李守勉　李明　田景花　王勝男　馮自洋

摘要：對莜麥秸栽培雙孢菇適宜品種進(jìn)行篩選，得出AS2796為最適品種，并對AS2796的最適母種、原種培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，AS2796適宜母種培養(yǎng)基為100 g發(fā)酵棉籽皮，50 g牛糞，20 g葡萄糖，20 g瓊脂，3 g KH2PO4，15 g MgSO4，20 mg 維生素B1，5 g蛋白胨，1 000 mL水；AS2796適宜原種培養(yǎng)基為配方A1和配方C1，配方A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4，配方C1：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4。其中配方A1的菌絲生長速度最快，菌絲長勢較好；配方C1的菌絲長勢最好，生長速度中等，生產(chǎn)中可以根據(jù)實際需要進(jìn)行選擇。

關(guān)鍵詞：莜麥秸稈；雙孢菇；品種；母種；原種；培養(yǎng)基；篩選

中圖分類號： S646.104 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0252-02

雙孢菇（Agaricus bisporus）味道鮮美、營養(yǎng)豐富，是世界第一大宗食用菌。雙孢菇屬中低溫性草腐菌，發(fā)菌溫度22～25 ℃，出菇溫度14～18 ℃[1]，一般于秋冬至早春栽培，是我國的主栽食用菌種類之一。壩上地區(qū)夏季溫度較低，適宜進(jìn)行雙孢菇的錯季栽培。莜麥為壩上地區(qū)的主要糧食作物[2]，利用莜麥秸稈栽培雙孢菇，不僅可使壩上資源莜麥秸稈、牛糞變廢為寶，同時又可為食用菌生產(chǎn)提供充足的原料。由于莜麥秸稈新開發(fā)雙孢菇栽培原料的配套技術(shù)還不完善，有關(guān)莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種篩選的研究未見報道。因此，本試驗開展莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種篩選的研究，以促進(jìn)壩上地區(qū)雙孢菇產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，彌補(bǔ)夏季雙孢菇市場的空缺，提高菇農(nóng)效益。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

雙孢菇品種W2000、W192、AS2796、5113，均由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院食用菌實驗室保藏。

1.2 供試培養(yǎng)基

1.2.1 供試母種培養(yǎng)基

A：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；B：麥粒200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；C：谷粒200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；D：高粱粒20 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然；E：玉米粉40 g，葡萄糖 20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨 5 g，水1 000 mL，pH值自然；F：棉籽皮100 g，發(fā)酵牛糞50 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL，pH值自然。

1.2.2 供試原種培養(yǎng)基[3-4]

CK：99%麥粒、1%石膏，另加0.1%KH2PO4、0.05% MgSO4；A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；A2：84.15%小麥粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；B1：84.15%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加01% KH2PO4、0.05% MgSO4；B2：84.15%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：1683%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C2：16.83%谷粒、67.32%高粱粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D1：58.91%玉米芯、25.25%谷粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；D2：58.91%玉米芯、2525%谷粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、005% MgSO4；E1：58.91%玉米芯、25.25%麥粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；E2：58.91%玉米芯、25.25%麥粒、14.85%草炭、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。

1.2.3 莜麥秸栽培雙孢菇培養(yǎng)料配方[5]

莜麥秸栽培料的適宜配方（按照100 m2計算）：莜麥秸1 500 kg，干牛糞1 125 kg，尿素15 kg，過磷酸鈣50 kg，石膏25 kg，石灰25 kg。

1.3 試驗方法

1.3.1 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種篩選

菌種的制備、培養(yǎng)料的堆置發(fā)酵、上料播種以及出菇期的管理等均采用常規(guī)方法。選取W2000、W192、閩4號、5113等4個雙孢菇品種進(jìn)行品比試驗，每個品種設(shè)3個重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列。每個小區(qū)10 m2，共12個小區(qū)，分別位于床架的2～4層（自下而上）。觀察記錄各處理發(fā)菌時間及菌絲長勢，記錄前3潮菇的產(chǎn)量、轉(zhuǎn)潮時間及第1潮菇菇峰期，每個小區(qū)隨機(jī)選取30個子實體，并測量單菇質(zhì)量、菌蓋直徑、菌蓋厚度及菌柄長度。

1.3.2 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種母種培養(yǎng)基配方篩選試驗[6]

按“1.2.1”節(jié)中母種培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基，裝入培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿內(nèi)注入30 mL培養(yǎng)基，121 ℃高壓滅菌 40 min。待培養(yǎng)基冷卻后，將活化后的供試菌株母種接種于直徑為9 cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行比較培養(yǎng)。每個處理接種5個培養(yǎng)皿，取直徑3 mm、厚0.4 mm的菌絲圓片接于培養(yǎng)皿中央，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)有1個處理菌絲長滿培養(yǎng)皿時，結(jié)束培養(yǎng)，記錄菌絲生長時間，測量菌落半徑，計算菌絲生長速度，觀察菌絲形態(tài)及其長勢，結(jié)果作方差分析，進(jìn)行顯著性測驗。

菌絲生長速度（mm/d）=菌落半徑（mm）/發(fā)菌時間（d）。

1.3.3 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種原種培養(yǎng)基配方篩選試驗[7]

按“1.2.2”節(jié)中原種培養(yǎng)基配方配制原種培養(yǎng)基，先將麥粒、谷粒、高粱粒浸泡48 h，玉米芯浸泡24 h，然后用沸水煮至無白心，加入牛糞或者草炭，并拌入石膏和藥品。裝入40 mm×200 mm的大試管內(nèi)，高度為試管的3/4，各處理裝料高度保持一致，放入高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌（126～128 ℃，100 min）。每個處理設(shè)5個重復(fù)，接種后放入25 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，觀察記錄菌絲的生長速度并觀察菌絲顏色及生長勢。

