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發(fā)熱模型的研究進(jìn)展

2015-08-20 13:02李欣芮宋惠欣
云南中醫(yī)中藥雜志 2015年4期
關(guān)鍵詞:發(fā)熱動物模型

李欣芮 宋惠欣

關(guān)鍵詞:發(fā)熱;動物模型;綜述中圖分類號:R254

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1007-2349(2015)04-0077-03發(fā)熱大多是由于致熱岡子作用于機(jī)體,使得內(nèi)熱原得以產(chǎn)生并釋放,使體溫在一定程度上升高。近年來,建立動物的發(fā)熱模型為解熱藥物的研究提供了非常重要的根據(jù)。到目前為止,常用的致熱原有:LPS,2,4-二硝基酚,干酵母等。近年來有關(guān)學(xué)者又研究出了腦膜炎奈瑟菌致發(fā)熱模型和新西蘭兔金黃色葡萄球菌感染性發(fā)熱模型。本文將從化學(xué)藥品造模法、生物制劑造模法和其它造模法三方面對前人研究的發(fā)熱模型綜述如下。1 化學(xué)藥品造模法1.1 2,4-二硝基酚(DNP)導(dǎo)致的發(fā)熱模型 DNP可以刺激細(xì)胞氧化過程,使氧化的過程受到刺激所增加的能量不能夠通過磷酰化轉(zhuǎn)變成ATP或磷酸肌酸,而以熱能散發(fā),從而引起發(fā)熱I。陳敬然等[2]以160 mg/kg的劑量給大鼠ihDNP溶液,若大鼠溫度升高0.6℃以上,則說明造模成功。張發(fā)艷等[3]在大鼠背部 ih DNP生理鹽水混合溶液制造實(shí)熱證大鼠發(fā)熱模型、、劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 2,4--二硝基苯酚(12.5mg/kg)以復(fù)制大鼠發(fā)熱模型。1.2角叉菜膠(卡拉膠)導(dǎo)致的發(fā)熱模型較大劑量的ih角義菜膠會引起一個持續(xù)的炎癥反應(yīng),激活巨噬細(xì)胞,從而引起發(fā)熱。王之梅等[5]用1%的卡拉膠混懸液0.1 mL給ih大鼠,制造出了發(fā)熱模型。劉亞歐等[4]于大鼠頸背部ih 20%干酵世混懸液( 10mL/kg)以復(fù)制大鼠發(fā)熱模型。1.3

