蘇付保，黎健杏，蘭健花，秦鳳梅，溫中林

(廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院 林業(yè)工程系，廣西 柳州 545004)

喜樹(Camptotheca acuminate Decne)各器官中提取的喜樹堿及其衍生物，是醫(yī)療上常用的抗腫瘤和抗艾滋病的藥劑。楊磊等研究表明:喜樹各組織中以葉片的喜樹堿含量最高[1];郭勇等研究表明:嫩葉中喜樹堿含量極顯著高于同期的成熟葉[2]。因此，苗期高效栽培將成為提供大量高喜樹堿含量原料的重要途徑。王博文等研究表明:輕度遮蔭(透光60%)可提高喜樹堿含量[3];吳子龍、于洋等研究表明:接種叢枝菌能有效提高喜樹幼苗生物量與堿的含量[4－5];牧文等研究表明:葉面噴施50 mg/L濃度的水楊酸能有效提高喜樹堿含量[6];邢軍會(huì)、孫世芹等在砂盤中栽培表明:在適當(dāng)?shù)牡偷街邢矘鋲A含量高，而在適當(dāng)?shù)母叩街邢矘溆酌缟锪看骩7－8];魏煥勇研究認(rèn)為:100株/m2時(shí)喜樹幼苗的單位面積喜樹堿產(chǎn)量最高，而25株/m2時(shí)喜樹幼苗生物量大[9]?，F(xiàn)以廣西13個(gè)地點(diǎn)的45個(gè)喜樹單株及當(dāng)年生播種苗和留床苗為試材，研究不同單株喜樹堿含量差異及密度、施肥、截干對(duì)喜樹葉片生物量和喜樹堿含量的影響，總結(jié)喜樹苗期高效栽培的幾項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在廣西生態(tài)工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院苗圃，北緯 24°28'05″～24°28'06″，東經(jīng) 109°23'02″～109°23'03″，海拔123～126 m。年均氣溫20.1℃，極端高溫39.4℃，極端低溫－5.8℃;年均降水1429.7 mm，年均空氣相對(duì)濕度78%。土壤為紅壤，土層厚度≥100 cm，呈酸性。

1.2 材料來源

建圃材料來自廣西興安縣、靈川縣、永?？h、天峨縣、南丹縣、東蘭縣、隆林縣新州鎮(zhèn)、隆林縣德峨鄉(xiāng)、凌云縣、西林縣、金秀縣、田林縣和德?？h，共45個(gè)單株[16]。培育嫁接用砧木的種子來源于天峨縣。

1.3 研究方法

1.3.1 建立種質(zhì)資源圃

在廣西區(qū)內(nèi)根據(jù)喜樹分布情況選13個(gè)采集點(diǎn)，采集枝條通過嫁接育苗在苗圃建立45個(gè)喜樹單株的種質(zhì)資源圃。

1.3.2 當(dāng)年生播種苗密度與施肥試驗(yàn)

幼苗高約5 cm時(shí)，按Ⅰ—33株/m2、Ⅱ—50株/m2和Ⅲ—67株/m2等3個(gè)密度種植，每個(gè)密度3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)每個(gè)密度移植9行。

施肥試驗(yàn)在50株/m2的密度下進(jìn)行，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。移植成活后，于6月、7月和8月中旬在種植行內(nèi)打孔施肥，共9個(gè)處理。分別為:1(1N1P1K 26.7 g/m2)、2(1N1P1K 33.3 g/m2)、3(1N1P1K 26.7 g/m2+B 6.7 g/m2)、4(1N1P1K 33.3 g/m2+B 6.7 g/m2)、5(1.5N1P1K 26.7 g/m2)、6(1.5N1P1K 33.3 g/m2)、7(1.5N1P1K 26.7 g/m2+B 6.7 g/m2)、8(1.5N1P1K 33.3 g/m2+B 6.7 g/m2)和 CK(對(duì)照)，其中 N指尿素、P指過磷酸鈣、K指硫酸鉀、B指硼砂。

1.3.3 留床苗截干與密度試驗(yàn)

春季萌芽前對(duì)留床苗進(jìn)行截干處理，截干高度分別為A—10 cm、B—15 cm、C—20 cm和D—25 cm，設(shè)置3個(gè)重復(fù)。同一重復(fù)中每個(gè)截干高度1行，每行10株。

