梁志生， 楊時昕， 張華彬， 王欽立

論 著

Nanofat在面部非結(jié)構(gòu)性移植中的臨床觀察

梁志生， 楊時昕， 張華彬， 王欽立

目的 評價納米脂肪移植(Nanofat Grafting)在面部非結(jié)構(gòu)性移植中的臨床效果。方法 自2014年9～12月，對10例自愿行脂肪移植治療的女性患者(面頰部皮膚老化1例，眼周皮膚老化5例，額部皮膚老化2例，瘢痕2例)，常規(guī)行吸脂術(shù)獲取脂肪；經(jīng)離心、機(jī)械乳化過濾后留取濾過脂肪乳化液，采用27號針頭行真皮深層注射，直到皮膚顏色發(fā)生黃染變化為止；注射后，按療程定期隨訪、拍照及接受后續(xù)治療。結(jié)果 本組患者中，有效9例，其中皮膚老化明顯改善7例；無效1例。無嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生，隨訪期內(nèi)效果穩(wěn)定7例，再手術(shù)3例。結(jié)論 納米脂肪移植有助于面部皮膚年輕化。

納米脂肪； 非結(jié)構(gòu)性移植； 皮膚年輕化

傳統(tǒng)脂肪移植的目的，多用于改善因疾病、外傷或老化引起的軟組織損傷后的結(jié)構(gòu)改變[1-2]，常采用直徑為2 mm針頭注射。然而，對于皮膚較薄或敏感部位，如眼瞼、嘴唇、手部等的脂肪移植，選擇直徑為0.7 mm吸脂針更為適合；其顆粒脂肪移植于真皮深層注射治療時，容易出現(xiàn)凸凹不平、脂肪囊腫樣變、脂肪顆粒中心壞死及鈣化結(jié)節(jié)等并發(fā)癥[3]。2013年，比利時醫(yī)師Tonnard 等[4]提出了納米脂肪(Nanofat)的概念，指將吸脂收集的脂肪顆粒進(jìn)行機(jī)械乳化、細(xì)胞篩過濾后得到的一種懸浮液；并研究了Nanofat的成分及生長特性，發(fā)現(xiàn)在Nanofat中，雖然未觀察到活的脂肪細(xì)胞，但Nanofat樣本經(jīng)體外培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)有大量脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖，與常規(guī)酶消化法處理后得到的脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞相似；同時還發(fā)現(xiàn)，Nanofat移植術(shù)后6個月，皮膚質(zhì)地有明顯改善，且未發(fā)現(xiàn)有任何不良反應(yīng)。自2014年9～12月，我們采用Nanofat移植后，觀察了10例非結(jié)構(gòu)性移植治療的患者，效果滿意?，F(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 病例納入與排除 自愿改善眼周細(xì)紋、額部細(xì)紋、面部細(xì)紋及鼻顴溝色衰沉著癥患者10例，均為女性；年齡23～35歲。入組后簽署知情同意書，排除不能按要求定期來院復(fù)診及再次治療的患者。

1.2 Nanofat制備方法 從患者大腿內(nèi)、外側(cè)或下腹部，用特制吸脂針(圖1)進(jìn)行吸脂術(shù)，術(shù)前小劑量低濃度(0.05%利多卡因+1∶100萬腎上腺素)行局部腫脹麻醉；將抽吸的脂肪收集后，用生理鹽水漂洗，以1000 r/min離心3 min[5-6]，再用自制設(shè)備(圖2)機(jī)械乳化處理；乳化后，將混懸液用0.5 mm孔徑的濾網(wǎng)過濾(圖3)，留下的脂肪濾過液為Nanofat。

1.3 注射方法 將提取的Nanofat，用27號針頭進(jìn)行真皮深層注射，直到皮膚顏色發(fā)生黃染變化為止。這種變色，通常會在注射后數(shù)小時消失。具體治療過程見圖4。

