羅春麗，黃明進(jìn)，李金玲，劉紅昌，王華磊，陸翔恩，趙致﹡

(1.貴州大學(xué)，貴州 貴陽(yáng) 550025；2.貴州省中藥材繁育與種植工程實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽(yáng) 550025)

·中藥工業(yè)·

不同炮制工藝對(duì)制首烏外觀性狀及內(nèi)在質(zhì)量的影響△

羅春麗1，2，黃明進(jìn)1，2，李金玲1，2，劉紅昌1，2，王華磊1，2，陸翔恩1，趙致1，2﹡

(1.貴州大學(xué)，貴州 貴陽(yáng) 550025；2.貴州省中藥材繁育與種植工程實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽(yáng) 550025)

目的：以鮮品何首烏為研究對(duì)象，確定合理制首烏炮制加工工藝參數(shù)，為制定制首烏炮制加工標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程提供試驗(yàn)依據(jù)。方法：對(duì)比不同前處理、不同蒸制時(shí)間制首烏外觀性狀及內(nèi)在質(zhì)量變化情況。結(jié)果：采用鮮品直接干燥后用黑豆汁拌勻，燉制制首烏的時(shí)間應(yīng)為44～52 h；鮮品蒸制干燥后再用黑豆汁拌勻，燉制制首烏則需至少燉制48 h以上，這樣才能保證游離蒽醌類成分含量符合要求并相對(duì)穩(wěn)定。結(jié)論：為更加合理地優(yōu)選制首烏工藝并最大限度發(fā)揮藥效，以二苯乙烯苷及蒽醌類成分的含量來(lái)控制制首烏的質(zhì)量有待商榷，是否增加磷脂類成分和多糖的含量作為制首烏的質(zhì)量控制檢測(cè)指標(biāo)有待進(jìn)一步研究完善。

制首烏；鮮品；蒸制時(shí)間；薄層色譜；含量測(cè)定

何首烏為常用中藥，為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的干燥塊根。其生用可解毒、消癰、潤(rùn)腸通便；蒸制后，與生首烏相比其性味、功能、主治均發(fā)生較大變化[1]。《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》[2]和《中華人民共和國(guó)藥典》2010版[3]對(duì)何首烏炮制時(shí)間均未做出明確規(guī)定，使得制首烏質(zhì)量穩(wěn)定性得不到保證。更有甚者，采用加入色素的方式來(lái)制備出符合外觀性狀要求的制首烏，而其內(nèi)在質(zhì)量卻與中華人民共和國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)相差甚遠(yuǎn)。目前制首烏炮制加工最適宜時(shí)間無(wú)法確定，一些研究也只是針對(duì)黑豆汁清蒸法炮制時(shí)間做出試驗(yàn)[4]，目前黑豆汁燉制制首烏時(shí)間還未有一個(gè)明確的結(jié)果。同時(shí)鮮何首烏不同前處理方法所測(cè)得的指標(biāo)含量差異也很大[5]。經(jīng)過(guò)一些學(xué)者對(duì)制首烏黑豆汁制法的研究，得出黑豆汁燉制方法較其他方法所得出的指標(biāo)含量較高，且優(yōu)于中華人民共和國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)[6-7]。為此，筆者采用兩年生何首烏藥材[8]，以鮮藥材入手，對(duì)不同炮制加工方法進(jìn)行對(duì)比研究，在不同時(shí)間段考察制首烏外觀性狀及內(nèi)在質(zhì)量變化情況，以期確定合理制首烏炮制加工工藝參數(shù)，為制定制首烏炮制加工標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程提供試驗(yàn)依據(jù)，為進(jìn)一步規(guī)范制何首烏飲片加工工藝及質(zhì)量控制方法提供參考。

1 材料

1.1 藥材

何首烏為貴州省都勻市王司鎮(zhèn)何首烏種植基地大田種植2年生何首烏鮮藥[4]，由貴州大學(xué)中藥材研究所王華磊教授鑒定為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的干燥塊根；黑豆由貴州大學(xué)中藥材研究所王華磊教授鑒定為豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr.的黑色種子。

1.2 試劑藥品

何首烏對(duì)照藥材、大黃素、大黃素甲醚、二苯乙烯苷對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為120934-201009，110756-200110，110758-20101，110844-201109)；甲醇、乙腈為色譜純；水為純化水；稀鹽酸、硝酸銀溶液、三氯甲烷、乙醇為分析純。