在另一苗床，4種截干高度設(shè)計(jì)G—5株/行(17株/m2)、H—10株/行(33株/m2)等2種密度，設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.3.4 數(shù)據(jù)測(cè)定

⑴生物量測(cè)定。當(dāng)年生播種苗分別在8月上旬、10月上旬和落葉前采集枝葉，測(cè)定葉片生物量;留床苗分別于5月和7月采集枝葉，測(cè)定葉片生物量。

⑵喜樹堿含量測(cè)定。45個(gè)單株葉片樣品7月5日從種質(zhì)資源圃采集，當(dāng)年生播種苗密度與施肥試驗(yàn)的葉片樣品于9月30日從試驗(yàn)區(qū)采集。樣品采集后放在干燥的室內(nèi)自然風(fēng)干，并送專業(yè)檢驗(yàn)所檢測(cè)。檢測(cè)儀器為Agilent 1100高效液相色譜儀;檢測(cè)重復(fù)數(shù)為3次;色譜條件為色譜柱Agilent C18，柱溫25℃，流速10 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 254 nm，進(jìn)樣量 10 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同單株對(duì)喜樹堿含量的影響

方差分析和多重比較表明，45個(gè)喜樹單株的喜樹堿含量有極顯著的差異，其中排名第1的德保1與其余44個(gè)單株有極顯著差異;排名第2的西林3與排名4～45的單株有極顯著差異，與排名第3的金秀1無顯著差異;排名第3的金秀1與排名4～45的單株有極顯著差異;排名第4的興安1與排名6～45的單株有極顯著差異，與排名第5的德保2無顯著差異;排名第5的德保2與排名6～45的單株有極顯著差異。綜合考慮不同單株的喜樹堿含量、單株之間含量差異顯著性和梯度關(guān)系，篩選出德保1、西林3、金秀1、興安1、德保2等5個(gè)優(yōu)良單株，其喜樹堿含量分別是45個(gè)單株平均值的199.9%、167.8%、166.1%、145.0%和144.4%[10]。

