劉傳斌

(云南省德宏州芒市動物疫病預(yù)防控制中心,芒市 678400)

金黃色葡萄球菌屬于葡萄球菌屬，是一種革蘭氏陽性菌，直徑0.5～1.5μm，菌落排列方式有單個、成對或呈葡萄串狀，是一種重要的人獸共患病原菌，能夠引起人和動物的多種疾病。金黃色葡萄球菌是一種條件性致病菌，其廣泛分布于自然界，在空氣、土壤和水中廣泛存在，在人體皮膚毛囊、皮脂腺管、鼻腔和腸道中也常有本菌存在。金黃色葡萄球菌為兼性的細(xì)胞內(nèi)病原體，可在吞噬細(xì)胞內(nèi)生存，在乳腺組織中可形成膿腫，最終導(dǎo)致纖維化[1]。

1 重要的毒力因子

1.1α 毒素

又名α 溶血素，是一種胞外毒素，為不耐熱的蛋白質(zhì)，是金黃色葡萄球菌主要毒力因子之一。α 溶血素蛋白分子量為34KD，不耐熱，65℃30min可將其破壞。溶血素可作用于平滑肌細(xì)胞，可致牛羊的壞疽性乳腺炎，其類毒素對金黃色葡萄球菌所致的綿羊和山羊乳腺炎有部分保護作用[2]。

1.2腸毒素

是由血漿凝固酶或耐熱核酸酶陽性菌株產(chǎn)生的一組結(jié)構(gòu)相似抗原性不同的可溶性蛋白質(zhì)，分子量約26～34kDa，抗酸耐熱，100℃30min或胃蛋白酶水解而不被破壞。到目前為止，根據(jù)抗原的差異性可分為A、B、C(Cl、C2、C3)、D、E、G、H、I、J、K、L、M、N和O等14種血清型[3]。細(xì)菌能產(chǎn)生一或兩個以上的類型，其中A、D型最為常見，B、C型次之，E型出現(xiàn)率最低，A型毒力最強，B型耐熱性最好。

1.3血漿凝固酶

凝固酶是金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的能使含有抗凝劑的家兔或人血漿凝固，有助于致病菌株抵御宿主體內(nèi)吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)的作用，多數(shù)菌株都能產(chǎn)生。多數(shù)金黃色葡萄球菌致病株能同時產(chǎn)生兩種蛋白質(zhì)，一種分泌至體外，稱為游離性凝固酶，類似凝血酶原的作用；另一種結(jié)合在菌體表面，稱為結(jié)合凝固酶或聚集因子，在菌株表面起纖維蛋白原特異受體作用，可使血漿纖維蛋白與菌體交鏈，引起菌體凝集[4]。

1.4耐熱核酸酶

金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的一種細(xì)胞外酶，由致病性菌株產(chǎn)生，100℃作用15min不失去活性。耐熱核酸酶是金黃色葡萄球菌所特有的，且不同菌株間有較高保守性，常作為金黃色葡萄球菌檢測的重要指標(biāo)之一。金黃色葡萄球菌感染部位的組織細(xì)胞和自細(xì)胞崩解時釋放出核酸，使?jié)B出液粘性增加，能加速核酸分解，有利于病原菌的擴散[5]。

2 耐藥性

目前，奶牛乳房炎的治療主要還是依賴抗生素，而抗生素的濫用造成乳房炎的治療效果不斷下降，乳汁中抗生素殘留日益嚴(yán)重，耐藥菌株不斷出現(xiàn)。隨著金黃色葡萄球菌耐藥性的增加，治療難度也越來越大，快速的診斷出金葡菌的耐藥類型，既可以避免了亂用藥的浪費，也減少了由于免疫選擇壓而造成的對此種藥物敏感性降低問題。

在臨床上用藥之前用紙片擴散法對金黃色葡萄球菌進行耐藥性鑒定，對提高用藥的準(zhǔn)確性十分重要，對當(dāng)前在治療金葡菌中的常用藥物如青霉素，氨芐青霉素，苯唑西林，頭孢噻肟鈉，氟苯尼考，萬古霉素，利福平，復(fù)方新諾明等測量其抑菌圈的大小，再根據(jù)抑菌圈的直徑進行比較，確定一下金葡菌對哪種藥物敏感。

3 診斷

急性乳腺炎癥狀明顯，根據(jù)乳汁和乳房的變化便可診斷。隱性乳腺炎無臨床癥狀，但可根據(jù)乳汁的體細(xì)胞數(shù)、pH值、導(dǎo)電率及炎癥因子等指標(biāo)的檢測作出初步診，但確證需進行實驗室檢驗。傳統(tǒng)的細(xì)菌分離鑒定，毒素檢測以及耐藥性測定費時費力，敏感性差，難以廣泛應(yīng)用。PCR技術(shù)具有高特異性、靈敏性及操作簡便等優(yōu)點，給金葡菌的檢測工作帶來極大便利。耐藥性相關(guān)基因、毒素基因、酶基因及多種特異性鑒別基因已成為國內(nèi)外許多研究人員研究熱點，建立了不同的PCR診斷方法，其中多重PCR和實時定量PCR檢測方法可以分析其耐藥性和毒素基因攜帶情況。

