華洵璐 錢仁界 張憲中 匡群 孫梅 張一平

摘要 [目的]研究不同芽孢桿菌復(fù)合制劑對斷奶仔豬生長、腹瀉和飼料消化率的影響。[方法]對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加“凝結(jié)芽孢桿菌+巨大芽孢桿菌”、“酪酸菌+巨大芽孢桿菌”、“凝結(jié)芽孢桿菌+酪酸菌”和“凝結(jié)芽孢桿菌+酪酸菌+巨大芽孢桿菌”復(fù)合制劑，添加量0.2%，飼喂43 d，研究芽孢桿菌復(fù)合制劑對斷奶仔豬生長、腹瀉和飼料消化率的影響。[結(jié)果]各試驗(yàn)組均能顯著提高平均日增重、增重率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率，顯著降低攝食率和飼料系數(shù)（P<0.05），其中試驗(yàn)Ⅲ組和Ⅳ組又比試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組更顯著（P<0.05）。各試驗(yàn)組均能顯著降低腹瀉率和糞便大腸桿菌數(shù)量，顯著提高糞便乳酸菌數(shù)量（P<0.05），其中試驗(yàn)Ⅲ組和Ⅳ組在降低大腸桿菌上比試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組更顯著（P<0.05）。各試驗(yàn)組均能顯著提高粗蛋白和粗纖維的消化率（P<0.05），但對粗脂肪、粗灰分和磷的消化吸收無影響（P>0.05），其中試驗(yàn)Ⅳ組的粗蛋白消化率最高（P<0.05）。[結(jié)論]試驗(yàn)Ⅳ組采用的復(fù)合制劑養(yǎng)殖效果最為理想，經(jīng)濟(jì)效益最為顯著，具有一定的推廣應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞 芽孢桿菌;斷奶仔豬;生長性能;腹瀉;飼料消化率

中圖分類號 S963.73 ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A ?文章編號 0517-6611（2015）03-166-05

Effects of Different Bacillus Complex Preparation on the Growth Performance， Diarrhea and Feed Digestibility in Weaned Piglets

HUA Xunlu¹， QIAN Renjie²， ZHANG Xianzhong³， ZHANG Yiping¹* et al

（1. Jiangsu Limited Company of Suwei Microbiology， Wuxi， Jiangsu 214063; 2. Wuxi Nanyang Limited Company of Agricultural and Livestock Industry， Wuxi， Jiangsu 214189; 3.Wuxi Master Generalization Station of Fishery and Animal Husbandry， Wuxi， Jiangsu 214036）

Abstract [Objective] This paper was conducted to investigate the effects of a diet supplemented various Bacillus complex preparation on the growth performance， diarrhea and feed digestibility in weaned piglets. [Method] The control group was fed a basal diet. The experiment group Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ， Ⅳ were supplemented “Bacillus coagulans + Bacillus megaterium”， ”Clostridium butyricun + Bacillus megaterium”， “Bacillus coagulans + Clostridium butyricun” and “Bacillus coagulans + Clostridium butyricun + Bacillus megaterium” complex preparation respectively. The supplemented content was 0.2%， and the feeding time was 43 days. Effects of different Bacillus complex preparation on weaned piglets growth， diarrhea and feed digestibility were studied. [Result] All of the experiment groups significantly increased the average daily gain， weight gain rate， specific growth rate and protein efficiency ratio （P<0.05）; significantly decreased the feeding rate and the feed coefficient ratio （P<0.05）; and the experiment group Ⅲ and Ⅳ appeared more significantly than the experiment group Ⅰ and Ⅱ（P<005）. All of the experiment groups significantly decreased the diarrhea rate and the fecal Escherichia coli amount （P<0.05）， significantly increased the fecal Lactic acid bacteria amount （P<0.05）， and the experiment group Ⅲ and Ⅳ appeared more significantly than the experiment group Ⅰ and Ⅱ in the reduce of fecal Escherichia coli amount （P<0.05）. All of the experiment groups significantly increased the digestion rate of crude protein and crude fiber （P<0.05）， but had no effects on the digestion of crude fat， crude ash and total phosphorus （P>0.05）， and the crude protein digestion rate of experiment group Ⅳwas the highest （P<0.05）. [Conclusion] The complex preparation used in experiment group Ⅳhad the best breeding effect， the highest economic benefit， and it had the value of extension and application.