甲狀腺片導(dǎo)致的發(fā)熱模型 甲狀腺激素是甲狀腺片的主要成分,甲狀腺激素增多,會使代謝增強(qiáng),產(chǎn)熱量增加,從而造成發(fā)熱。黃麗萍等611以0.6g/kg劑量的甲狀腺片,連續(xù)灌胃30 d制造出了動物發(fā)熱模型。廖梅香等[7]將甲狀腺片以0.5%的羧甲基纖維素鈉配制成所需濃度的混懸液,劑量為50mg/kg每日,連續(xù)給藥7d后,得到了需要的發(fā)熱動物模型。2 生物制劑造模法西醫(yī)學(xué)認(rèn)為,發(fā)熱是某些致熱原侵入機(jī)體,溫度感受器接受體內(nèi)、外環(huán)境溫度的閩值上移,從而引起了產(chǎn)熱增加的同時散熱減少,導(dǎo)致發(fā)熱。因此,一些可以造成上述現(xiàn)象的生物制劑就可以用來制作動物發(fā)熱模型,發(fā)熱機(jī)理較清楚,成功率相對較高。2.1脂多糖(lipopolysaccharide.LPS)導(dǎo)致的發(fā)熱模型到目前為止,脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)動物發(fā)熱模型是實(shí)驗(yàn)研究里最為常用的動物發(fā)熱模型。LPS為c-菌細(xì)胞壁的主要成分,內(nèi)毒素作用于巨噬細(xì)胞等,使之產(chǎn)生IL一l、IL-6和TNF -α,這些具有內(nèi)源性致熱原效應(yīng)的細(xì)胞因子作用于下匠腦體溫調(diào)節(jié)中樞,引起機(jī)體發(fā)熱。張福利等[8]研究LPS導(dǎo)致發(fā)熱模型的劑量從10~250Lg/kg不等,發(fā)現(xiàn)20μg/kg的劑量為引起大鼠發(fā)熱的最佳劑量。江啟煜等[9]分別以15μg/kg和75μg/kg劑量給SD大鼠ip濃度為25pg/mL的內(nèi)毒素生理鹽水溶液制作發(fā)熱模型。金龍等[10]將家兔灌胃給藥(或靜脈注射),l天1次,連續(xù)3天,末次給藥后th,將家兔iv人腸桿菌內(nèi)毒素250n~(mL·kg)建立發(fā)熱模型,陳婷等[11]將家兔經(jīng)耳緣ivLPSl.5μg/Kg(攻毒)建立發(fā)熱模型。2.2疫苗引起發(fā)熱模型疫苗是減毒或滅活的細(xì)菌或病毒,當(dāng)它進(jìn)入動物體內(nèi)時會攻擊免疫系統(tǒng),迫使免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體,從而能夠預(yù)防相應(yīng)的細(xì)菌或病毒再次侵入動物體時造成的損害。因此,接種疫苗后,動物體的免疫系統(tǒng)被攻擊.就會出現(xiàn)暫時的發(fā)熱等不適現(xiàn)象。張恩戶等[12]取健康的新西蘭兔,iv劑量為0.5mL/kg傷寒、副傷寒三聯(lián)疫苗制作兔發(fā)熱模型。胡春萍等[13]將家兔經(jīng)iv過期三聯(lián)疫苗-NS.稀釋液,造成發(fā)熱模型。趙嬌等[14]按0.5~2.0mL/kg給家兔靜注,注入l-2h后,可見直腸溫度上升1.0~1.5℃,持續(xù)3~4h。2.3細(xì)菌引起的發(fā)熱模型①巴氏桿菌馬健等[15]控制實(shí)驗(yàn)室溫度為20qC左右,局部消毒兔頭枕部后用預(yù)冷的1 mL注射器連接5號針頭經(jīng)小腦延髓池穿刺抽取腦脊液0.4mL,48h后,按1 mL多殺性巴氏桿菌菌液(含3千個活菌)/kg進(jìn)行頸根部皮下注射來制作家兔發(fā)熱模型。②肺炎球菌周育平等[16]將實(shí)驗(yàn)家兔將肺炎球菌菌液以1.5mL/Kg的劑量經(jīng)家兔耳緣靜脈注入,制作家兔發(fā)熱模型。③腦膜炎奈瑟菌加曼·沙俄等[17]采用小腦延髓池法固定家兔,模型組家兔每只經(jīng)小腦延髓池注射3×l08 cfu/mL的腦膜炎奈瑟菌溶液,注射完畢開始測體溫、觀察家兔癥候表現(xiàn),此期間家兔處于自南飲水、進(jìn)食狀態(tài)。④金黃色葡萄球菌李妤蓉等[18]將凝固酶陽性金黃色葡萄球菌經(jīng)增菌、鑒定、再增菌等程序,最后獲得血清肉湯菌液。實(shí)驗(yàn)前將實(shí)驗(yàn)兔背部皮內(nèi)注射6×107個金黃色葡萄球菌活菌液。⑤注射腐敗干草浸劑趙嬌等[14]將干草浸入適量水中,放在見陽處3—4周,將腐敗浸液過濾煮沸,蒸發(fā),得到濾液。給家兔靜注,可在1h內(nèi)引起發(fā)熱,持續(xù)8~10 h。⑥大腸埃希菌菌液趙嬌等[14]用生理鹽水配制成0.5 mL溶液中含l06~ 107個細(xì)菌濃度的大腸埃希菌菌液,通過給大鼠靜脈注射的方法制造發(fā)熱模型。2.4干酵母導(dǎo)致的發(fā)熱模型用酵母混懸液ih大鼠(或家兔),先引起動物體溫下降。一段時間后動物體溫明顯升高,并持續(xù)較長時間,局部有明顯炎癥反應(yīng),與臨床伴內(nèi)臟或皮膚有明顯急性炎癥的里熱證類似,故可用此作為發(fā)熱動物模型以研究藥物的解熱效果。賈德武等[19]將大白鼠從背部ihl0%的鮮啤酒酵母混懸液3 mL/kg制成發(fā)熱模型。趙嬌等[14]用0. 5%羧甲基纖維素鈉分別制成10、5、1、0.2%啤酒酵母混懸液,給大鼠按10 mL/kg的劑量背部皮下注射。6h后體溫升高1.2~2.2℃。2.5病毒病毒致熱成分是病毒體和其所含的血細(xì)胞凝集素。黃厚才[23]將日本大耳白兔接種仙臺病毒后體溫漸生,至8h(注射N.S6h),體溫高達(dá)(40.79±0.40)℃,與造模前比較,體溫有非常顯著差異。(P<0.01)。蔡定芳等[24]將西德純種成年白毛兔ipl50兔出血熱病毒(RHFV)1mL制作兔發(fā)熱模型。