2 結(jié)果

本組共10例患者。其中，眼周皮膚老化5例(眉間川字紋1例、下瞼皺紋1例、眼周色素沉著癥2例、魚尾紋1例)、額部皮膚老化2例，面頰部皮膚老化1例，瘢痕治療2例。10例患者均接受機(jī)械乳化脂肪移植注射，臨床效果隨著時間推移而逐漸明顯，最佳效果于術(shù)后2～6個月(圖5～8)。臨床觀察未出現(xiàn)感染、脂肪囊腫及肉芽腫等并發(fā)癥，偶爾可見注射部位持續(xù)1.5～2.0 d的紅斑期。

3 討論

2014年，F(xiàn)riji[7]對Nanofat名稱的準(zhǔn)確性提出了質(zhì)疑，并分析了Tonnard 等[4]用內(nèi)徑2.0 mm、側(cè)孔直徑1.0 mm的多孔刨狀吸脂針吸脂；脂肪乳化后，以500 μm孔徑過濾后收集“Nanofat”。目前，納米技術(shù)已應(yīng)用于各種科學(xué)領(lǐng)域，但對納米級的定義有許多不同觀點(diǎn)。美國政府規(guī)定，納米為1～100 nm[8]，因此，“Nanofat”容易與納米技術(shù)混淆。

在眼周、口周、手部等非脂肪結(jié)構(gòu)性移植區(qū)域，用未處理的脂肪顆粒時，要用直徑>1.0 mm或更大的移植針進(jìn)行治療。由于大顆粒脂肪不易通過口經(jīng)小的移植針，因此，強(qiáng)行高壓通過，會對脂肪細(xì)胞造成不可逆損傷，還可能導(dǎo)致移植區(qū)的脂肪呈不規(guī)則的堆積，而堆積的脂肪組織易發(fā)生中心性壞死，從而影響移植成活率及增加術(shù)后并發(fā)癥[9]。因Nanofat中，脂肪細(xì)胞破壞消失，用于容積改善的作用有限。但臨床中觀察發(fā)現(xiàn)，Nanofat有明顯的嫩膚效果；還有研究發(fā)現(xiàn)，脂肪移植在對放射性皮膚潰瘍的治療或注射面部瘢痕后，可顯著改善皮膚彈性[10]，而Nanofat注射移植后，其促進(jìn)受損皮膚修復(fù)的確切機(jī)制尚不明確；另外眾所周知，在組織受損再生修復(fù)過程中，凋亡細(xì)胞釋放細(xì)胞因子和吸引可分泌生長因子的巨噬細(xì)胞，在促組織再生中也發(fā)揮著重要作用[11]。因此，乳化分解的脂肪注射可能對干細(xì)胞分化及組織再生有刺激作用。通過對Nanofat樣品分析發(fā)現(xiàn)，雖然在乳化過程中脂肪細(xì)胞被破壞，失去了正常脂肪組織結(jié)構(gòu)和脂肪細(xì)胞形態(tài)，然而大量的高活性間充質(zhì)干細(xì)胞仍然存在Nanofat樣品中[4]，所以，在Nanofat中起作用的可能是高活性的間充質(zhì)干細(xì)胞。但研究中對每克脂肪組織可提取多少具有活性的間充質(zhì)干細(xì)胞，還有待進(jìn)一步驗證，然而機(jī)械乳化法提供的臨床上可操作的脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞的微小乳化物，不僅克服了用細(xì)針移植的難度，還降低了涉及使用脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞的技術(shù)壁壘和倫理問題。臨床常規(guī)情況下，分離萃取基質(zhì)血管成分(stromal vascular fraction, SVF)的操作復(fù)雜，所需時間長，需昂貴設(shè)備和試劑，同時可能存在標(biāo)本污染及安全性問題，使其在臨床應(yīng)用受到限制；采用常規(guī)酶消化法及更新后的技術(shù)，提取脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞，耗時更長，約90 min，且處理300～600 g脂肪，約花費(fèi)400～2500美元[12]。目前，檢驗標(biāo)準(zhǔn)主要有3點(diǎn)[13]：⑴體外培養(yǎng)細(xì)胞可黏附于塑料培養(yǎng)皿表面，并可擴(kuò)增成克隆集落；⑵具有多能分化性，可誘導(dǎo)分化成多種細(xì)胞；⑶細(xì)胞表面可表達(dá)CD105、CD73、CD90，但不表達(dá)骨髓來源干細(xì)胞的標(biāo)記物。