Key words Bacillus; Weaned piglets; Growth performance; Diarrhea; Feed digestibility

芽孢桿菌對培養(yǎng)條件要求簡單，產(chǎn)生的孢子環(huán)境耐受性強(qiáng)，進(jìn)入動物腸道后對動物產(chǎn)生多種益生功效。這些特點(diǎn)使芽孢桿菌成為理想的飼用微生物添加劑，目前普遍使用的主要是產(chǎn)有機(jī)酸的芽孢桿菌和好氧的芽孢桿菌^[1] 。

凝結(jié)芽孢桿菌為兼性厭氧的有孢子性乳酸菌，在動物腸道內(nèi)能通過產(chǎn)生大量乳酸、抗菌凝固素、氨基酸、維生素和多種消化酶，有效抑制有害菌生長，改良腸道微生態(tài)平衡，促進(jìn)腸道發(fā)育和增強(qiáng)腸道功能，促進(jìn)飼料消化吸收，降低腹瀉率和飼料系數(shù)^[2] 。酪酸菌（又稱酪酸梭狀芽孢桿菌、丁酸梭菌）為革蘭氏陽性厭氧桿菌，能產(chǎn)生對機(jī)體具有保健作用的丁酸、B族維生素和維生素K等物質(zhì)，促進(jìn)腸道上皮組織細(xì)胞再生和修復(fù)，促進(jìn)有益菌增殖，抑制有害菌生長，減少腸毒素發(fā)生，提高飼料利用率^[3] 。巨大芽孢桿菌為產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽性好氧菌，具有豐富的胞外酶系，生物奪氧能力強(qiáng)，能保持腸道厭氧環(huán)境，促進(jìn)動物生長，并能降低氨氣和硫化氫的排放，改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境^[4-5]。

最新研究表明，不同的菌種在動物體內(nèi)的作用機(jī)制不同;動物體內(nèi)的生物環(huán)境在不斷變化，不同的作用機(jī)制所適應(yīng)的最佳環(huán)境也不同^[6] 。多菌種產(chǎn)品能在變化的生物環(huán)境中充分利用不同菌種之間的協(xié)同機(jī)制和競爭抑制效應(yīng)，達(dá)到比單菌種產(chǎn)品更好的效果^[7] 。因此，由2種或2種以上不同菌種組成的復(fù)合制劑成為目前微生態(tài)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)^[8]。

雖然凝結(jié)芽孢桿菌、酪酸菌與巨大芽孢桿菌這3種菌均已在動物養(yǎng)殖上取得了良好效果^[9-11]，但迄今為止尚未見將這3種菌進(jìn)行復(fù)配后用于動物養(yǎng)殖的報道。因此，筆者以斷奶仔豬為試驗(yàn)對象，研究了這3種菌的不同組合方式對動物生長、腹瀉和飼料消化率的影響，以期開發(fā)出優(yōu)勢互補(bǔ)、協(xié)同增效、益生作用更加顯著的新型復(fù)合微生物制劑產(chǎn)品，以促進(jìn)綠色生態(tài)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 微生物制劑。

凝結(jié)芽孢桿菌（Bacillus coagulans JSSWLA）、巨大芽孢桿菌（Bacillus megaterium JSSWJD2F5）、酪酸菌（Clostridium butyricun CB7）。各菌株分別經(jīng)過高密度發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵液離心獲得菌體，菌體拌以適當(dāng)輔料低溫烘干而制得菌劑，菌劑中活菌含量5.0×10⁸ cfu/g左右。

1號芽孢桿菌制劑：由凝結(jié)芽孢桿菌菌劑與巨大芽孢桿菌菌劑等量混合均勻而得，活菌濃度≥2.5×10⁸ cfu/g;

2號芽孢桿菌制劑：由酪酸菌菌劑與巨大芽孢桿菌菌劑等量混合均勻而得，活菌濃度≥2.5×10⁸ cfu/g;