1.3 儀器

CAMAG薄層色譜掃描儀(安捷倫科技有限公司)；Agilent1200高效液相色譜儀；TP-213電子天平(丹佛儀器北京有限公司)；HZT-A500電子天平(福州華志科學(xué)儀器有限公司)；HH-8數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州澳華儀器有限公司)；101-4型電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京科偉永興儀器有限公司)；SX-12-10型箱式電阻爐控制箱(天津市泰斯特有限公司)；KQ-800KDE型超聲波清洗機(jī)(昆山市超聲波儀器有限公司)。

2 方法

2.1 黑豆汁制備方法及用量

取黑豆2 kg，加12倍水浸泡12 h，煮制4 h，得濾液約3 kg。豆渣加水5 kg，煎煮3 h，得濾液約2 kg，合并濾液，備用。

何首烏以干藥材計(jì)，100 kg藥材用黑豆10 kg(約相當(dāng)于黑豆汁25 kg)。

2.2 制首烏工藝條件

2.2.1 取何首烏鮮藥材洗凈，控干水分，切7～9 mm塊，稱重，置烘箱45 ℃左右烘至全干，取出，用黑豆汁拌勻，置非鐵質(zhì)容器內(nèi)，密閉，坐水鍋中隔水燉制64 h。從燉制12 h開始，每隔4 h取樣一次，取出，干燥備用。

2.2.2取何首烏鮮藥材洗凈，控干水分，切7～9 mm塊，稱重，隔水蒸12 h，取出，45 ℃左右烘至全干，取出，用黑豆汁拌勻，置非鐵質(zhì)容器內(nèi)，密閉，坐水鍋隔水燉制64 h。從燉制12 h開始，每隔4 h取樣一次，取出，干燥備用。

以上處理樣品均為同批藥材，制備好后，按2.3項(xiàng)下方法進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，優(yōu)選制首烏的制備條件及工藝參數(shù)。

2.3 制首烏飲片質(zhì)量檢測(cè)

2.3.1 水分測(cè)定 取上述處理制首烏飲片分別粉碎，過(guò)二號(hào)篩，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部水分測(cè)定法項(xiàng)下烘干法(附錄Ⅸ H第一法)測(cè)定。

2.3.2 總灰分含量測(cè)定 按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部灰分測(cè)定法項(xiàng)下總灰分測(cè)定法(附錄Ⅸ K)測(cè)定。

2.3.3 浸出物的含量測(cè)定 按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部(附錄Ⅹ A)測(cè)定。

2.3.4 薄層檢查 按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部薄層色譜法(附錄Ⅵ B)測(cè)定。

2.3.5 制首烏中二苯乙烯苷及蒽醌類成分的含量測(cè)定對(duì)照品、供試品溶液的制備及測(cè)定按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部制首烏項(xiàng)下及高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測(cè)定。

3 結(jié)果

3.1 不同燉制時(shí)間制首烏外觀性狀對(duì)比

以上處理樣品均為同批藥材，制備好后，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010版何首烏項(xiàng)下測(cè)定方法檢測(cè)。不同燉制時(shí)間制首烏外觀性狀對(duì)比見圖1。

從外觀性狀來(lái)看，黑豆汁燉制鮮首烏干燥品，若要達(dá)到中華人民共和國(guó)藥典要求，需蒸制40 h以上；而黑豆汁燉制鮮首烏蒸制品則在12 h左右即可達(dá)到性狀要求。不同處理及燉制時(shí)間制首烏的水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物等測(cè)定均優(yōu)于《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)。

注：A.黑豆汁燉制鮮首烏干燥品；B.黑豆汁燉制鮮首烏蒸制品。圖1 不同燉制時(shí)間制首烏外觀性狀

3.2 不同燉制時(shí)間制首烏薄層色譜

薄層色譜顯示，不同處理制首烏的顯色斑點(diǎn)明顯較何首烏對(duì)照藥材及同批何首烏藥材生品少，其中燉制48 h后，制首烏中均顯示出現(xiàn)一明顯的綠色斑點(diǎn)，提示何首烏經(jīng)不同炮制處理后，內(nèi)在質(zhì)量發(fā)生變化。見圖2。

注：A.黑豆汁燉制鮮首烏干燥品0～48 h；B.黑豆汁燉制鮮首烏蒸制品0～48 h；C.黑豆汁燉制鮮首烏干燥品、黑豆汁燉制鮮首烏蒸制品48～64 h；3～7.黑豆汁燉制鮮首烏干燥品；8～12.黑豆汁燉制鮮首烏蒸制品。圖2 不同前處理何首烏燉制0～64 h薄層色譜對(duì)比

