糖值隨機(jī)分組，注射前三組血糖值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

注射后12h的血糖測定數(shù)據(jù)顯示，大、小劑量組血糖均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；大劑量組血糖值低于小劑量組，其中大劑量組2只血糖值低于2.8mmol/l，分別為1.8mmol/l、2.4mmol/l，均于注射后12h內(nèi)死亡。

注射后48h的血糖測定數(shù)據(jù)顯示，大劑量組血糖升高，且明顯高于空白組。其中3只高于11.1mmol/l，為15.2 mmol/l、16.5mmol/l、12.0mmol/l，符合糖尿病模型造模成功的條件。小劑量組血糖仍低于對照組，且與12h差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表一 各組血糖值變化（X±S）

3 討論

3.1四氧嘧啶致血糖變化規(guī)律

根據(jù)以上初步研究可知，足夠劑量的四氧嘧啶在致血糖升高前會導(dǎo)致血糖降低。四氧嘧啶的急性中毒死亡均發(fā)生在血糖降低期間。該結(jié)論證實(shí)了，腹腔注射四氧嘧啶致糖尿病的造模中，以一定劑量的葡萄糖溶液灌胃可有效降低造模死亡率。該試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)低劑量的四氧嘧啶溶液能夠?qū)е滦∈蟪掷m(xù)性低血糖。

3.2四氧嘧啶的毒性機(jī)理

低劑量四氧嘧啶引起的血糖持續(xù)性降低。根據(jù)這一現(xiàn)象，對于四氧嘧啶的毒性機(jī)理有以下兩種猜測：1.四氧嘧啶不僅能對胰島B細(xì)胞產(chǎn)生損傷，作用初期也能激化胰島B細(xì)胞，使其功能亢進(jìn)，抑制血糖；2.四氧嘧啶并非特異性破壞胰島B細(xì)胞，也能對胰島A細(xì)胞或血液中的糖原產(chǎn)生破壞。關(guān)于以上猜測的相關(guān)研究尚屬空白，需待進(jìn)一步研究，來更深入的認(rèn)識四氧嘧啶的毒性機(jī)理及制作糖尿病動物模型注意事項(xiàng)。

[1]魏偉,吳希美,等.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社,2010.

[2]王鴻利.實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社,2010.

[3]樊志奇,楊勇,容蓉,蔣春紅,李家魁.四氧嘧啶制備糖尿病小鼠模型的影響因素研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,08:1948-1949.

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