舒 展 呂春華 葉爾肯 安納斯 黃楊波

(新疆阿勒泰地區(qū)動物疾病控制與診斷中心，新疆 阿勒泰市836500)

牛結核病的主要臨床特征表現(xiàn)為病程緩慢、咳嗽以及漸進性消瘦，衰竭病理特征主要為多種組織器官形成結節(jié)狀、肉芽腫結核結節(jié)、干酪樣壞死和鈣化病灶等。牛結核病傳染性極強，一年四季皆可發(fā)病，同時會從奶制品等渠道傳染人與犢牛，危害性較大。要想從源頭上對牛結核病進行控制，就應當做好對其的臨床診斷，從而為控制該病提供強有力的技術支持[1]。為掌握牛結核病疫情的實際發(fā)病情況，筆者選擇膠體金試紙條檢測的手段，同時通過結核菌素皮下注射來實施對比試驗。

1 材料與實驗方法

1.1 材料

選取來源于本地區(qū)的某縣某鄉(xiāng)隨機采取的牛血清860頭份，另準備結核菌素、牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測試紙、20ul定量吸管或加樣槍、酒精紗布、注射器、塑料吸頭、卡尺、剪刀以及工作衣帽等。

1.2 實驗方法

1.2.1 牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測實驗方法

選取待檢測牛血清20-80μL，將其慢慢加入牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測試紙條樣品孔處，可發(fā)現(xiàn)在試紙條上出現(xiàn)紅色條帶移動。但如果若5分鐘仍未出現(xiàn)條帶移動，需再在樣品孔中滴入檢測血清1滴，十分鐘后再觀察，若超過半小時仍未出現(xiàn)結果則應舍棄改組實驗。若室內溫度低于18℃，則應相應延長觀察結果時間。

判斷標準：（1）陰性，指在檢測試紙條上只發(fā)現(xiàn)一條呈紫紅色的參考帶；（2）陽性，指在檢測試紙條上發(fā)現(xiàn)檢測帶、參考帶兩條呈紫紅色條帶；（3）無效，是指在檢測試紙條上未發(fā)現(xiàn)任何條帶。

1.2.2 結核菌素皮下實驗方法

先將牛進行編號，在選號牛頸部中上位置的1/3處，直徑為10cm范圍內的毛發(fā)全部剪掉作為手術部位，接著用卡尺測量該范圍中央皮皺的厚度，并記錄。然后用75%酒精或5%碘酒紗布對術部進行消毒，在皮下注射0.1mL結核菌素，注射過后可發(fā)現(xiàn)局部產生小泡。注射后3天、5天分別觀察注射部位是否出現(xiàn)腫脹、疼痛以及發(fā)炎等異常情況，然后再用卡尺測量腫脹面積大小以及中央皮皺厚度，記錄數(shù)據。觀察3天后，針對出現(xiàn)陰性或者可疑反應的牧牛，必須在之前注射位置處再注射同等計量的結核菌素。然后注射2天后進行觀察，具體觀察項目同前，做好相應數(shù)據記錄。

判斷標準：（1）陰性反應，即手術部位未出現(xiàn)炎性水中，皮差小于2mm，或是只出現(xiàn)硬結節(jié)的牛；（2）可疑反應，是指發(fā)生炎性水腫的面積小于3.5cm*4.5cm，同時皮差介于0.5cm-0.8cm之間，即表示可疑反應；（3）陽性反應，是指局部出現(xiàn)發(fā)熱、疼痛，發(fā)生彌漫性水腫，界限不明確、堅硬度如面團，水腫面積大于3.5cm*4.5cm。另外，若出現(xiàn)上訴反應，但癥狀較輕，并且皮差大于0.8cm，也稱為陽性反應。

2 實驗結果和分析

2.1 牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測結果

實驗結果未出現(xiàn)無效結果，陽性結果為在膠體金快速檢測試紙條上發(fā)現(xiàn)質控線及檢測線，陰性結果則只在膠體金檢測試紙條上出現(xiàn)質控線。

2.2 結核菌素皮下注射反應和牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測結果

在860頭牛血清樣本中，用牛結核MPB70/83抗體膠體金檢測試紙條檢測牛結核病，將結果與皮下注射結核菌素產生的反應結果做比較。實驗結果：皮下注射陽性反應為18頭，膠體金試紙條檢測陽性結果為16頭，兩組陽性結果符合率為89%（16/18）；陰性結果皮下注射為812頭，膠體金試紙條檢測陰性結果為838頭，兩組陰性結果符合率為97%（812/838。

2.3 實驗結果分析

針對結核菌素皮下注射反應以及膠體金試紙條檢測結果進行統(tǒng)計學分析，并利用X2進行檢驗，得出結論牛結核MPB70/83抗體膠體金試紙條檢測與結核菌素皮下注射檢測具有較高的符合率。

3 結果

牛結核病主要是牛分枝桿菌所導致的一種能夠人畜共患的傳染病，此病一直以來都在很大程度上威脅著人類與動物的生命健康，同時也給社會帶來了非常大的損失。近年來，國內牛結核疫情受到了越來越多的關注。由本文分析結果表明，牛結核MPB70/83抗體膠體金試紙檢測與結核菌素皮下注射檢測結果兩者之間差異較小，具有較高的符合率。并且，膠體金快速檢測試紙條在檢測過程中具有方便、快捷、敏感以及特異性的優(yōu)勢，因而十分適合用于對牛結核病的檢測和普查，同時還能夠為結核菌素皮下注射反應結果提供一定的輔助診斷，在針對牛結核病的普查及根除計劃中擁有遼闊的發(fā)展前景。

[1]莊金秋，梅建國，沈志強.膠體金免疫層析技術在獸醫(yī)臨床診斷中的應用進展[J].中國動物檢疫，2012，(09)：70-75.