湯菊芬，黃　瑜，蔡　佳，魯義善，吳灶和，簡紀(jì)常

（1. 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廣東　湛江 524088；2. 廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動物病原生物學(xué)及流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東　湛江　524088）

中草藥復(fù)合益生菌制劑對凡納濱對蝦生長、抗病力及水質(zhì)的影響

湯菊芬1,2，黃瑜1,2，蔡佳1,2，魯義善1,2，吳灶和2，簡紀(jì)常1,2

（1. 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廣東湛江 524088；2. 廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動物病原生物學(xué)及流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東湛江524088）

將枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等比例混合，制成芽孢桿菌制劑；將芽孢桿菌制劑與糞腸球菌、嗜酸乳桿菌等比例混合制成復(fù)合益生菌制劑；將分別用3種芽孢桿菌發(fā)酵的中草藥等比例混合制成中草藥芽孢桿菌制劑；將分別用5種益生菌發(fā)酵的中草藥等比例混合，制成中草藥復(fù)合益生菌制劑。在飼料中分別添加4種益生菌制劑（活菌為2×107cfu/g），研究 4 種制劑對凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）生長、抗病力及水質(zhì)的影響。結(jié)果表明：1）4種益生菌制劑均可提高凡納濱對蝦的成活率、增重率和飼料利用率（P < 0.05），中草藥益生菌制劑組的促生長效果優(yōu)于益生菌制劑組，以中草藥復(fù)合益生菌制劑組促生長效果為最佳（P < 0.05）；2）4種益生菌制劑均可維持對蝦養(yǎng)殖水體 pH 值、氨態(tài)氮和亞硝酸鹽含量的穩(wěn)定（P < 0.05），中草藥益生菌制劑對水質(zhì)的改良效果優(yōu)于益生菌制劑（P < 0.05）；3）用 1×108cfu/mL 的哈維氏弧菌（Vibro harveyi）菌液浴浸泡凡納濱對蝦 10 d，凡納濱對蝦的累計(jì)死亡率由大到小依次為中草藥復(fù)合益生菌制劑組（31.11%）、復(fù)合益生菌制劑組（35.56%）、中草藥芽孢桿菌制劑組（37.78%）、芽孢桿菌制劑組（44.44%）、對照組（93.33%）。在飼料中添加一定比例的中草藥復(fù)合益生菌制劑可提高凡納濱對蝦的生長指標(biāo)、改善養(yǎng)殖水體環(huán)境、提高對蝦的抗病力。

凡納濱對蝦；飼料添加劑；益生菌制劑；中草藥；復(fù)合制劑；生長；水質(zhì)；抗病力

近年來，隨著對蝦集約化養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展，水環(huán)境惡化，病害頻發(fā)，抗生素及其他藥物的使用已產(chǎn)生細(xì)菌抗藥性及藥物殘留等問題，嚴(yán)重影響了對蝦產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展[1-2]。為此，尋找無公害藥物替代品成為研究熱點(diǎn)。中草藥和益生菌因具有促進(jìn)養(yǎng)殖動物生長、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能及抗病力等功效，廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)[3-4]。研究表明，中草藥和益生菌共同使用具有協(xié)同增效作用，中草藥可促進(jìn)益生菌增殖，益生菌可促進(jìn)生物體對中草藥的吸收和利用[5]。有關(guān)中草藥和益生菌聯(lián)合使用在畜禽上的研究較多，在水產(chǎn)方面的研究僅見在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）[6-9]、羅非魚（Oreochromis niloticus）[10]和建鯉（Cyprinus carpio）[11]方面的報(bào)道，但這些研究均為同時(shí)在飼料中添加益生菌和中草藥，而用益生菌發(fā)酵中草藥，制備中草藥復(fù)合益生菌制劑，研究添加該制劑的對蝦飼料養(yǎng)殖效果方面尚未見報(bào)道。本研究在凡納濱對蝦飼料中添加一定比例的中草藥復(fù)合益生菌制劑，研究中草藥復(fù)合益生菌制劑對凡納濱對蝦生長、抗病力及養(yǎng)殖水質(zhì)的影響，為中草藥復(fù)合益生菌制劑在對蝦養(yǎng)殖業(yè)中的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

