黃維金，吳興波，王秋穎

(1云南省保山市騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山 679100；2云南省保山市騰沖縣林業(yè)局林業(yè)技術(shù)推廣站，云南 保山 679100；3中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193)

·中藥農(nóng)業(yè)·

滇西南地區(qū)不同道地樹(shù)種對(duì)蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的影響

黃維金1，吳興波2，王秋穎3*

(1云南省保山市騰沖縣林業(yè)局國(guó)有林場(chǎng)管理站，云南 保山 679100；2云南省保山市騰沖縣林業(yè)局林業(yè)技術(shù)推廣站，云南 保山 679100；3中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 藥用植物研究所，北京 100193)

目的：篩選滇西南地區(qū)最適合天麻蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的道地樹(shù)種。方法：選用滇西南地區(qū)32種常見(jiàn)闊葉樹(shù)種，制作蜜環(huán)菌三級(jí)種培養(yǎng)基培養(yǎng)蜜環(huán)菌，比較蜜環(huán)菌在不同樹(shù)種中的生長(zhǎng)速度及菌索生長(zhǎng)狀況。結(jié)果：白檀培養(yǎng)基中，蜜環(huán)菌的生長(zhǎng)速度快，菌索發(fā)生變異，呈扇形，生長(zhǎng)狀況良好；蜜環(huán)菌在歐洲山毛櫸等20種樹(shù)種配制的培養(yǎng)基中，菌索的生長(zhǎng)速度和菌索外部形態(tài)特征都正常；紫丁香、木通、木蓮、厚皮香、金葉子、辣木樹(shù)、化香樹(shù)、團(tuán)香果、白杜鵑和多花含笑，這11種樹(shù)種的蜜環(huán)菌生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)狀況不理想。結(jié)論：白檀是培養(yǎng)蜜環(huán)菌三級(jí)種的優(yōu)良樹(shù)種；歐洲山毛櫸等20種樹(shù)種也可做為蜜環(huán)菌三級(jí)種培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分；紫丁香等11種樹(shù)不適合蜜環(huán)菌的生長(zhǎng)，不能作為蜜環(huán)菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分。

蜜環(huán)菌；生長(zhǎng)速度；菌索；不同樹(shù)種

蜜環(huán)菌Armillariamellea(Vahl ex Fr.)Quel屬于擔(dān)子菌亞門(Basidomycotina)，層菌綱(Hymenomycetes)，傘菌目(Agaricales)，口蘑科(Tricholomataceae)，蜜環(huán)菌屬 Armillaria(Fr.：Fr.)Staude[1]，別名蜜環(huán)蕈、榛蘑、青岡蕈。蜜環(huán)菌味道鮮美，藥用價(jià)值高，是一種藥食兼用真菌，已被制成蜜環(huán)菌片、腦心舒、銀蜜片等產(chǎn)品應(yīng)用于臨床。蜜環(huán)菌還是天麻栽培中必須的共生真菌，天麻正常生長(zhǎng)發(fā)育須依靠侵入木材的蜜環(huán)菌分解木質(zhì)素提供營(yíng)養(yǎng)，而蜜環(huán)菌自身生長(zhǎng)須要的營(yíng)養(yǎng)也得依靠木材提供[2]。蜜環(huán)菌生長(zhǎng)常用樹(shù)種一般為闊葉樹(shù)中的柞樹(shù)、櫟木，滇西南地區(qū)闊葉樹(shù)樹(shù)種豐富，每年清林修剪下來(lái)的枝條數(shù)量較多，這些枝條通常沒(méi)有被好好利用而成了廢物。為了實(shí)現(xiàn)廢物再利用和林業(yè)經(jīng)濟(jì)高效循環(huán)，在認(rèn)真考察和分析具有地方特色問(wèn)題的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)選用32種當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)樹(shù)種的樹(shù)枝培養(yǎng)蜜環(huán)菌，通過(guò)比較不同樹(shù)種培養(yǎng)基中蜜環(huán)菌的生長(zhǎng)情況，為當(dāng)?shù)靥炻樯a(chǎn)擴(kuò)大用材來(lái)源提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試樹(shù)種