菌絲生長速度（mm/d）=培養(yǎng)料的高度（mm）/發(fā)菌時間（d）。

2 結(jié)果與分析

2.1 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種篩選

2.1.1 不同品種菌絲生長情況及產(chǎn)量比較

由表1可見，W192、AS2796的菌絲長勢好于W2000、5113；AS2796、5113發(fā)菌至出菇所需時間最短，均為83 d，比W2000、W192分別短10 、11 d；從產(chǎn)量來看，W192、AS2796的平均單產(chǎn)顯著高于W2000、5113，其中W192產(chǎn)量最高，但W192與AS2796之間差異不顯著。

2.1.2 不同品種農(nóng)藝性狀比較

由表2可知，W192的單菇質(zhì)量顯著大于W2000、5113，AS2796的單菇質(zhì)量與其他3個品種差異均不顯著；W192的菌蓋直徑顯著大于W2000、5113，與AS2796差異不顯著；從菌蓋厚度來看，W192的菌蓋厚度顯著大于W2000，與AS2796、5113差異不顯著；從菌柄直徑來看，5113菌柄直徑顯著大于其他3個品種，AS2796的菌柄直徑最小，且顯著小于其他3個品種，W2000、W192的菌柄直徑大小居中，且二者之間無顯著差異；從菌柄長度來看，W192的菌柄長度顯著大于AS2796，與W2000、5113差異不明顯。AS2796子實體最硬，W192子實體較硬，W2000、5113子實體硬度一般。

總體來看，AS2796平均單產(chǎn)較高，生產(chǎn)周期最短，子實體最硬，子實體菌柄較短，菌蓋直徑較大，菌蓋厚度一般。因此，AS2796為莜麥秸栽培雙孢菇的最適品種。

2.2 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種母種培養(yǎng)基配方篩選試驗

由表3可知，雙孢菇AS2796在配方A和配方F上的菌絲長速顯著快于其他配方，其中配方F最快，配方A菌絲長速較快；其次是配方C菌絲長速較快；配方B、配方D菌絲長速顯著慢于其他配方，配方D最慢。配方C、配方F菌絲長勢最好，表現(xiàn)為菌絲潔白濃密；配方A、配方E菌絲長勢中等；配方B、配方D菌絲長勢較差，表現(xiàn)為菌絲灰白稀疏?？傮w來看，雙孢菇AS2796菌絲在配方F的菌絲長速最快且菌絲長勢最好。因此，配方F為雙孢菇最適母種培養(yǎng)基。

2.3 莜麥秸栽培雙孢菇最適品種原種培養(yǎng)基配方篩選試驗

對不同原種培養(yǎng)基配方上雙孢菇AS2796的菌絲生長情況的分析結(jié)果見表4。從菌絲長勢來看，在主料中加入牛糞的培養(yǎng)基配方要優(yōu)于加入草炭的配方。配方C1的菌絲長勢最好，菌絲濃密潔白、邊緣整齊，配方E2的菌絲長勢最弱。從菌絲長速來看，在主料中加入牛糞的培養(yǎng)基菌絲長速顯著快于加草炭的培養(yǎng)基。其中，配方A1、配方 A2的菌絲長速最快，且顯著快于其他配方，但A1的菌絲長勢好于A2?？傮w來看，配方A1菌絲長速最快，菌絲長勢較好；配方C1菌絲長勢最好，菌絲長速中等，因此配方A1、配方C1均為較好的雙孢菇原種培養(yǎng)基，生產(chǎn)中可以根據(jù)實際需要進(jìn)行選擇。

3 結(jié)論與討論

通過莜麥秸栽培雙孢菇適宜品種篩選，4個雙孢菇品種W192、W2000、AS2796、5113中，W192表現(xiàn)為發(fā)菌快、平均單產(chǎn)高（前3潮菇平均單產(chǎn)為7.5 kg/m2）、子實體農(nóng)藝性狀表現(xiàn)好，但生育周期長；AS2796平均單產(chǎn)較高，生產(chǎn)周期短，子實體最硬，子實體農(nóng)藝性狀表現(xiàn)好。AS2796、W192均為莜麥秸稈栽培雙孢菇適宜品種，但考慮壩上地區(qū)雙孢菇以錯季栽培、鮮銷為主，子實體硬、不易開傘的品種較受歡迎，且商品價格高，而且壩上地區(qū)受氣候條件影響，雙孢菇出菇上市期短，生產(chǎn)周期為篩選品種又一個重要條件。總體來看，AS2796為壩上地區(qū)利用莜麥秸稈栽培雙孢菇的最適品種。

通過對6種雙孢菇母種培養(yǎng)基的篩選，確定適宜母種培養(yǎng)基配方為發(fā)酵棉籽皮100 g，牛糞50 g，葡萄糖20 g，瓊脂 20 g，KH2PO4 3 g，MgSO4 1.5 g，維生素B1 20 mg，蛋白胨5 g，水1 000 mL。菌絲在該培養(yǎng)基配方上表現(xiàn)為菌絲長速最快，為2.90 mm/d，且菌絲長勢最好，表現(xiàn)為氣生菌絲多且顏色潔白，菌落邊緣整齊。

通過對11個原種培養(yǎng)基的篩選，確定了A1、C1 2個適宜的雙孢菇原種培養(yǎng)基配方，A1：84.15%麥粒、14.85%牛糞，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4；C1：16.83%谷粒、6732%高粱粒、14.85%牛糞、1%石膏，另加0.1% KH2PO4、0.05% MgSO4。其中，配方A1的菌絲生長速度最快，為5.37 mm/d，菌絲長勢較好；配方C1的菌絲長勢最好，生長速度中等，為4.10 mm/d。

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