2.2 密度與施肥對(duì)葉片生物量和喜樹堿含量的影響

2.2.1 密度與施肥對(duì)當(dāng)年生播種苗葉片生物量的影響

表較比重多量物生片葉樹喜合組肥施與度密同不1表）/行g(shù)（值差重鮮片葉合組肥施與度密肥施與度密鮮片葉合組1#K C C 2#K C!3#1"2"4#3"1!2!8#5#4"3!7#8"4!5!5"7"6#8!6"7!6!）/行g(shù)（重1 5 3 0 3 3 4 0 5 0#8 8#9 0#8 9#1 0 5#1 2 9#1 3 0#1 4 4#1 4 7#1 5 0#1 6 0#1 6 7#1 8 7#1 9 0#1 9 3#1 9 4#1 9 8#2 0 7#2 3 6#2 3 9#2 4 4）6 2 5（K C#4 2 9 3 2 3 9 4 9#8 7#8 9#9 7#1 0 4#1 2 8#1 2 9#1 4 3#1 4 6#1 4 9#1 5 9#1 6 6#1 8 6#1 8 9#1 9 2#1 9 3#1 9 7#2 0 6#2 3 5#2 3 8#2 4 3）6 2 6（1#2 5 2 8 3 5 4 5#8 3#8 5#9 3#1 0 0#1 2 4#1 2 5#1 3 9#1 4 2#1 4 5#1 5 5#1 6 2#1 8 2#1 8 5#1 8 8#1 8 9#1 9 3#2 0 2#2 3 1#2 3 4#2 3 9）6 3 0（K C"3 1 0 2 0 5 8*60*#6 8#7 5#9 9#1 0 0#1 1 4#1 1 7#1 2 0#1 3 0#1 3 7#1 5 7#1 6 0#1 6 3#1 6 4#1 6 8#1 7 7#2 0 6#2 0 9#2 1 4）6 5 5（2#7 1 7 5 5*57*65*#7 2#9 6#9 7#1 1 1#1 1 4#1 1 7#1 2 7#1 3 4#1 5 4#1 5 7#1 6 0#1 6 1#1 6 5#1 7 4#2 0 3#2 0 6#2 1 1）6 5 8（K C!1 0 4 8 5 0 5 8*65*#8 9#9 0#1 0 4#1 0 7#1 1 0#1 2 0#1 2 7#1 4 7#1 5 0#1 5 3#1 5 4#1 5 8#1 6 7#1 9 6#1 9 9#2 0 4）6 6 5（3#3 8 4 0 4 8 5 5*#7 9#8 0#9 4#9 7#1 0 0#1 1 0#1 1 7#1 3 7#1 4 0#1 4 3#1 4 4#1 4 8#1 5 7#1 8 6#1 8 9#1 9 4）6 7 5（1"2 1 0 1 7 4 1 4 2 5 6*59*62*#7 2#7 9#9 9#1 0 2#1 0 5#1 0 6#1 1 0#1 1 9#1 4 8#1 5 1#1 5 6）7 1 3（2"8 1 5 3 9 4 0 5 4*57*60*#7 0#7 7#9 7#1 0 0#1 0 3#1 0 4#1 0 8#1 1 7#1 4 6#1 4 9#1 5 4）7 1 5（4#7 3 1 3 2 4 6 4 9 5 2*62*#6 9#8 9#9 2#9 5#9 6#1 0 0#1 0 9#1 3 8#1 4 1#1 4 6）7 2 3（3"2 4 2 5 3 9 4 2 4 5 5 5*62*#8 2#8 5#8 8#8 9#9 3#1 0 2#1 3 1#1 3 4#1 3 9）3 0（1!1 1 5 1 8 2 1 3 1 3 8 5 8*61*64*65*#6 9#7 8#1 0 7#1 1 0#1 1 5）7 5 4（2!1 4 1 7 2 0 3 0 3 7 5 7*60*63*64*#6 8#7 7#1 0 6#1 0 9#1 1 4）7 5 5（8#3 6 1 6 2 3 4 3 4 6 4 9 5 0 5 4*63*#9 2#9 5#1 0 0）7 6 9（5#3 1 3 2 0 4 0 4 3 4 6 4 7 5 1*6 0*#8 9#9 2#9 7）7 7 2（4"1 0 1 7 3 7 4 0 4 3 4 4 4 8 5 7*#8 6#8 9#9 4）7 7 5（3!7 2 7 3 0 3 3 3 4 3 8 4 7#7 6#7 9#8 4）7 8 5（7#2 0 2 3 2 6 2 7 3 1 4 0#6 9#7 2#7 7）7 9 2（8"3 6 7 1 1 2 0 4 9 5 2*57*）8 1 2（4!3 4 8 1 7 4 6 4 9 5 4*）8 1 5（5!1 5 1 4 4 3 4 6 5 1*）8 1 8（5"4 1 3 4 2 4 5 5 0）8 1 9（7"9 3 8 4 1 4 6）8 2 3（6#2 9 3 2 3 7）8 3 2（8!3 8）8 6 1（6"5）8 6 4（7!8 6 9）（6!。異差著顯有示表*注，標(biāo)異差著顯極有示#表注6 7.6 2；2.標(biāo)=）0.0 1（S D L，5 0.7 8=）0.0 5（S D L：1.注

方差分析和多重比較表明(見表1)，27個(gè)密度與施肥組合的葉片生物量有極顯著差異，其中排名第1的Ⅱ6組合與排名9～27的組合有極顯著差異，與排名6～8的組合有顯著差異，與排名第2～5的組合無顯著差異;排名第2的Ⅱ7組合與排名10～27的組合有極顯著差異，與排名第9的組合有顯著差異，與排名第3～8的組合無顯著差異;排名第3的Ⅲ6組合與排名10～27的組合有極顯著差異，與排名第4～9的組合無顯著差異。綜合考慮不同組合的生物量、組合之間的差異顯著性和梯度關(guān)系，Ⅱ6組合(50株+1.5N1P1K 33.3 g/m2)、Ⅱ7組合(50株+1.5N1P1K 26.7 g+B 6.7 g/m2)與Ⅲ6組合(67株+1.5N1P1K 33.3 g/m2)效果好。

2.2.2 密度與施肥對(duì)當(dāng)年生播種苗喜樹堿含量的影響

(1)密度對(duì)當(dāng)年生播種苗喜樹堿含量的影響

方差分析和多重比較表明(見表2)，3種密度的喜樹堿含量有極顯著差異，33株/m2(Ⅰ)、50株/m2(Ⅱ)和67株/m2(Ⅲ)等3種密度中以50株/m2的喜樹堿含量最高，其中B和A與C之間、B與A之間有極顯著差異。與魏煥勇[9]“400株/m2、100株/m2、44株/m2、25株/m2和16株/m2等5種密度中以100株/m2的喜樹堿含量最高”的研究結(jié)論略有不同。這可能與測(cè)定時(shí)的苗齡不同相關(guān)。