圖1 脂肪移植針 圖2 脂肪制備成納米脂肪乳化液的過程 圖3 乳化液過濾 圖4 Nanofat注射方法 a.下瞼注射 b.上瞼注射 圖5 患者33歲，光老化性眼周細(xì)紋,眼周色素沉著癥 圖6 術(shù)后3個月,眼周細(xì)紋消失，色素沉著改善明顯 圖7 患者26歲，下瞼色素沉著癥 圖8 術(shù)后2個月,下瞼色素沉著改善明顯
Fig 1 Needle of fat grafting. Fig 2 Processing of fat into emulsified liquid of nanofat. Fig 3 Filtration of emulsified liquid. Fig 4 Injection method of nanofat. a. the injection of nanofat at the lower eyelid. b. the injection of nanofat at the upper eyelid. Fig 5 A 33-year-old female patient with perioptic photoaging microgroove and pigmentation. Fig 6 Postview with disappeared perioptic microgroove and obviously improved pigmentation at 3 months. Fig 7 A 26-year-old female patient with pigmentation on the lower eyelid. Fig 8 Postview with obviously improved pigmentation at 2 months.

Nanofat真皮內(nèi)注射并結(jié)合脂肪結(jié)構(gòu)性移植，可獲得比化學(xué)生物工程填充劑更好、更安全的美容效果。其中，Nanofat可層疊多個扇形在皮內(nèi)水平注射，能提高皮膚的質(zhì)量和改善皮膚色澤，最好效果通常在術(shù)后2～6個月；臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，對眼周色素沉著癥治療時，有一段較長期的紅斑階段，可能是組織修復(fù)更新而引起。

目前，在面部重建年輕化美容手術(shù)的發(fā)展過程中，自體脂肪移植無論作為一項獨(dú)立的技術(shù)，還是用于與軟組織重塑、收緊皮膚等綜合年輕化，都是填充缺損、恢復(fù)體積，而且脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞對組織再生抗衰老的作用，也日漸突出；其在缺血性輻照傷口愈合及促進(jìn)組織修復(fù)的效果正被廣大整形外科醫(yī)師所重視。更有文獻(xiàn)報道[14]，脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞正用于治療乳房再造乳頭的感覺恢復(fù)，這些臨床效果都提示了脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞用于修復(fù)組織，有一種未知的再生機(jī)制。而機(jī)械乳化脂肪，為我們提供了一種簡單制備脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞的技術(shù)，更擴(kuò)大了脂肪移植的治療范圍，如眼周、口周、手部、頸部，幾乎可用于全身各個部位，而且局部治療效果確切，但全身抗衰老的效果有待進(jìn)一步觀察驗證。

Nanofat注射相當(dāng)于自體組織移植過程，是符合醫(yī)療規(guī)范的。因此，Nanofat注射可用于提高皮膚質(zhì)量、改善細(xì)紋等非結(jié)構(gòu)性移植的年輕化領(lǐng)域，有可能成為非結(jié)構(gòu)性移植年輕化的標(biāo)準(zhǔn)。

[1] 李青峰. 自體脂肪移植臨床原則與問題[J]. 中國美容整形外科雜志, 2010,21(9):513-514.

[2] Colwell AS, Borud LJ. Fat grafting to the breast revisited: safety and efficacy[J]. Plast Reconstr Surg, 2008,121(2):701-702.

[3] Nguyen PS, Desouches C, Gay AM, et al. Development of micro-injection as an innovative autologous fat graft technique: The use of adipose tissue as dermal filler[J]. J Plast Reconstr Aesthet Surg, 2012,65(12):1692-1699.

[4] Tonnard P, Verpaele A, Peeters G, et al. Nanofat grafting: basic research and clinical applications[J]. Plast Reconstr Surg, 2013,132(4):1017-1026.