3號芽孢桿菌制劑：由凝結(jié)芽孢桿菌菌劑與酪酸菌菌劑等量混合均勻而得，活菌濃度≥2.5×10⁸ cfu/g;

4號芽孢桿菌制劑：由凝結(jié)芽孢桿菌、酪酸菌和巨大芽孢桿菌菌劑等量混合均勻而得，活菌濃度≥1.5×10⁸ cfu/g。

以上試驗(yàn)用微生物制劑均由江蘇省蘇微微生物研究有限公司提供。

1.1.2 試驗(yàn)動物。

試驗(yàn)采用杜×長×大三元雜交斷奶仔豬，由無錫市南洋農(nóng)畜業(yè)有限公司提供。選取發(fā)育良好、食欲旺盛、健康、遺傳基礎(chǔ)相似、初始體質(zhì)量10～13 kg、（45±2）日齡的斷奶仔豬150頭，隨機(jī)分為5組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)10頭仔豬，公母各半。

1.1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)。

試驗(yàn)在無錫市南洋農(nóng)畜業(yè)有限公司洛社鎮(zhèn)雙廟村養(yǎng)殖基地內(nèi)完成。

1.1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

共設(shè)置4個試驗(yàn)組和1個對照組：①試驗(yàn)Ⅰ組：基礎(chǔ)日糧+0.2%的1號芽孢桿菌制劑：②試驗(yàn)Ⅱ組：基礎(chǔ)日糧+0.2%的2號芽孢桿菌制劑;③試驗(yàn)Ⅲ組：基礎(chǔ)日糧+0.2%的3號芽孢桿菌制劑;④試驗(yàn)Ⅳ組：基礎(chǔ)日糧+0.2%的4號芽孢桿菌制劑;⑤對照組：飼喂基礎(chǔ)日糧。添加量為每日投入基礎(chǔ)日糧重量的2%。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)日糧。根據(jù)中國瘦肉型豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（GB847187）以及江蘇省養(yǎng)豬實(shí)際，確定斷奶仔豬全價日糧的營養(yǎng)水平?；A(chǔ)日糧確定為玉米-豆粕-魚粉型，占全價日糧的96%，添加劑預(yù)混料占全價日糧的4%。日糧配比及營養(yǎng)水平見下表1。

表1 日糧配比與營養(yǎng)水平

日糧配比對照組試驗(yàn)組營養(yǎng)水平含量

玉米∥%58.058.0消化能∥MJ/kg13.85

豆粕∥%25.025.0代謝能∥MJ/kg13.31

魚粉∥%5.05.0粗蛋白∥%19.00

乳清粉∥%5.05.0粗纖維∥%2.50

大豆油∥%1.01.0粗脂肪∥%5.00

磷酸氫鈣∥%0.60.6賴氨酸∥%0.78

石粉∥%1.01.0蘇氨酸∥%0.51

食鹽∥%0.40.4異亮氨酸∥%0.55

預(yù)混料∥%4.04.0蛋氨酸+胱氨酸∥%0.51

活菌劑∥%0.00.2磷∥%0.64

鈣∥%0.54

注：預(yù)混料可為每千克全價飼料提供VA 8 330 IU、VD₁ 1 440 IU、VE 30 IU、VK₃ 2.4 mg、 VB₁ 66 mg、VB₂ 8.0 mg、VB₆ 3 mg、VB₁₂ 0.05 mg、膽堿0.65 g、泛酸20 mg、葉酸2.0 mg、煙酸 40 mg、生物素 0.12 mg、銅200 mg、鐵180 mg、鋅70 mg、錳50 mg、碘0.5 mg和硒0.3 mg。

1.2.2 飼養(yǎng)管理。

各組均飼養(yǎng)在同一棟豬舍內(nèi)，相互隔開。各組分別飼喂相應(yīng)日糧，將制劑充分混勻于飼料中生喂，每天投喂3次（7：00、12：00和17：00）。每重復(fù)飼養(yǎng)于同一欄內(nèi)，同一欄內(nèi)的10頭仔豬共同進(jìn)食，自由采食與飲水，盡量在當(dāng)天喂完每天的計(jì)劃飼料量。