4 防治

金黃色葡萄球菌引起的奶牛乳腺炎是臨床上最頑固、危害最嚴(yán)重的疾病，由于金葡菌容易形成耐藥性，再加上金黃色葡萄球菌容易寄生在乳腺上皮細(xì)胞中引起持續(xù)性感染或嚴(yán)重的纖維性炎癥而使抗生素治療無效，因此對金葡菌引起的乳腺炎預(yù)防主要通過金黃色葡萄球菌菌苗或類毒素疫苗免疫。

4.1滅活苗

目前在預(yù)防金萄菌方面主要使用的是滅活苗，全菌滅活疫苗早在1902年最早使用，但免疫保護效果不理想。此后研究人員研制了由4種溶血型(a、a、a+B，不溶血)金黃色葡萄球菌全菌苗，能部分提高奶牛乳腺炎的自愈率，臨床發(fā)病率沒有減少。而且副作用較大、維持時間較短[6]。

4.2亞單位疫苗

金黃色葡萄球菌表面的莢膜多糖聚集在感染部位的中性粒細(xì)胞中，在清除細(xì)菌方面具有決定性的作用。能錨定宿主細(xì)胞壁的肽聚糖并使黃色葡萄球菌定植于宿主靶細(xì)胞外基質(zhì)的黏附素，被認(rèn)為是黃色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子。黃色葡萄球菌黏附素、莢膜多糖、酶和毒素作為影響黃色葡萄球菌致病性的主要因子，是目前疫苗研究的主要方向[7]。

4.3減毒活疫苗

與滅活苗相比，減毒苗在對試驗性乳腺炎的免疫，增強體外吞噬作用及由乳腺內(nèi)中性粒細(xì)胞對病原菌的殺滅方面效果均顯著，但有傳播病原的危險。Cristina等在化學(xué)條件突變后，構(gòu)建了一個突變株RC122，RC122突變菌株作為一個可以有潛力做奶牛群疫苗試驗的有意義的菌株[8]。

4.4DNA疫苗

DNA疫苗是近年來備受人們關(guān)注的一種新型疫苗。2002年Broui l let te等研制了針對金黃色葡萄球菌聚集因子的DNA疫苗免疫小鼠， Shkreta等2004年設(shè)計了同時針對聚集因子(CIfA)和纖連蛋白結(jié)合蛋白(Fnbp)二價DNA疫苗。目前國內(nèi)外還沒有一種核酸疫苗獲得批準(zhǔn)使用[9]。

5 小結(jié)

目前，各種乳制品成了人們的日常食物，由于乳腺炎抗生素濫用造成的危害日益嚴(yán)重，疫苗進行免疫預(yù)防應(yīng)是防治奶牛乳腺炎的一個發(fā)展方向，根據(jù)金黃色葡萄球菌毒力因子特點，制備出有效的疫苗，己成為治療金葡菌的關(guān)鍵。同時應(yīng)該加強日常環(huán)境的消毒衛(wèi)生、飼養(yǎng)管理工作，采取綜合防治措施才是控制奶牛乳腺炎的關(guān)鍵。

[1]王娟,黃秀梅,劉書科,等.牛奶中金黃色葡萄球菌的耐藥性及其腸毒素分型研究[J].中國獸醫(yī)雜志,2013,49(3):31-32.

[2]彭立荇，萬成松.葡萄球菌腸毒素的研究進展[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進展，2004，32(4)：67-69.

[3]王小紅，謝筆釣，史賢明.食品中金黃色葡萄球菌腸毒素檢測方法的研究進展[J].山西食品工業(yè)，2003，3：39-42.

[4]李毅.金黃色葡萄球菌及其腸毒素研究進展[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004，14(4)：392-395.

[5]楊天嬌，孫英峰，沈國順.小鼠模型在奶牛金黃色葡萄球菌乳房炎中的應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī)，2008，35(12)：116-118.

[6]劉春杰,楊麗華,張春,等.長春地區(qū)奶牛乳腺炎主要致病菌分離鑒定及藥敏試驗[J].南方農(nóng)業(yè),?2014，8(18)：155-156.

[7]劉麗娜，張潔，周靜，等.金黃色葡萄球菌疫苗候選分子StbA主要抗原表位區(qū)的表達(dá)及重組蛋白抗血清的制備[J].中國獸醫(yī)科學(xué)，2015，45(04)：375-379.

[8]姜延龍，張宇，田波等.PCR技術(shù)檢測金黃色葡萄球菌進展[J].食品科學(xué)2006，27(5)：265-269

[9]王禮偉,楊亞東,屈勇剛,等.新疆石河子地區(qū)奶牛乳房炎鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2014,35(2):124-127.