試驗(yàn)用凡納濱對蝦，同批次，同齡，同規(guī)格，體質(zhì)量（5.82±0.4）g，由湛江市東海島民安鎮(zhèn)大熟村林老板對蝦養(yǎng)殖池塘提供，挑選健康、規(guī)格均一的對蝦暫養(yǎng)7 d后用于試驗(yàn)，暫養(yǎng)條件：溫度（28.5 ±2）℃，鹽度為5，過濾、消毒海水。

復(fù)方中草藥制劑由金銀花、板藍(lán)根、杜仲、五味子、黃芪、山楂、生姜、金銀花、連翹、柴胡、甘草組成，粉碎，過孔徑180 μm篩，按一定比例混勻。

菌株納豆芽孢桿菌（Bacillus natto）、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢桿菌（Baclicus lincheniformis）、嗜酸乳桿菌（Lactobacillus acidophilus）、糞腸球菌（Enterococcus faecalis）由廣東綠百多生物科技有限公司提供。

基礎(chǔ)飼料，某品牌的凡納濱對蝦 2 號料，購于東海島東簡鎮(zhèn)的某飼料經(jīng)銷店，營養(yǎng)指標(biāo)（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）：水分10.53%，粗蛋白42.08%，粗脂肪9.33%，粗灰分0.95%，粗纖維2.66%。

1.24種益生菌制劑的制備

1.2.1芽孢桿菌制劑及復(fù)合益生菌制劑的制備菌種活化：取納豆芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種，分別以體積分?jǐn)?shù)1% 接種于營養(yǎng)肉湯中，于搖床中，在37 ℃、200 r/min的條件下培養(yǎng)24 h，再二次活化12 h后備用。嗜酸乳桿菌、糞腸球菌分別接入乳酸細(xì)菌（MRS）液體培養(yǎng)基中，于37 ℃、厭氧條件下培養(yǎng)48 h，再二次活化24 h后備用。

芽孢桿菌制劑由上述3株芽孢桿菌等比例組成，復(fù)合益生菌制劑是由芽孢桿菌制劑、糞腸球菌和嗜酸乳桿菌等比例混合而成，于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2中草藥芽孢桿菌制劑及中草藥復(fù)合益生菌制劑的制備參照郭文婷等[12]方法，將復(fù)方中草藥制成生藥質(zhì)量濃度為1 g/mL 的提取液，再按表 1比例，在 5 種益生菌的培養(yǎng)基中分別加入中草藥提取液，然后再分別接種體積分?jǐn)?shù)1%的5 種已活化益生菌，制得 5 種中草藥益生菌。中草藥芽孢桿菌制劑由 3 種中草藥芽孢桿菌等比例混合而成，中草藥復(fù)合益生菌制劑由5種中草藥益生菌等比例混合而成。

表1　5種益生菌制劑培養(yǎng)方法Table 1　Cultivation method of five probiotics

1.3試驗(yàn)飼料制備

試驗(yàn)飼料按表 2 制備。

1.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將凡納濱對蝦隨機(jī)分成5個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)組。標(biāo)記為A、B、C、D、E組（表2），按表2所示分別飼喂基礎(chǔ)飼料和試驗(yàn)飼料。

1.5飼養(yǎng)管理方法

養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東海洋大學(xué)東海島高新科技園室內(nèi)養(yǎng)殖車間的 15 只裝水0.5 m3的玻璃鋼桶中進(jìn)行，周期為 30 d。每個(gè)玻璃鋼桶放養(yǎng)對蝦30 尾，依照1.4 的方案按體質(zhì)量的8% ～ 10%投喂相應(yīng)飼料，投飼時(shí)間分別為 6:00、10:00、19:00 和 23:00，早晚的投喂量占日投喂量的 60%～70%。每周根據(jù)對蝦的生長狀況調(diào)節(jié)投飼量。試驗(yàn)期間不間斷充氣，不換水，每天清理糞便。水溫為 (28.5±2) ℃。