由圖2及薄層色譜顯示，前處理為鮮何首烏直接干燥后與黑豆汁拌勻，燉制品中不同燉制時(shí)間制首烏中大黃素、大黃素甲醚含量均明顯優(yōu)于何首烏生品及對(duì)照藥材，且隨著燉制時(shí)間的延長(zhǎng)，顏色呈現(xiàn)加深的趨勢(shì)，燉制32 h后有一綠色斑點(diǎn)顯色較明顯；前處理為鮮何首烏蒸制12 h后干燥，再與黑豆汁拌勻，燉制品中大黃素、大黃素甲醚顯色斑點(diǎn)顏色相對(duì)較淺，隨著燉制時(shí)間的延長(zhǎng)，顏色呈現(xiàn)逐漸加深的趨勢(shì)，燉制16、36、44、48 h綠色斑點(diǎn)顯色明顯，尤其在48 h燉制品中大黃素、大黃素甲醚色班明顯加深，提示該成分含量明顯增加，48 h后顏色變淺，提示此成分在先蒸制后拌黑豆汁燉制48 h達(dá)峰值。

3.3 二苯乙烯苷及游離蒽醌類成分含量測(cè)定

含量測(cè)定結(jié)果見表1。

結(jié)果顯示，不同前處理何首烏二苯乙烯苷含量隨著燉制時(shí)間的延長(zhǎng)均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)。不同之處在于，前處理采用先蒸制后干燥，在燉制52 h后，二苯乙烯苷含量有所回升，且相對(duì)穩(wěn)定；而前處理采取直接烘干，在燉制52 h時(shí)含量升高，之后呈下降趨勢(shì)。就整個(gè)變化過(guò)程來(lái)看，先蒸后干燥處理，不同燉制時(shí)間二苯乙烯苷含量均高于直接干燥處理的。

表1 不同前處理何首烏不同燉制時(shí)間指標(biāo)成分含量測(cè)定

不同前處理何首烏游離蒽醌類成分含量變化隨著燉制時(shí)間的延長(zhǎng)均呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)。就整個(gè)變化過(guò)程來(lái)看，直接干燥處理的不同燉制時(shí)間游離蒽醌類成分含量明顯高于先蒸后干燥處理的。見圖3。

注：A.二苯乙烯苷隨時(shí)間變化趨勢(shì)；B.游離蒽醌含量隨時(shí)間變化趨勢(shì)。圖3 不同前處理何首烏不同燉制時(shí)間指標(biāo)性成分含量變化趨勢(shì)

4 結(jié)論

定性研究結(jié)果顯示，鮮何首烏直接干燥后與黑豆汁拌勻，燉制品由12 h的黃棕色逐漸變?yōu)?6 h的黑色。鮮首烏蒸制后干燥再與黑豆汁拌勻，燉制品由12 h的黑褐色至56 h的烏黑發(fā)亮。從外觀性狀來(lái)看，后者明顯優(yōu)于前者；而薄層色譜就其游離蒽醌類成分及二苯乙烯苷的顯色斑點(diǎn)來(lái)看，則是前者優(yōu)于后者。

含量測(cè)定結(jié)果顯示，就整個(gè)蒸制時(shí)間變化范圍來(lái)看，先蒸后干燥處理，不同燉制時(shí)間二苯乙烯苷含量均高于直接干燥處理的；而游離蒽醌類成分含量則是直接干燥處理明顯高于先蒸后干燥處理的。

直接干燥后用黑豆汁拌勻，燉制制首烏要符合《中華人民共和國(guó)藥典》2010版及傳統(tǒng)對(duì)制首烏的外觀要求則至少需燉制44 h以上。要達(dá)到《中華人民共和國(guó)藥典》2010版對(duì)制首烏指標(biāo)性成分含量要求，則需燉制16～52 h才能保證二苯乙烯苷及游離蒽醌類成分含量相對(duì)穩(wěn)定。故以《中華人民共和國(guó)藥典》2010版為依據(jù)，采用直接干燥后用黑豆汁拌勻燉制制首烏，燉制時(shí)間應(yīng)為44～52 h。