3其它造模法除上述造模方法外,還有物理造模法、中藥造模法、食品提取物造模法等。3.1 物理造模法楊志仙等[22]直接利用熱水浴使大鼠高熱驚厥,隔日誘導(dǎo)驚厥1次,共誘導(dǎo)10次。魏偉等[23]直接刺激下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞,從而引起體溫升高。3.2中藥造模法 賀庭楨等[24]將附子、干姜、肉桂按1:1:1的比例或者將附子、干姜按1:1比例配成中藥處方制成l00%水煎劑給大鼠灌服復(fù)制大鼠熱證模型。3.3牛奶、脫脂牛奶導(dǎo)致的發(fā)熱模型 陳洪等[25]把實(shí)驗(yàn)豬分為不同劑量試驗(yàn)組、不同品種試驗(yàn)組以及不同日齡和不同體重試驗(yàn)組,攻毒劑量分別為:低劑量組每1kg體重注射lmL,中劑量組每1kg體重注射2mL,高劑量組每1kg體重注射3mL。試驗(yàn)豬均經(jīng)下腹部ih脫脂消毒牛奶,使豬體溫升高。3.4蛋白胨導(dǎo)致的發(fā)熱模型劉永錄等[26]通過兔iml0%蛋白胨制作家兔發(fā)熱模型。3.5其它發(fā)熱模型筆者查閱相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),相關(guān)研究人員用寒、熱交替法復(fù)制出了大、小鼠發(fā)熱模型。4結(jié)語到目前為止,大多數(shù)醫(yī)療用發(fā)熱模型以化學(xué)或生物致熱原為致病因子,向動物體內(nèi)注入脂多糖( LPS)、干酵母、2,4-二硝基酚等制作發(fā)熱模型。上述模型是適應(yīng)西醫(yī)學(xué)角度的研究方法和應(yīng)用單純西藥的藥物試驗(yàn),具有方便.耗費(fèi)時間短、成功率高、對實(shí)驗(yàn)條件要求也比較低等優(yōu)點(diǎn)。雖然上述經(jīng)典發(fā)熱模型與中醫(yī)外感傷寒發(fā)熱病癥有一定程度的契合,但無法完全模擬中醫(yī)理論中感受外邪的模型,所以真正符合中醫(yī)理論的傷寒發(fā)熱模型少之又少,隨著中醫(yī)藥發(fā)展的科學(xué)化,構(gòu)建符合中醫(yī)理論的傷寒發(fā)熱模型迫在眉睫。在今后的實(shí)驗(yàn)過程中,尋找和中醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論相結(jié)合,符合中醫(yī)熱證的辯證特點(diǎn)的發(fā)熱模型是總體趨勢。可以多考慮物理法構(gòu)建發(fā)熱模型,這種方法構(gòu)建的發(fā)熱模型將會具有較強(qiáng)的實(shí)用性、適用性和可行性,同時具有深遠(yuǎn)的社會效益和潛在的經(jīng)濟(jì)價值。參考文獻(xiàn):[1]唐曉峰,薛漫清,王暉,大鼠發(fā)熱機(jī)制的研究進(jìn)展[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報,2009,03:327-331.[2]陳敬然,孫紅梅,尹曉飛,等.牛黃解毒滴丸解熱鎮(zhèn)痛和抗炎作用實(shí)驗(yàn)J.中國藥師2010 13 9 1257-1259[3]張發(fā)艷.大黃、黃連及其提取物對實(shí)熱證模型大鼠肝基岡表達(dá)譜的影響[D].山東中醫(yī)藥大學(xué),2012.[4]劉亞歐,黃利,李利民芩術(shù)顆粒對發(fā)熱和疼痛模型鼠的解熱鎮(zhèn)痛作用[J].中國藥房,2014,23:2134-2136.[5]王之梅,萬鵬,黃崇剛,等.止嗽退熱合劑主要藥理作用研究[J].中國中醫(yī)急癥,2011,20(7):1099-1100.[6]黃麗萍,彭淑紅,蒙曉芳,胡強(qiáng),陳凱峰,余日躍,劉紅寧,孫建寧熱證大鼠脂肪代謝及解耦聯(lián)蛋白1 mRNA表達(dá)的相關(guān)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,03:541-543.[7]廖梅香,李銀保,朱衛(wèi)豐,等熱證大鼠模型肝臟組織中腺苷酸含量的測定[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,04:954-955.[8]張福利,許宏連,馬艷春,等脂多糖對寒體、熱體、常體大鼠攻毒發(fā)熱后體溫曲線、一氧化氮的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2007,35(1):17-19.[9]江啟煜,黃文恒,柴銀口服液對大鼠內(nèi)毒素誘導(dǎo)發(fā)熱模型的 影響[J].貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2010,03:71-73.[10]金龍,李軍梅,洪曉華,等.中藥方劑對實(shí)驗(yàn)性發(fā)熱模型動物體溫的影響[J]中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2004,Sl:236-239[11]陳婷,任秋生,楊愛東,等、山藥替代白虎湯中粳米干預(yù)發(fā)熱模型的比較研究[J].中國醫(yī)學(xué)工程,2014,08:158 +160.[12]張恩戶,趙勤,侯建平,等.補(bǔ)中益氣湯對家兔脾虛發(fā)熱模型體溫、腦脊液PCE_2和PO/AH區(qū)組織cAMP含量的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2003,09:1529 - 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