表2　試驗(yàn)飼料Table 2　Preparation of experiment feed

1.6生長及水質(zhì)指標(biāo)測定

檢測實(shí)驗(yàn)開始時(shí)養(yǎng)殖水體的pH值、氨態(tài)氮和亞硝酸鹽含量，然后每3 d在17：00取水樣測定水體的pH值、氨態(tài)氮和亞硝酸鹽含量。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，停食24 h，各組對蝦稱質(zhì)量，計(jì)數(shù)。

增重率 =（終末體質(zhì)量 - 初始體質(zhì)量 / 初始體質(zhì)量）×100 %，

成活率 = 終末對蝦數(shù) / 初始對蝦數(shù)×100 %，

餌料系數(shù) = 攝食量 / (終末體質(zhì)量 + 死亡個(gè)體質(zhì)量 - 初始體質(zhì)量)。

氨態(tài)氮用納氏比色法測定，亞硝酸鹽用萘乙二胺分光光度法檢測，pH值用玻璃電極法檢測。

1.7攻毒試驗(yàn)

參照朱學(xué)芝等[13]方法，在養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)抽取對蝦45 尾，用含哈維氏弧菌（Vibrio harveyi）的水浸泡凡納濱對蝦，水體中的哈維氏弧菌維持在1×108cfu/mL，觀察 10 d內(nèi)的對蝦死亡情況，統(tǒng)計(jì)死亡率。試驗(yàn)期間停飼。

1.8數(shù)據(jù)處理

采用Excel 和SPSS11.5 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析（ANOVA），對有顯著差異者作Duncan’s 多重比較，所有數(shù)值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2　結(jié) 果

2.1中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦生長性能指標(biāo)的影響

中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦生長性能指標(biāo)的影響見表3。B、C、D、E 組凡納濱對蝦的成活率和增重率均高于A組，餌料系數(shù)低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），且C組和E組對凡納濱對蝦生長性能指標(biāo)的影響效果分別優(yōu)于B組和D組，說明飼料中添加益生菌制劑、中草藥益生菌制劑均可以顯著促進(jìn)凡納濱對蝦生長，中草藥益生菌制劑的促生長效果優(yōu)于益生菌制劑，以添加中草藥復(fù)合益生菌制劑的促生長效果為最佳。

2.2中草藥益生菌制劑對養(yǎng)殖水體 pH值的影響

圖1可見，對照組和實(shí)驗(yàn)組pH值均從9 d開始呈下降趨勢。尤其是在養(yǎng)殖后期，由于積累有機(jī)物的發(fā)酵分解，A組pH值的下降較其他組快（P < 0.05），4個(gè)實(shí)驗(yàn)組pH變化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），說明飼料添加益生菌制劑、中草藥益生菌制劑均可維持水體pH相對穩(wěn)定，有利于凡納濱對蝦生長。

表3　中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦生長及飼料利用率的影響Table 3　Effects of probiotics combined with Chinese herbal medicine on growth and feed utilization of of Litopenaeus vannamei

圖 1　pH值的變化情況Fig. 1　pH change in experimental water

2.3中草藥益生菌制劑對養(yǎng)殖水體亞硝酸鹽的影響

中草藥益生菌制劑對養(yǎng)殖水體亞硝酸鹽含量的影響見圖2。圖2可見，5組的亞硝酸鹽含量在實(shí)驗(yàn)初期均上升較慢，隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行，對照組亞硝酸鹽含量9 d時(shí)開始迅速增加，其他4組均于15 d時(shí)方緩慢增加，且4個(gè)實(shí)驗(yàn)組亞硝酸鹽含量均低于同期對照組（P < 0.05），但4個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間亞硝酸鹽含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。說明在飼料中添加益生菌制劑、中草藥益生菌制劑均可降低養(yǎng)殖水體亞硝酸鹽的含量。