5 討論

2.2.1方法為《中華人民共和國(guó)藥典》2010版收載方法，以《中華人民共和國(guó)藥典》2010版為依據(jù)，采用直接干燥后用黑豆汁拌勻燉制制首烏，燉制時(shí)間應(yīng)為44～52 h。2.2.2方法采用先蒸制干燥后再用黑豆汁拌勻，燉制制首烏12 h以上的便能符合《中華人民共和國(guó)藥典》2010版及傳統(tǒng)對(duì)制首烏的外觀要求，而要達(dá)到對(duì)制首烏指標(biāo)性成分含量要求，則需至少燉制48 h以上，才能保證游離蒽醌類成分含量相對(duì)穩(wěn)定。

何首烏生品有解毒、消癰、截瘧、潤(rùn)腸通便的功能；制首烏主要功能為補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋，用于血虛萎黃、眩暈耳鳴、須發(fā)早白、腰膝酸軟、肢體麻木、崩漏帶下、久瘧體虛、高血脂癥。僅以二苯乙烯苷及游離蒽醌類成分作為制首烏的質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo)，難以解釋制首烏與生首烏相比其功能、主治均發(fā)生的較大變化。功能、主治均存在明顯差異，則提示其物質(zhì)基礎(chǔ)存在明顯差異。因而筆者認(rèn)為，用二苯乙烯苷及游離蒽醌類成分的含量來(lái)控制制首烏的質(zhì)量有待商榷，應(yīng)選擇與藥效相關(guān)的有效成分而并非指標(biāo)性成分含量來(lái)控制制首烏質(zhì)量。為更加合理地優(yōu)選制首烏工藝并最大限度發(fā)揮藥效，是否增加測(cè)定磷脂類成分和多糖的含量作為制首烏的質(zhì)量控制檢測(cè)指標(biāo)有待進(jìn)一步研究完善。

[1] 王孝濤.歷代中藥炮制法匯典：現(xiàn)代部分[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1966.

[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局.全國(guó)中藥炮制規(guī)范[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1988.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

[4] 張英華，胡馨，王平，等.何首烏炮制工藝的研究[J].中成藥，2005，27(8)：916-919.

[5] 劉振麗，宋志前，李淑莉，等.何首烏凈選加工、切制和干燥方法對(duì)化學(xué)成分的影響[J].中草藥，2004，35(4)：404-406.

[6] 陳慶堂，卓麗紅，徐文，等.何首烏炮制過(guò)程中5種化學(xué)成分的含量變化[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18(5)：66-71.

[7] 馬長(zhǎng)華，王金星.何首烏炮制前后二苯乙烯苷含量的比較[J].中藥材，1995，18(7)：350.

[8] 羅春麗，陸翔恩，趙致，等.綜合評(píng)分法優(yōu)選何首烏合理采收期[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41(9)：66-70.

EffectsofdifferentProcessingTechnologyonPreparedRadixPolygoniMultifloriAppearanceandQuality

LUOChunli1，2，HUANGMingjin1，2，LIJinling1，2，LIUHongchang1，2，WANGHualei1，2，LUXiang’en1，ZHAOZhi1，2﹡

(1.GuizhouUniversity，Guiyang，Guizhou550025，China；2.GuizhouLaboratoryforBreedingandPlantingEngineeringofTraditionnalChineseMedicinalMaterials，Guiyang，Guizhou550025，China)

Objective：With fresh products ofPolygonummultiflorumas a research object，the reasonable processing parameters of Prepared Radix Polygoni Multiflori were determined to provide the experimental basis for the preparation of custom Shouwu processing standard operating procedures.Methods：The changes of Prepared Radix Polygoni Multiflori appearance and quality were compared by different treatment and steamed time..Results：The optimal stewing time for fresh directly drying drug mixed with black bean was 44-52 hours.For drug that freshly steamed then dried the stewing time was at least 48 hours.in order to ensure the content of anthraquinones to meet the requirements and stay relatively stable.Conclusion：It is questionable that only the content of two stilbene glucoside and anthraquinones in Radix Polygoni Multiflori were select to control the quality，considering more reasonable processing techonogy for drug efficacy.Phospholipid and polysaccharide may be added as the quality control of Prepared Radix Polygoni Multiflori.

Prepared Radix Polygoni Multiflori；fresh product；steaming time；TLC；content etermination

2014-12-31)

國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2009BAI74B01)；黔科合重大專項(xiàng)字[(2008)6022]；黔發(fā)改高技[2009]2805；黔科合人才團(tuán)隊(duì)[2010]4006；黔科合計(jì)Z字[2010]4015；黔人領(lǐng)發(fā)[2013]15號(hào)

*

趙致，教授，研究方向：藥用植物生產(chǎn)理論及技術(shù)研究；E-mail：zzhao@gzu.edu.cn

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.10.018