實(shí)驗(yàn)材料來(lái)源于云南省保山市騰沖縣常見(jiàn)樹(shù)種的枝條，這些枝條大多來(lái)源于林場(chǎng)清林時(shí)修剪所棄，共計(jì)32種。通過(guò)查閱文獻(xiàn)以及當(dāng)?shù)鼐用窈土謭?chǎng)管理人員的幫助，統(tǒng)計(jì)了這32種樹(shù)種的中文名、俗名、拉丁名和科屬，具體信息見(jiàn)表1。

表1 32種供試樹(shù)種名稱及科屬

1.2 供試菌種

實(shí)驗(yàn)所用的蜜環(huán)菌菌種為中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所真菌室保存的A9菌株。

1.3 方法

1.3.1 蜜環(huán)菌二級(jí)種的制備

在300 mL的玻璃培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)灌裝約2/5體積的麥麩-葡萄糖培養(yǎng)基，121 ℃高壓滅菌30 min，將保存的A9試管于25 ℃活化24小時(shí)之后，接入玻璃培養(yǎng)瓶，于25 ℃恒溫避光培養(yǎng)，長(zhǎng)滿瓶后備用。

1.3.2 木材培養(yǎng)基的制備

32種樹(shù)種，分別取直徑在1.5 cm左右的新鮮枝條，截成約2～3 cm長(zhǎng)的木段，定量分裝于300 mL培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加水至瓶口，121 ℃高壓滅菌2 h后接入蜜環(huán)菌二級(jí)菌種，25 ℃恒溫避光培養(yǎng)[3]，每個(gè)處理重復(fù)4瓶。

1.3.3 記錄蜜環(huán)菌的萌發(fā)情況以及生長(zhǎng)速度

觀察記錄蜜環(huán)菌菌種塊的萌發(fā)情況，是否都能萌發(fā)，若能萌發(fā)，從接種菌塊上菌索萌動(dòng)后第三天開(kāi)始，每隔三天在瓶壁上劃線，標(biāo)記蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)最前端，用游標(biāo)卡尺測(cè)量蜜環(huán)菌菌索生長(zhǎng)長(zhǎng)度，觀察菌索的分枝、粗細(xì)、濃密度等生長(zhǎng)狀況，并記錄。

2 結(jié)果與分析

由于生產(chǎn)上培養(yǎng)蜜環(huán)菌菌枝常選用木質(zhì)堅(jiān)實(shí)、利于蜜環(huán)菌生長(zhǎng)的樹(shù)種，本實(shí)驗(yàn)以生產(chǎn)上常用的歐洲山毛櫸(青岡木)配制的培養(yǎng)基培養(yǎng)的蜜環(huán)菌生長(zhǎng)狀況為對(duì)照，觀察比較在相同培養(yǎng)條件下，蜜環(huán)菌在其他樹(shù)種配制的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況。

2.1 蜜環(huán)菌在不同培養(yǎng)基中的萌發(fā)情況

蜜環(huán)菌菌種塊在實(shí)驗(yàn)所選的32種樹(shù)種的短枝條培養(yǎng)基中均能萌發(fā)，蜜環(huán)菌在歐洲山毛櫸培養(yǎng)基中的萌發(fā)時(shí)間為4 d，蜜環(huán)菌在木通、木荷、辣木樹(shù)培養(yǎng)基中萌發(fā)較慢，分別為8、7、9 d，在厚皮香培養(yǎng)基中萌發(fā)最慢，為14 d。