豬舍內(nèi)溫度保持在26～32 ℃（于每天上午7：00、12：00和16：30測定并記錄溫度、相對濕度）。整個試驗(yàn)期間有專人管理。飼養(yǎng)管理、衛(wèi)生消毒及免疫防疫程序按豬場常規(guī)進(jìn)行。各組的免疫、用藥、通風(fēng)、飲水、喂料方式和時間等均一致。每天觀察豬攝食、糞便和死亡情況，并根據(jù)實(shí)際情況每隔1周增加基礎(chǔ)日糧的投飼量。飼養(yǎng)43 d后結(jié)束。

1.2.3 生長指標(biāo)的測定。

飼養(yǎng)結(jié)束后，稱量每欄試驗(yàn)豬的總重，計(jì)算平均日增重、增重率、特定生長率、攝食率、飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率等指標(biāo)，計(jì)算公式如下：

平均日增重（g/頭）=（平均終末體重-平均初始體重）/試驗(yàn)天數(shù)（1）

增重率（%）=[（平均終末體重-平均初始體重）/平均初始體重]×100（2）

特定生長率（%）=[（ln平均終末體重-ln平均初始體重）/試驗(yàn)天數(shù)]×100（3）

攝食率（%）=[干物質(zhì)攝入量/試驗(yàn)天數(shù)×（初始體重+終末體重）/2] ×100（4）

飼料系數(shù)（料肉比）=總耗料量/總增重量（5）

蛋白質(zhì)效率（%）=[（試驗(yàn)?zāi)┴i體重-試驗(yàn)初豬體重）/飼料蛋白攝入量] ×100（6）

1.2.4 腹瀉指標(biāo)的測定。

每天早上定時記錄腹瀉頭數(shù)，觀察每欄的糞便情況，并計(jì)算腹瀉率和腹瀉指數(shù)：

腹瀉率（%）=總腹瀉次數(shù)/（總頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100%（7）

腹瀉指數(shù)=糞便評分之和/供試豬頭數(shù)（8）

表2 腹瀉評分標(biāo)準(zhǔn)

程度糞便外觀評分

正常條形或粒狀0

輕度軟糞、能成形1

中度軟糞，不成形，糞水無分離現(xiàn)象3

嚴(yán)重液狀，不成形，糞水有分離現(xiàn)象5

安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 2015年

1.2.5 糞便指標(biāo)的測定。

于試驗(yàn)結(jié)束日的當(dāng)天清晨，從每組選6頭接近平均體質(zhì)量的仔豬，肛門采集新鮮糞樣，裝入無菌三角瓶中，立即放入冰箱保存?zhèn)錅y。

1.2.5.1 糞中微生物含量的測定。

取10 g糞樣于帶玻璃珠的無菌三角瓶內(nèi)，加入90 ml無菌生理鹽水，充分振蕩，即為10^-1稀釋液，吸取1 ml此液于盛有9 ml無菌蒸餾水試管中進(jìn)行10^-2稀釋，振蕩均勻，并依次進(jìn)行10^-3～10^-9倍稀釋。將各稀釋液0.1 ml涂布于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基平皿上，37 ℃下培養(yǎng)48 h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，計(jì)算大腸桿菌含量^[12]。將各稀釋液涂布于MRS培養(yǎng)基平皿上，37 ℃下培養(yǎng)48 h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，計(jì)算乳酸菌含量^[13]。

1.2.5.2 糞中表觀消化率的測定。

參照國家標(biāo)準(zhǔn)GBT64321994、GBT64332006、GBT64382007、GBT64342006和GBT64372002的方法測定試驗(yàn)期間飼料以及糞便中的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、粗纖維和總磷的含量。4 mol/L鹽酸不溶灰分的含量測定參照《飼料分析與檢測》^[14]。按照以下公式計(jì)算養(yǎng)分表觀消化率：

養(yǎng)分表現(xiàn)消化率（%）=100%-飼料4 mol/L鹽酸不溶灰分含量×糞中某養(yǎng)分含量糞中4 mol/L鹽酸不溶灰分含量×飼料中該養(yǎng)分含量×100%（9）

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS（Ver.11.5）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，采用鄧肯氏（Duncan）法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬增重效果的影響