表2 不同密度喜樹堿含量多重比較表

(2)施肥對(duì)當(dāng)年生播種苗喜樹堿含量的影響

方差分析和多重比較表明(見表3)，9種施肥處理的喜樹堿含量有極顯著差異，其中處理1與其它8個(gè)處理間有極顯著差異，處理3與其它7個(gè)處理間也有極顯著差異，且處理1(1N1P1K 26.7 g/m2)和處理3(1N1P1K 26.7 g/m2+B 6.7 g/m2)的喜樹堿含量明顯高于其它處理，表明低氮比例和適當(dāng)?shù)陀昧渴┓侍幚淼南矘鋲A含量高。這與邢軍會(huì)、孫世芹等[7－8]的研究結(jié)論是一致的。

表3 不同施肥處理喜樹堿含量多重比較表

綜合考慮施肥對(duì)葉片生物量和喜樹堿含量的影響，當(dāng)年生播種苗以按1N∶1P∶1K的比例施肥約30 g/m2為宜。

2.3 截干高度與密度組合對(duì)留床苗葉片生物量的影響

方差分析和多重比較表明(詳見文獻(xiàn)[11])，8種截干高度與密度組合的葉片生長(zhǎng)量有顯著差異，其中排名第1的DH組合與排名5～8的組合有極顯著差異，與排名3～4的組合有顯著差異，與排名第2的CH組合無顯著差異;排名第2的CH組合與排名7～8的組合有極顯著差異，與排名第5～6的組合有顯著差異，與排名第3～4的組合無顯著差異。綜合考慮不同組合的生物量、組合之間的差異顯著性和梯度關(guān)系，以保留10株/行(33株/m2)且在25 cm和20 cm的高度截干等兩個(gè)組合(DH和CH組合)的效果好。

3 結(jié)論

3.1 高效栽培應(yīng)選用優(yōu)良單株的繁殖材料

在廣西13個(gè)地點(diǎn)采集的45個(gè)喜樹單株的喜樹堿含量有極顯著差異，綜合考慮不同單株的喜樹堿含量、單株之間含量差異顯著性和梯度關(guān)系，篩選出德保1、西林3、金秀1、興安1、德保2等5個(gè)優(yōu)良單株，其喜樹堿含量分別為45個(gè)單株平均值的199.9%、167.8%和166.1%、145.0%和144.4%。故，喜樹高效栽培應(yīng)選用德保1、西林3、金秀1、興安1、德保2等優(yōu)良單株的材料進(jìn)行繁殖。

3.2 當(dāng)年生苗高效栽培以50株/m2+施等比例NPK約30 g/m2為宜

不同密度與施肥組合對(duì)葉片生物量有顯著差異，綜合考慮不同組合的生物量、組合之間的差異顯著性和梯度關(guān)系，50株 +1.5N1P1K 33.3 g/m2、50株 +1.5N1P1K 26.7 g/m2+B 6.7 g/m2與67株 +1.5N1P1K 33.3 g/m2等3個(gè)組合效果好;不同密度與施肥對(duì)葉片的喜樹堿含量也有顯著影響，33株/m2、50株/m2和67株/m2等3種密度以50株/m2的喜樹堿含量最高;9個(gè)施肥處理中1N1P1K 26.7 g/m2和1N1P1K 26.7 g/m2+B 6.7 g/m2等兩個(gè)處理明顯高于其它處理。綜合考慮密度與施肥對(duì)喜樹苗期葉片生物量和喜樹堿含量的影響，當(dāng)年生苗以50株/m2+施等比例NPK約30 g/m2為宜。

3.3 留床苗高效栽培以33株/m2+20～25 cm處截干為好

不同截干高度與密度組合的葉片生長(zhǎng)量有顯著差異，綜合考慮不同組合的生物量、組合之間的差異顯著性和梯度關(guān)系，以保留10株/行(33株/m2)且在25 cm和20 cm的高度截干等兩個(gè)組合的效果好。故，喜樹留床苗高效栽培以33株/m2+20～25 cm處截干為好。

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