2.2 蜜環(huán)菌在不同培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速度

從表1中可以看出蜜環(huán)菌在香葉樹(shù)、山羊角樹(shù)、光皮樺、云南黃杞和頭狀四照花中生長(zhǎng)最快，與歐洲山毛櫸生長(zhǎng)速度大致相同，菌索長(zhǎng)到瓶底僅14 d；其次是假黃櫟、酸角樹(shù)、山楊柳和團(tuán)香果，蜜環(huán)菌在這四種培養(yǎng)基中菌索長(zhǎng)到瓶底為17 d；到培養(yǎng)第20天時(shí)，蜜環(huán)菌在紫丁香、西南樺、木荷、木蓮、楸木、柞木、白檀、化香樹(shù)、南燭九種培養(yǎng)基中菌索長(zhǎng)到瓶底；到第23天時(shí)，冬櫻花、木通、金葉子、青皮木、莢米五種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)滿瓶；厚皮香和多花含笑中蜜環(huán)菌生長(zhǎng)最慢，至紀(jì)錄結(jié)束厚皮香中蜜環(huán)菌僅46.34 mm，多花含笑中為59.42 mm，其余樹(shù)種至記錄結(jié)束菌索前沿位于60～77 mm之間，生長(zhǎng)速度緩慢。

2.3 蜜環(huán)菌在不同樹(shù)種培養(yǎng)基中菌索生長(zhǎng)情況比較

在榿木、山羊角樹(shù)、青皮木、柞木、云南黃杞、山楊柳、楊梅、莢米配制的培養(yǎng)基中的菌索生長(zhǎng)情況與歐洲山毛櫸(圖1-A)中相似，菌索粗壯分枝多，粗壯且濃密；在木通和厚皮香中蜜環(huán)菌菌索極細(xì)，幾乎沒(méi)有分枝，分布很稀疏；在紫丁香、木蓮、金葉子、辣木樹(shù)、化香樹(shù)、團(tuán)香果(圖1-B)、白杜鵑、多花含笑中蜜環(huán)菌菌索較細(xì)，分枝很少，分布較為稀疏；在冬櫻花、西南樺、木荷、假黃櫟、光皮樺、酸角、楸木、山胡椒(圖1-C)、南燭、黃毛青岡和頭狀四照花中蜜環(huán)菌菌索較為粗壯，分枝較多，分布比較濃密；蜜環(huán)菌在香果樹(shù)(圖1-D)中生長(zhǎng)比在歐洲山毛櫸中分枝多，且分布更為濃密，但二者菌索粗細(xì)程度相近；在白檀樹(shù)(圖1-E)中的分枝少于歐洲山毛櫸，但其菌索極其粗壯，呈現(xiàn)片狀，類似扇形。

表2 不同樹(shù)種培養(yǎng)基中蜜環(huán)菌生長(zhǎng)情況 /mm

A；歐洲山毛櫸；B；團(tuán)香果；C：山胡椒；D；香葉樹(shù)；E；白檀。圖1 蜜環(huán)菌在5種不同樹(shù)種中的生長(zhǎng)情況

表3 不同樹(shù)種培養(yǎng)基中蜜環(huán)菌菌索性狀比較

2.3 結(jié)論與討論

2.3.1 結(jié)論

通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，在實(shí)驗(yàn)的32種樹(shù)種中，蜜環(huán)菌在白檀配制的培養(yǎng)基中菌索最粗壯，由原來(lái)彎曲的索狀變異為平鋪的扇形，菌索生長(zhǎng)速度快，分枝多，分布濃密，蜜環(huán)菌活力旺盛，是本次實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的最適合天麻蜜環(huán)菌三級(jí)種生長(zhǎng)的樹(shù)種；在榿木、歐洲山毛櫸、山羊角樹(shù)、光皮樺、酸角、柞木、香葉樹(shù)、云南黃杞、山楊柳、頭狀四照花這10種樹(shù)種配制的培養(yǎng)基中，蜜環(huán)菌生長(zhǎng)速度較快、菌索粗壯且分枝多、分布濃密，可以和歐洲山毛櫸一樣作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的優(yōu)良樹(shù)種；在木通和厚皮香中，蜜環(huán)菌萌發(fā)遲緩，生長(zhǎng)速度最慢，菌索極細(xì)且無(wú)分枝，此二者不適合用于蜜環(huán)菌菌種的培養(yǎng)；在紫丁香、木蓮、金葉子、辣木樹(shù)、化香樹(shù)、團(tuán)香果、白杜鵑和多花含笑這8種樹(shù)種配制的培養(yǎng)基中，蜜環(huán)菌生長(zhǎng)緩慢，菌索較細(xì)且少分枝，分布稀疏，故也不適合單獨(dú)用于培養(yǎng)蜜環(huán)菌的樹(shù)種；蜜環(huán)菌在其余樹(shù)種中，菌索生長(zhǎng)速度一般，較為粗壯，分枝相對(duì)較多，分布較為濃密，可作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌的候選樹(shù)種。