圖 2　亞硝酸的變化情況Fig. 2　Change of nitrite content in experimental water

2.4中草藥益生菌制劑對養(yǎng)殖水體氨態(tài)氮的影響

中草藥益生菌制劑對養(yǎng)殖水體氨態(tài)氮含量的影響見圖3。圖3可見，實(shí)驗(yàn)初期（前3 d），各組間氨態(tài)氮含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），但從6 d時(shí)開始，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組氨態(tài)氮含量均低于同期對照組（P < 0.05），中草藥復(fù)合益生菌制劑組對養(yǎng)殖水體的氨態(tài)氮降解效果優(yōu)于益生菌制劑組（P < 0.05）。

圖3　氨態(tài)氮的變化情況Fig. 3 Ammonia change in experimental water

2.5中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦抗病力的影響

中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦抗病力的影響見圖4。圖4表明，經(jīng)人工感染哈維氏弧菌后，凡納濱對蝦的累計(jì)死亡率E組（31.11%）< D組（35.56%）< C組（37.78%） < B組（44.44%） < 對照組（93.33%），說明在飼料中添加益生菌制劑、中草藥益生菌制劑均可提高凡納濱對蝦抗哈維氏弧菌感染的能力，對蝦抗病力以中草藥復(fù)合益生菌制劑組效果最佳。

圖4　中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦抗病力率的影響Fig. 4　Effect of probiotics combined with Chinese herbal medicine on survival rate of Litopenaeus vannamei

3　討 論

3.1中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦生長性能的影響

益生菌可產(chǎn)生維生素、氨基酸、促生長因子、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等多種酶，促進(jìn)水產(chǎn)動物的生長[14-15]。李曉英等[16]在飼料中添加復(fù)合芽孢桿菌時(shí)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組中國對蝦（Fenneropenaeus chinensis）的平均生長速度為0.15 g/d，顯著高于對照組（0.12 g/d）；朱學(xué)芝等[17]將乳酸桿菌（Lactobacillus sporogenes）、地衣芽孢桿菌+枯草芽孢桿菌（等比例）、復(fù)合菌蝦樂333添加于飼料中或投入養(yǎng)殖水體中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三者均可促進(jìn)凡納濱對蝦的生長，降低飼料系數(shù)。胡毅等[18]研究飼料中添加單一益生菌和復(fù)合益生菌，結(jié)果表明，復(fù)合益生菌飼喂組凡納濱對蝦的特定生長率高于對照組 (P < 0.05)，而單一益生菌飼喂組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05)。于明超等[7]研究表明，飼料中添加中草藥和芽孢桿菌促進(jìn)了凡納濱對蝦的生長，且共同添加的效果優(yōu)于單獨(dú)添加。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果相一致，證明飼料中添加芽孢桿菌制劑、中草藥芽孢桿菌制劑、復(fù)合益生菌制劑、中草藥復(fù)合益生菌制劑均可促進(jìn)凡納濱對蝦的生長（P < 0.05），中草藥益生菌制劑組的促生長效果優(yōu)于益生菌制劑組，以中草藥復(fù)合益生菌制劑的促生長效果最佳。這可能是因?yàn)橹胁菟幒鸵嫔哂袇f(xié)同增效作用。一方面，中草藥富含多種營養(yǎng)物和一些未知的誘食因子，可以增強(qiáng)養(yǎng)殖動物的食欲，促進(jìn)水產(chǎn)動物機(jī)體代謝和消化酶的分泌，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率，從而加速養(yǎng)殖動物生長發(fā)育，降低飼料系數(shù)[19]；另一方面，益生菌制劑中的芽孢桿菌和乳酸桿菌可產(chǎn)生多種消化酶類[11]，可提高動物消化道內(nèi)消化酶的生物活性，促使動物機(jī)體更好地消化和吸收胃腸道中的營養(yǎng)物質(zhì)，提高飼料利用率。此外，乳酸桿菌還可分解轉(zhuǎn)化飼料中一些機(jī)體難以吸收的有機(jī)物質(zhì)，將一些糖類發(fā)酵成乳酸，降低動物腸道中的pH 值而形成酸性環(huán)境，有利于動物機(jī)體對鈣、鐵等礦物質(zhì)和維生素的吸收和利用，從而促進(jìn)凡納濱對蝦的生長。