對斷奶仔豬的養(yǎng)殖試驗(yàn)，從45日齡開始到88日齡結(jié)束。從表3可以看出，試驗(yàn)Ⅰ組分別比對照組提高了11.78%、12.91%和805%，試驗(yàn)Ⅱ組分別比對照組提高了15.05%、13.82%和847%，試驗(yàn)Ⅲ組分別比對照組提高了27.26%、29.97%和1737%，試驗(yàn)Ⅳ組分別比對照組提高了29.44%、35.07%和1992%。各試驗(yàn)組的3項(xiàng)增重指標(biāo)均比對照組有顯著提高（P<0.05），表明設(shè)計(jì)的芽孢桿菌組合制劑均能對斷奶仔豬起到增重作用。

試驗(yàn)Ⅲ組和試驗(yàn)Ⅳ組增重效果無明顯差異（P>0.05），但都比試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組有顯著提高（P<0.05），并且試驗(yàn)Ⅳ組的增重效果稍高于試驗(yàn)3組，表明凝結(jié)芽孢桿菌與酪酸菌聯(lián)用能明顯促進(jìn)仔豬的生長，而巨大芽孢桿菌對這種促生長作用具有增加的趨勢。

表3 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬增重效果的影響

組別始重∥kg/頭末重∥kg/ 頭平均日增重∥g/頭增重率∥%特定生長率∥%

試驗(yàn)Ⅰ組11.88±1.3535.50±2.63549.30±57.9 b198.82±2.27 b2.55±0.78 b

試驗(yàn)Ⅱ組12.13±0.5136.44±2.37565.35±78.4 b200.41±2.63 b2.56±0.54 b

試驗(yàn)Ⅲ組11.75±1.0538.64±2.71625.35±47.3 c228.85±2.73 c2.77±1.02 c

試驗(yàn)Ⅳ組11.50±1.1638.85±2.20636.05±56.4 c237.83±2.26 c2.83±0.40 c

對照組12.00±1.2533.13±2.13491.40±75.0 a176.08±2.58 a2.36±0.35 a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05）。

2.2 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬飼料報酬的影響

由表4可知，斷奶仔豬飼喂不同芽孢桿菌制劑后，飼料報酬均有提高。試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組斷奶仔豬的攝食率分別比對照組降低了4.11%、6.68%、10.80%和11.05%，而飼料系數(shù)分別比對照組降低了10.06%、12.85%、21.79%和23.46%，而蛋白質(zhì)效率分別比對照組提高了10.99%、14.55%、27.64%和30.50%，表明各試驗(yàn)組均能降低攝食率和飼料系數(shù)，提高蛋白質(zhì)效率。其中，試驗(yàn)Ⅲ組和試驗(yàn)Ⅳ組的效果最為明顯，攝食率和飼料系數(shù)均比對照組、試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組有顯著下降（P<005），蛋白質(zhì)效率則有顯著提高（P<0.05），表明凝結(jié)芽孢桿菌與酪酸菌聯(lián)用，或與巨大芽孢桿菌三者聯(lián)用，在提高飼料利用率和節(jié)約飼料方面，均比“凝結(jié)芽孢桿菌+巨大芽孢桿菌”或“酪酸菌+巨大芽孢桿菌”的組合方式更為有效。

表4 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬飼料報酬的影響

組別總耗料量∥kg總增重量∥kg攝食率∥%飼料系數(shù)蛋白質(zhì)效率∥%

試驗(yàn)Ⅰ組1 140.85708.603.73±0.38 b1.61±0.05 b337.56±7.16 b

試驗(yàn)Ⅱ組1 137.71729.303.63±0.82 b1.56±0.02 b348.38±6.28 b

試驗(yàn)Ⅲ組1 129.38806.703.47±0.96 c1.40±0.08 c388.19±9.64 c

試驗(yàn)Ⅳ組1 123.59820.503.46±0.81 c1.37±0.05 c396.88±4.72 c

對照組1 132.78633.903.89±0.64 a1.79±0.07 a304.13±7.92 a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05）。