2.3.2 討論

本實(shí)驗(yàn)中，殼斗科、薔薇科、楊柳科、樺木科、大風(fēng)子科的樹(shù)種培養(yǎng)基中，蜜環(huán)菌萌發(fā)快、生長(zhǎng)快、長(zhǎng)勢(shì)好，這與王秋穎等[4-5]研究報(bào)道結(jié)果一致，這些樹(shù)種屬于天麻栽培所用的傳統(tǒng)樹(shù)種；此外，蜜環(huán)菌在本實(shí)驗(yàn)所選用樟科、山茱萸科和山礬科植物中生長(zhǎng)速度、長(zhǎng)勢(shì)均較好(圖1)，尤其在白檀樹(shù)中，菌索已經(jīng)發(fā)生了變異，由原來(lái)彎曲索狀的菌索變成了扇形平鋪的扇形菌索，緊貼樹(shù)枝生長(zhǎng)(圖1-E)，這可能是由于這類樹(shù)枝中含有芳香類的特殊化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)菌索發(fā)生變異。這種變異作為培養(yǎng)蜜環(huán)菌三級(jí)種來(lái)說(shuō)屬于優(yōu)勢(shì)變異，有利于蜜環(huán)菌生長(zhǎng)，若作為栽培種，到底屬于優(yōu)勢(shì)還是劣勢(shì)，這樣的扇形菌索是否適合伴栽天麻，都有待進(jìn)一步探究來(lái)證實(shí)。

[1] 趙俊，趙杰.中國(guó)蜜環(huán)菌的種類及其在天麻栽培中的應(yīng)用[J].食用菌學(xué)報(bào)，2007，14(1)：67-72.

[2] 徐錦堂，郭順星.天麻與紫萁小菇和蜜環(huán)菌營(yíng)養(yǎng)關(guān)系及其在栽培中的應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)研究通訊，1991，20(10)：31-32.

[3] 王秋穎，郭順星，關(guān)鳳斌.不同來(lái)源蜜環(huán)菌對(duì)天麻產(chǎn)量影響的研究[J].中草藥，2001，32(9)：839-841.

[4] 王秋穎.天麻人工栽培技術(shù)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002：40.

[5] 王秋穎，郭順星.天麻節(jié)料高產(chǎn)栽培技術(shù)的研究[J].中草藥，2001，32(12)：1121-1122.

EffectofDifferentGeo-authenticTreesinSouthwesternYunnanonArmillariamelleaCultivation

HUANGWeijin1，WUXingbo2，WANGQiuying3*

(1.State-ownedForestManagmentStation，F(xiàn)orestryBureauofTengchongCounty，BaoshanCity，YunnanProvince，Yunnan679100；2.ForestryTechnologyPromotionStationofTengchongForestyBureau，BaoshanCity，YunnanProvince，Yunnan679100；3.InstituteofMedicinalPlant，ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege，Beijing100193)

Objective：To screen the suitable trees forArmillariamelleacultivation.Methods：The third-strain medium with 32 kinds of geo-authentic trees was prepared，theA.melleagrowth speed and character of the rhizomorph in these mediums were compared.Results：A.mellea rhizomorph grew vigorously and fastest inSymplocosanomalamedium，the rhizomorph changed from block-like to fan-shaped.In other 20 mediums likeFagussylvatica，A.mellea rihzomorph grew normally.In other 11 mediums likeSyringaoblata，A.melleafailed to grow normally.Conclusion：It is concluded thatS.anomalawas the optimal tree forA.melleacultivation.20 kinds of trees likeF.sylvaticacould be used as third-strain medium ingredients.11 kinds of trees likeS.oblatacould not be used as third-strain medium ingredients.

Armillariamellea；growth rate；rhizomorph；different trees

2015-03-20)

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王秋穎，研究員，研究方向：藥用真菌引種、馴化、栽培；E-mail：qywang@implad.ac.cn

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.5.015