此外，本研究中對照組和試驗(yàn)組的對蝦增重率均高于文獻(xiàn)[7, 17-18]結(jié)果，可能與本研究的凡納濱對蝦正好處于生長速度較快的中后期階段，以及與對蝦飼料不同有關(guān)。

3.2中草藥益生菌制劑對水質(zhì)因子的影響

在集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖中，殘餌及水產(chǎn)動物的排泄物等是水體污染的主要來源[20]。益生菌制劑可降解水體中有機(jī)質(zhì)，一定程度上調(diào)節(jié)水質(zhì)，由于各細(xì)菌種屬能量代謝的途徑和方式也不同，因此對環(huán)境中不同種類有機(jī)質(zhì)的降解能力也存在一定差異[21]。朱學(xué)芝等[17]在飼料中添加乳酸桿菌、復(fù)合芽孢桿菌、復(fù)合菌蝦樂等益生菌制劑，實(shí)驗(yàn)組水體中的 pH值、氨態(tài)氮和亞硝酸鹽含量均低于對照組；而湯保貴等[10]研究表明，飼料中添加益生菌制劑和中草藥聯(lián)合制劑可明顯降低羅非魚（Oreochro is niloticus）養(yǎng)殖水體中的亞硝酸鹽，但對氨氮無降低作用。本研究表明，飼料中添加益生菌制劑、中草藥益生菌制劑均可穩(wěn)定養(yǎng)殖水體的氨態(tài)氮、亞硝酸鹽和pH 值，與朱學(xué)芝等[17]的結(jié)果一致，而與湯保貴等[10]的結(jié)果略有差異。這可能是因?yàn)槲炊ㄖ矊ξr腸道而隨糞便排入水體的益生菌，以及隨殘餌釋放入水體的益生菌在適宜環(huán)境下生長增殖，從而發(fā)揮水質(zhì)調(diào)節(jié)作用；試驗(yàn)對象、所用益生菌菌種、中草藥益生菌制劑的制備和使用方法等的不同可能導(dǎo)致與湯保貴等[10]的結(jié)果略有差異。

3.3中草藥益生菌制劑對凡納濱對蝦抗病力的影響

益生菌制劑通過分泌抑菌物質(zhì)與病原菌爭奪營養(yǎng)或附著位點(diǎn)而抑制其生長，改善機(jī)體免疫功能等[22]。朱學(xué)芝等[13]研究表明，飼料中添加芽孢桿菌可提高凡納濱對蝦血細(xì)胞總量以及血清酚氧化酶、堿性磷酸酶和酸性磷酸酶含量（P < 0.05），降低血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量（P < 0.05），提高對蝦抗溶藻弧菌感染的能力。據(jù)胡毅等[18]報(bào)道，飼料中添加益生菌可降低凡納濱對蝦腸道及糞便的弧菌數(shù)（P < 0.05），提高對蝦血清蛋白濃度、酚氧化酶活力、溶菌酶活力和總抗氧化力。文國樑[6]研究了飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑對凡納濱對蝦免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌和中草藥制劑對凡納濱對蝦的免疫指標(biāo)（血細(xì)胞數(shù)量、酚氧化酶、活菌酶等) 產(chǎn)生積極影響，并有一定的協(xié)同作用。本研究結(jié)果與朱學(xué)芝[17]、胡毅[18]、文國樑等[6]的研究結(jié)果相一致，經(jīng)人工感染哈維氏弧菌后，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組對蝦的存活率高于實(shí)驗(yàn)組（P < 0.05），復(fù)合益生菌制劑組的存活率高于芽孢桿菌制劑組，中草藥復(fù)合益生菌制劑組的抗病效果優(yōu)于中草藥芽孢桿菌制劑組，以中草藥復(fù)合益生菌制劑組對蝦抗病力最強(qiáng)。這可能與中草藥與益生菌產(chǎn)生協(xié)同增效作用有關(guān)。一方面，中草藥在體外經(jīng)益生菌發(fā)酵、分解后產(chǎn)生了有機(jī)酸、生物堿等抑菌物質(zhì)，這些抑菌物質(zhì)進(jìn)入對蝦腸道后可抑制有害致病菌的生長繁殖；中草藥中所含黃酮、皂甙、核苷酸、維生素、葉酸、多糖等活性成分本身就是益生菌的重要生長因子[23]，進(jìn)入對蝦腸道后，可促進(jìn)益生菌的增殖并分泌抑菌物質(zhì)；各種益生菌在腸道中的生長增殖勢必會與腸道中有害病原菌搶奪營養(yǎng)物質(zhì)和附著位點(diǎn)，從而抑制了病原菌的生長繁殖，增強(qiáng)對蝦的抗病能力。此外，芽孢桿菌在腸道中的生長繁殖，會消耗掉腸道中氧氣，為腸道乳酸桿菌（Lactobacillue）、雙歧桿菌（Bifidobacterium）等厭氧細(xì)菌的繁殖創(chuàng)造厭氧環(huán)境條件，同時(shí)也抑制了好氧病原菌的生長繁殖，這可能是復(fù)合益生菌比單一益生菌具有更好抗病效果的原因。復(fù)合益生菌制劑組對蝦的存活率高于中草藥芽孢桿菌制劑組，可能與不同細(xì)菌在腸道微生物區(qū)系中占有的生態(tài)位不同有關(guān)。

