于洋(高密市檢驗(yàn)檢測中心,山東 高密 261500)

盧靜(高密市市場監(jiān)督管理局,山東 高密 261500)

食品安全是關(guān)乎國民生計(jì)的大事。我國市場經(jīng)濟(jì)體制尚不健全，食品安全事故層出不窮，部分事件造成了極其惡劣的社會(huì)影響，應(yīng)嚴(yán)格落實(shí)食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫。添加劑是為保持或提高食品營養(yǎng)質(zhì)量，以及防腐和加工工藝需要而添加的配料物質(zhì)，包括營養(yǎng)強(qiáng)化劑、食品用香料、食品工業(yè)添加劑等[1]。食品添加劑添加有嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)限制，非法添加物不僅影響食品品質(zhì)，還可能埋下安全隱患，威脅消費(fèi)者生命健康。色譜檢驗(yàn)法是重要的食品添加劑檢測技術(shù)，具有分離效率高、快速、靈活等優(yōu)點(diǎn)，按照相的類型可分為離子色譜、液相色譜、氣相色譜等，三種方法各有優(yōu)劣。本次研究就離子色譜和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定食品中的添加劑效果進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

樣品原料主要包括新鮮面包、市場購買的散裝餅干、某品牌口香糖、碳酸飲料、固體飲料等20類樣品。標(biāo)準(zhǔn)品包括丙二醇、阿拉伯醇、甘露醇、山梨糖醇、乳糖醇、木糖醇6類標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98.9%），準(zhǔn)確配置100.0mg/L標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液，稀釋成質(zhì)量濃度為10.0mg/L、5.0mg/L、1.0mg/L、0.5mg/L、0.1mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。添加劑標(biāo)準(zhǔn)品包括日落黃、根皮紅、胭脂紅、亮藍(lán)、酸性紅13、檸檬黃等三十種食品添加劑，各取0.1g，以9：1水/甲醇溶液定容至100mL，配置單標(biāo)儲(chǔ)配液。化學(xué)試劑包括甲醇、甲酸、乙酸、甲酸胺等。儀器包括單道移液槍、電子天平、BD冷藏箱、立式透明冷藏箱、KO-1000超聲波清洗器、美A64R高速冷凍離心機(jī)、氮?dú)鉂饪s儀、戴安ICS-3000離子色譜儀等。

1.2 方法

1.2.1 處理樣品

將焙烤食物粘膜成粉末狀，取1.0樣品，加入50mL水，超聲提取30min，8000r/min轉(zhuǎn)速離心5min，取上清液以水稀釋20倍，以0.22μ尼龍膜過濾[2]?？谙闾?，粘膜至片狀，稱取1.0g，加水50mL超聲提取，30min后轉(zhuǎn)移至三角瓶，兩次提取，取水稀釋10倍，0.22μm尼龍膜過濾。軟飲料處理，先超聲脫氣，取樣品2mL以HLB凈化，凈化前調(diào)整pH至3.0-3.5。

1.2.2 色譜質(zhì)譜分析條件

1.2.2.1 六類糖醇離色譜分析：色譜柱，氨基酸分離柱，氨基酸保護(hù)柱，電化學(xué)檢測，18.0mM的氫氧化鈉溶液淋洗，流速0.9mL/min，進(jìn)樣體積25μL，柱溫30℃。

1.2.2.2 食品添加劑高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析：色譜柱:AgilentZORBAXEclipsePlusC18，（3.5 μm，2.1×150mm)，柱溫35℃，進(jìn)樣量5μL，流量0.3mL/min。

1.2.2.3 定性定量分析

色譜定性分析：確定未知色譜峰，依據(jù)已知的保留值進(jìn)行對比，通過定向、改變?nèi)萘恳蜃覭進(jìn)行比較，離線結(jié)構(gòu)分析，若色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品一致，且峰面積有一定加標(biāo)比例關(guān)系，則可判斷存在這種化學(xué)品。質(zhì)譜分析：未知樣品若色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，去除背景，所選擇離子均出現(xiàn)，且離子豐度與標(biāo)準(zhǔn)品相一致，則認(rèn)為樣品中存在這種物質(zhì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 離子色譜法測定六種糖醇的結(jié)果與分析

優(yōu)化色譜闡述，通過梯度調(diào)節(jié)氫氧化鈉淋洗液濃度，以儀器響應(yīng)值判斷靈敏度，獲得最佳的分離變差，最終以18.0mM NaOG作為淋洗液，分離六種糖醇，每次進(jìn)樣前，均進(jìn)行沖洗再生，將氫氧化鈉平衡至最佳濃度。結(jié)果顯示最佳離子色譜法條件為，18.0mM 氫氧化鈉，流速 0.9mL/min，體積 25μL，柱溫30℃。以濃度x為橫坐標(biāo)，峰面積y為縱坐標(biāo)，則6類糖醇化合物線性范圍為0.1-10mg/kg，檢出限0.0020-0.0069。丙二醇y=2.513x＋1.030，木糖醇y=2.572x＋0.404，阿拉伯醇y=3.631x＋0.488，山梨糖醇y=2.394x＋7.706，甘露醇y=3.398x＋0.357，乳糖醇y=3.049x＋0.0114，收率在93.2%-102.8%之間，準(zhǔn)確性較好，可進(jìn)行樣品定性、定量分析。實(shí)際測定結(jié)果顯示，口香糖中木糖醇含量30.95-60.4mg/Kg，檢測器主要成分為木糖醇、山梨糖醇、甘露醇，其余未檢出。

2.2 高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定食品添加劑

色譜柱優(yōu)化：同時(shí)分離30種添加劑標(biāo)準(zhǔn)品，考察5種規(guī)格色譜柱，結(jié)果顯示UltimateXB-C18色譜柱分離效果相對較好（對防腐劑、甜味劑分離較長），ZORBAXEclipsePlusC18色譜柱分離效果較好，分離時(shí)間18min。流動(dòng)相優(yōu)化：分別考察乙腈-水、甲醇-水、甲醇-乙腈-水等八種體系，結(jié)果以甲醇-乙腈-20mM乙酸銨水溶液體系對絕大多數(shù)添加劑有更高的相應(yīng)。此后優(yōu)化SPE條件，以LC-MS/MS色譜質(zhì)譜條件，研究目標(biāo)物線性范圍。以峰面積為應(yīng)變量，質(zhì)量濃度為自變量，檢出限在0.01-20μg/kg，該方法檢出下限均在衛(wèi)生部食品添加劑標(biāo)準(zhǔn)最低限以下?；厥章?8.3-108.2%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差2.3%-10.2%，精密度較好。

[1]李宏梁，儲(chǔ)曉剛，黃峻榕.食品添加劑安全與應(yīng)用[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2011:356-359.

[2]陳琦，凌云，儲(chǔ)曉剛等.吳永寧攪拌棒吸附萃取結(jié)合氣相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時(shí)測定飲料和果醬中的7種防腐劑[J].分析化學(xué)，2010，38(8):1156-1160.