2.3 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬腹瀉和糞便微生物菌群的影響

試驗(yàn)期間，對照組和試驗(yàn)組均未出現(xiàn)仔豬因拉稀而死亡的現(xiàn)象，但根據(jù)每日糞便狀況的觀察記錄，對照組出現(xiàn)的總腹瀉次數(shù)達(dá)235次，腹瀉率達(dá)18.22%，腹瀉指數(shù)也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于各試驗(yàn)組（P<0.05）;各試驗(yàn)組的腹瀉率和腹瀉指數(shù)基本相近（P>0.05）（表5）。由此說明，添加的各種芽孢桿菌制劑均能有效降低腹瀉率和腹瀉指數(shù)，并且它們相互之間的差異不大。

由表5可知，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組糞便中的大腸桿菌數(shù)量比對照組有顯著下降（P<0.05），而試驗(yàn)Ⅲ組和試驗(yàn)Ⅳ組又比試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ進(jìn)一步下降（P<0.05），表明凝結(jié)芽孢桿菌與酪酸菌這兩種厭氧芽孢桿菌的聯(lián)合添加，在抑制有害菌生長方面比單獨(dú)添加效果更為明顯。試驗(yàn)Ⅳ組的大腸桿菌數(shù)量與試驗(yàn)Ⅲ組處于同一數(shù)量級，但數(shù)值相對較低，表明好氧的巨大芽孢桿菌能一定程度上協(xié)同凝結(jié)芽孢桿菌與酪酸菌一起抑制有害菌的生長。

由表5可知，各試驗(yàn)組糞便中乳酸菌數(shù)量均比對照組有顯著提高（P<0.05），并且處于同一數(shù)量級的試驗(yàn)Ⅳ組乳酸菌相對較高，表明添加的芽孢桿菌制劑能明顯促進(jìn)乳酸菌的增殖，提高在腸道和糞便中的數(shù)量，而巨大芽孢桿菌對這種提高具有一定的協(xié)同輔助作用。

2.4 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表6可知，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組的粗蛋白表觀

消化率分別比對照組提高了8.67%、6.20%、10.88%和

表5 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬腹瀉和糞便微生物菌群的影響

組別腹瀉率

%腹瀉指數(shù)大腸桿菌

10⁶ cfu/g乳酸菌

10⁷ cfu/g

試驗(yàn)Ⅰ組5.84±0.18b1.080±0.02b26.52±0.69b37.20±0.83 b

試驗(yàn)Ⅱ組9.28±0.27 b1.570±0.01 b33.40±0.76 b29.58±1.39 b

試驗(yàn)Ⅲ組7.42±0.16 b1.325±0.07 b9.69±0.18 c 42.03±0.95 b

試驗(yàn)Ⅳ組4.73±0.34 b1.125±0.03 b3.06±0.13 c90.80±0.28 b

對照組18.22±0.78 a2.985±0.07 a104.02±0.68 a8.57±0.27 a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05）。

20.17%，差異極顯著（P<0.05），其中試驗(yàn)Ⅳ組的粗蛋白表觀消化率提高幅度最大，明顯高于其他3個試驗(yàn)組（P<005），表明凝結(jié)芽孢桿菌、酪酸菌與巨大芽孢桿菌3種菌的聯(lián)合添加，能極大促進(jìn)飼料蛋白的消化吸收。各試驗(yàn)組的粗纖維表觀消化率分別比對照組提高了28.62%、32.52%、2908%和34.51%，差異極顯著（P<0.05），但各試驗(yàn)組間無明顯差異（P>0.05），表明不同芽孢桿菌制劑均能提高仔豬對飼料中粗纖維的消化吸收率，各制劑的作用效果相近。

由表6可知，各試驗(yàn)組粗脂肪、粗灰分和磷的表觀消化率與對照組差異不顯著（P>0.05），表明設(shè)計(jì)的不同芽孢桿菌制劑對飼料中粗脂肪、粗灰分和磷的消化吸收無影響。