[1]許兵, 紀(jì)偉尚, 張鵬, 等. 對蝦病原菌抑菌藥物的研究[J]. 青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 1993, 23(2): 43?51.

[2]BOYD C E, MASSAUT L. Risks associated with the use of chemical in pond aquaculture [J]. Aquaculture Engineering, 1999, 20(2): 113–132.

[3]GATESOUPE F J. The use of probiotics in aquaculture [J]. Aquaculture, 1999, 180: 147–165.

[4]向梟, 周興華. 中草藥添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的作用[J].糧食與飼料工業(yè), 2000, (3): 27-29.

[5]丁軻, 倪學(xué)勤, 潘康成, 等. 益生菌與協(xié)同劑的協(xié)同效應(yīng)研究[J]. 獸藥與飼料添加劑, 2004, 9(4): 17-19.

[6]文國樑, 于明超, 李卓佳, 等. 飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑對凡納濱對蝦免疫功能的影響[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2009, 18(2): 181-186.

[7]于明超, 李卓佳, 林黑著, 等. 飼料中添加芽孢桿菌和中草藥制劑對凡納濱對蝦生長及腸道菌群的影響[J].熱帶海洋學(xué)報(bào), 2010, 29 (4): 132-137.

[8]馬良驍, 馮憲斌, 韋新蘭, 等. 微生態(tài)制劑聯(lián)合中草藥制劑在南美白對蝦高位池養(yǎng)殖應(yīng)用[J]. 海洋與漁業(yè), 2013 (9): 98-100.

[9]王振懷, 高才全, 李春嶺, 等. 微生物和中藥制劑在南美白對蝦養(yǎng)殖中的應(yīng)用試驗(yàn)[J]. 河北漁業(yè), 2005(2): 30-30.

[10]湯保貴, 孫建華. 微生物和中草藥聯(lián)合制劑對羅非魚生長和水質(zhì)的影響[J]. 水利漁業(yè), 2007, 27(4): 62-63.

[11]肖拉. 枯草芽孢桿菌JS01和黃芪多糖對建鯉生長及免疫功能的影響[D]. 雅安: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué), 2012.

[12]郭文婷, 李健. 中草藥制劑對凡納濱對蝦生長及血淋巴中免疫因子的影響[J]. 飼料工業(yè), 2005, 26(6): 6-10.

[13]朱學(xué)芝, 鄭石軒, 潘慶軍, 等. 芽孢桿菌對凡納濱對蝦免疫和生化指標(biāo)的影響[J]. 飼料研究, 2007 (4): 56-59.

[14]楊惠萍, 童圣英, 王子臣. 國內(nèi)外關(guān)于水產(chǎn)動物消化酶研究概況[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào), 1998, 13(3): 66-73.

[15]丁賢, 李卓佳. 芽孢桿菌對凡納濱對蝦生長和消化酶活性的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2004, 11(6): 6-11.