[5] Piasecki JH, Gutowski KA, Lahvis GP, et al. An experimental model for improving fat graft viability and purity[J]. Plast Reconstr Surg, 2007,119(5): 1571-1583.

[6] 李發(fā)成, 雷 華, 李青峰. 若干理化因素對脂肪顆?；钚杂绊懙难芯縖J]. 中國美容醫(yī)學(xué), 2005,14(1):31-33.

[7] Friji MT. Nanofat grafting: basic research and clinical applicatio-ns[J]. Plast Reconstr Surg, 2014,134(2):333e-334e.

[8] Nano. gov.National Nanotechnology Initiative. What is nanotechnology[EB/OL]? [2014-01-25]. Available at: http://www.nano.gov/nanotech-101/what/definition.

[9] Khouri RK Jr, Khouri RE, Lujan-Hernandez JR, et al. Diffusion and perfusion: the keys to fat grafting[J]. Plast Reconstr Surg Glob Open, 2014,2(9):e220.

[10] Akita S, Yoshimoto H, Ohtsuru A, et al. Autologous adipose-derived regenerative cells are effective for chronic intractable radiation injuries[J]. Radiat Prot Dosimetry, 2012,151(4):656-660.

[11] Mahdavian Delavary B, van der Veer WM, van Egmond M, et al. Macrophages in skin injury and repair[J]. Immunobiology, 2011,216(7):753-762.

[12] Raposio E, Caruana G, Bonomini S, et al. A novel and effective strategy for the isolation of adipose-derived stem cells: minimally manipulated adipose-derived stem cells for more rapid and safe stem cell therapy[J]. Plast Reconstr Surg, 2014,133(6):1406-1409.

[13] Aronowitz JA, Hakakian CS. A novel and effective strategy for the isolation of adipose-derived stem cells: minimally manipulated adipose-derived stem cells for more rapid and safe stem cell therapy[J]. Plast Reconstr Surg, 2015,135(2):454e.

[14] Khouri RK, Eisenmann-Klein M, Cardoso E, et al. Brava and autologous fat transfer is a safe and effective breast augmentation alternative: results of a 6-year, 81-patient, prospective multicenter study[J]. Plast Reconstr Surg, 2012,129(5):1173-1187.

Clinical observation of nanofat in facial non-structural grafting

LIANGZhi-sheng,YANGShi-xin,ZHANGHua-bin,etal.

(DepartmentofPlasticSurgery,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030000,China)

Objective To assess the clinical effects of nanofat in facial non-structural grafting. Metho-ds From Sept. 2014 to Dec. 2014, 10 female cases with skin aging (1 case in cheek, 5 around eyes, 2 in forehead and 2 with scar) were performed willingly the fat grafting. Nanofat obtained from routine lipsuction was centrifugated, emulsified and filtrated, and then the emulsified liquid was injected into the deep layer of dermis by 27 gauge needle until the skin turned yellowish. The following up, taking photo and other following treatments were performed. Results Of 10 cases, 9 cases were effective, in which 7 cases with skin aging were remarkable improved, 1 case was ineffective. The clinical effects were stable on 7 cases, reoperation on 3 cases in following up period. There were few complications occurring. Conclusion Nanofat grafting is benefit for skin rejuvenation.

Nanofat； Non-structural grafting； Skin rejuvenation

030000 山西 太原，山西醫(yī)科大學(xué)(梁志生，王欽立);山西醫(yī)學(xué)科學(xué)院山西大醫(yī)院 整形外科(楊時昕); 深圳陽光整形美容醫(yī)院 整形外科(張華彬)

梁志生(1982-)，男，山西大同人，主治醫(yī)師，碩士研究生.

楊時昕，030032,山西醫(yī)學(xué)科學(xué)院山西大醫(yī)院 整形外科，電子信箱：sxdyy1001@126.com

10.3969/j.issn.1673-7040.2015.05.009

R622

A

1673-7040(2015)05-0279-03

2015-03-10)