表6 不同芽孢桿菌制劑對斷奶仔豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

組別粗蛋白含量∥%粗纖維含量∥%粗脂肪含量∥%粗灰分含量∥% 總磷含量∥%

試驗(yàn)Ⅰ組81.72±2.01 b47.86±5.28 b71.79±3.75 a45.94±4.68 a35.82±5.07 a

試驗(yàn)Ⅱ組79.86±3.62 b49.31±4.65 b72.61±2.86 a45.08±2.35 a37.09±8.85 a

試驗(yàn)Ⅲ組83.38±1.51 b48.03±6.39 b70.84±4.47 a46.64±5.71 a32.88±6.02 a

試驗(yàn)Ⅳ組90.37±3.10 c50.05±3.04 b73.42±3.73 a47.96±3.06 a36.05±3.66 a

對照組75.20±1.82 a37.21±4.63 a70.58±3.08 a45.73±4.28 a33.62±5.95 a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著（P<0.05）。

2.5 經(jīng)濟(jì)效益分析

由表7可知，對照組頭均飼料單價為4.43元，試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組飼料單價為4.462元/頭，試驗(yàn)Ⅳ組飼料單價為4.466元/頭，仔豬價格按12元/kg計(jì)算，則試驗(yàn)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組每頭豬毛收入分別比對照組增加27.47、36.24、68.41和74.67元，表明各試驗(yàn)組的芽孢桿菌復(fù)合制劑均能提高經(jīng)濟(jì)效益，其中又以試驗(yàn)Ⅳ組的菌劑提高幅度最大;并且這種經(jīng)濟(jì)效益的提高主要是因?yàn)轭^均重量增加的緣故，而不是飼料成本的節(jié)省。

表7 添加不同芽孢桿菌制劑的經(jīng)濟(jì)效益分析

組別仔豬增重

kg/頭仔豬售價

元/頭耗料量

kg/頭芽孢桿菌制劑

成本∥元/頭飼料單價

元/頭飼料成本

元/頭毛收入

元/頭

試驗(yàn)Ⅰ組23.62283.4438.030.0324.462169.69113.75

試驗(yàn)Ⅱ組24.31291.7237.920.0324.462169.20122.52

試驗(yàn)Ⅲ組26.89322.6837.650.0324.462167.99154.69

試驗(yàn)Ⅳ組27.35328.2037.450.0364.466167.25160.95

對照組21.13253.5637.7604.430167.2886.28

3 討論與結(jié)論

3.1 不同芽孢桿菌復(fù)合制劑對仔豬生產(chǎn)性能的影響

吳建忠^[15]將乳酸芽孢桿菌用于斷奶仔豬的養(yǎng)殖，日增重率提高了978%（P<0.05），飼料系數(shù)降低0.14（P<0.05）。筆者在凝結(jié)芽孢桿菌的基礎(chǔ)上再增加巨大芽孢桿菌，能將斷奶仔豬的日增重率提高11.78%（P<0.05），飼料系數(shù)降低0.18（P<0.05）。王保正等

^[16]將酪酸菌用于斷奶仔豬的養(yǎng)殖，頭均日增重比對照組提高94 g，飼料系數(shù)降低0.01。筆者在酪酸菌的基礎(chǔ)上再增加巨大芽孢桿菌，頭均日增重比對照組提高73.95 g（P<0.05），飼料系數(shù)降低0.23（P<0.05）。該研究結(jié)果表明，由2種不同菌種組成的復(fù)合制劑，其養(yǎng)殖效果要好于單一菌種，可能是因?yàn)榫薮笱挎邨U菌屬于好氧菌，進(jìn)入動物腸道后該菌首先進(jìn)行繁殖，產(chǎn)生多種酶和維生素，并迅速消耗殘留的氧氣，為另外2種厭氧菌的繁殖提供了良好的環(huán)境，促進(jìn)它們的定植和生長，相互協(xié)同，從而起到更有效的益生作用。