[16]李曉英, 董志國, 閻斌倫, 等. 復(fù)合微生態(tài)制劑對中國對蝦養(yǎng)殖池塘水質(zhì)和生長性能的影響[J]. 中國飼料, 2007 (19): 27-29.

[17]朱學(xué)芝, 鄭石軒, 潘慶軍. 微生態(tài)制劑對凡納濱對蝦生長及水質(zhì)的影響[J]. 中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2008, 47(增刊): 58-62.

[18]胡毅, 譚北平, 麥康森, 等. 飼料中益生菌對凡納濱對蝦生長、腸道菌群及部分免疫指標(biāo)的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué), 2008, 15(2): 243-251.

[19]宋世民. 中草藥飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù), 2013 (6): 37.

[20]吳琴瑟. 養(yǎng)殖對蝦池塘底質(zhì)污染與調(diào)控措施[J]. 海洋與漁業(yè), 2008(2): 41-42.

[21]王新, 吳逸飛, 姚曉紅, 等. 微生態(tài)制劑對養(yǎng)殖后期蝦池水質(zhì)及細(xì)菌群落的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2014, 26(1): 40-47.

[22]王亞敏, 王印庚. 微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的作用機(jī)理及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展, 2008, 29(6): 72-75.

[23]周文靜. 益生菌與食藥源中草藥協(xié)同作用的研究[D].西安：陜西科技大學(xué), 2006.

（責(zé)任編輯：劉慶穎）

Effects of a Probiotics Combined with Chinese Herbal Medicine on Growth Performance, Water Quality and Resistance to Diseases for Litopenaeus vannamei

TANG Ju-fen1,2, HUANG Yu1,2, CAI Jia1,2, LU Yi-shan1,2, WU Zao-he2, JIAN Ji-chang1,2
（1. Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China; 2. Guangdong Province Key Laboratory of Pathogen Biology and Epidemiology of Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China）

The effects of a probiotics combined with Chinese Herbal Medicine on growth performance, water quality and resistance to diseases of Litopenaeus vannamei were studied by adding four different probiotics (2×107cfu/g), compound Bacillus (mixed Bacillus subtilis, Bacillus natto and Baclicus lincheniformis with equal parts), Chinese herbal medicine compound Bacillus, compound Probiotics (mixed Enterococcus faecalis, Lactobacillus acidophilus and compound Bacillus with equal parts), Chinese herbal medicine compound probiotics,respectively to the feed. The results indicated that: (1) Four probiotics had significant effects on survival rate, weight-gaining and feed conversion ratio (P<0.05), and Chinese herbal medicine probiotics group on the growth promoting effect is better than that of probiotics group, that of Chinese herbal medicine compound probiotics group to the best (P<0.05). (2) Four probiotics can maintain the stable of pH, ammonia nitrogen and nitrite of aquaculture water (P<0.05), The effects of Chinese herbal medicine probiotics on the improvement of water quality is better than that of probiotics（P<0.05）；(3) After water bath soak Litopenaeus vannamei with containing 1×108cfu/mL of Vibro harveyi for 10 d, the cumulative mortality rate of Litopenaeus vannamei respectively are Chinese herbal medicine compound probiotics (31.11%), compound Brobiotics (35.56%), Chinese herbal medicine compound Bacillus (37.78%), compound Bacillus (44.44%), control group (93.33%). Results showed that by adding a certain proportion of Chinese herbal medicine compound probiotics, the growth index of Litopenaeus vannamei can be enhanced, the quality of aquaculture water and capacity of disease resistance can be improved.

Litopenaeus vannamei; feed additive; probiotics; compound preparation; Chinese Herbal Medicine; growth; disease resistance; aquaculture water quality

S963.73+6

A

1673-9159（2015）06-0047-06

10.3969/j.issn.1673-9159.2015.06.009

2015-06-30

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2015A020209181）；湛江市科技計(jì)劃項(xiàng)目 (2012A0302）

湯菊芬（1964－），女，碩士，高級工程師，主要從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與免疫研究。E- mail: tjf10002000@163.com

簡紀(jì)常，男，教授，主要從事水產(chǎn)動物免疫及疾病控制。E-mail：jianjc@gmail.com