通過檢索國內(nèi)外文獻(xiàn)，還未見到將凝結(jié)芽孢桿菌與酪酸菌聯(lián)合用于動物養(yǎng)殖的報道。該研究結(jié)果表明這2種菌的復(fù)合制劑能明顯促進(jìn)斷奶仔豬的生長、提高飼料報酬，養(yǎng)殖效果明顯好于試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組（P<0.05）。究其原因，可能是因?yàn)檫@2種菌分別通過不同的途徑和機(jī)制來調(diào)節(jié)微生態(tài)平衡，從而產(chǎn)生促進(jìn)生長的合力作用;另外，凝結(jié)芽孢桿菌產(chǎn)生的L-乳酸具有較強(qiáng)的酸性，強(qiáng)酸性環(huán)境使得酪酸菌產(chǎn)生的丁酸不易離解，只有未離解的分子態(tài)丁酸才能更好地給腸上皮細(xì)胞組織提供能量，促進(jìn)受損細(xì)胞的修復(fù)。

該研究中試驗(yàn)Ⅳ組采用的“凝結(jié)芽孢桿菌+酪酸菌+巨大芽孢桿菌”組合在增重效果和飼料報酬方面雖與采用“凝結(jié)芽孢桿菌+酪酸菌”組合的試驗(yàn)Ⅲ組無顯著差異（P>005），但對提高各項(xiàng)生產(chǎn)性能均有一定的促進(jìn)趨勢，經(jīng)濟(jì)效益在所有試驗(yàn)組中是最高的，其原因與試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組相類似，即巨大芽孢桿菌除了本身能產(chǎn)生豐富的胞外酶系和大量益生活性物質(zhì)外，還具有較強(qiáng)的生物奪氧能力，能為凝結(jié)芽孢桿菌、酪酸菌和其他益生菌營造更嚴(yán)格的厭氧環(huán)境，從而促進(jìn)它們的生長和功能的發(fā)揮。

3.2 不同芽孢桿菌復(fù)合制劑對仔豬腹瀉和糞便菌群的影響

微生態(tài)制劑在降低動物消化道有害菌群數(shù)量，提高有益菌方面的積極作用，已有較多的研究報道^[17]，該研究采用不同的芽孢桿菌復(fù)合制劑也得到了相同的結(jié)論。

該試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)Ⅲ組和試驗(yàn)Ⅳ組的糞便大腸桿菌數(shù)量比試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組又有明顯降低（P<0.05），其可能原因是試驗(yàn)Ⅲ組和Ⅳ組同時采用了2種產(chǎn)酸的芽孢桿菌，即凝結(jié)芽孢桿菌產(chǎn)生的L-乳酸和酪酸菌產(chǎn)生的丁酸能使仔豬腸道pH比其他2個試驗(yàn)組低，以及它們之間在其他生理功效方面的互補(bǔ)和累加效應(yīng)，從而能協(xié)同地抑制大腸桿菌的生長和繁殖。試驗(yàn)Ⅳ組則還有巨大芽孢桿菌對2種厭氧芽孢桿菌的協(xié)同輔助作用以及本身強(qiáng)烈的生物奪氧作用，使仔豬腸道pH和氧氣含量更低，從而更有利于抑制大腸桿菌等病原菌的生長。

高媛媛等^[18] 將丁酸梭菌與好氧的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌等一起飼喂斷奶仔兔，能顯著提高仔兔盲腸中乳酸菌含量（P<0.05）。該研究中試驗(yàn)Ⅳ組將酪酸菌、凝結(jié)芽孢桿菌與好氧的巨大芽孢桿菌一起飼喂斷奶仔豬，也取得了類似的結(jié)果;雖然該組在提高乳酸菌數(shù)量上與其外3個試驗(yàn)組無顯著差異（P>0.05），但該組的乳酸菌數(shù)值在所有試驗(yàn)組中是最高的。因此，好氧芽孢桿菌的添加能一定程度上協(xié)同產(chǎn)酸的厭氧芽孢桿菌一起促進(jìn)乳酸菌的生長與繁殖。

3.3 不同芽孢桿菌復(fù)合制劑對仔豬飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響

芽孢桿菌進(jìn)入動物腸道后，能通過產(chǎn)生大量的胞外酶，如蛋白酶、淀粉酶和纖維酶等，促進(jìn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收^[19]。該試驗(yàn)結(jié)果也表明添加凝結(jié)芽孢桿菌、酪酸菌與巨大芽孢桿菌的不同組合制劑后，能顯著提高仔豬對飼料蛋白質(zhì)和纖維素的消化吸收（P<0.05）。該試驗(yàn)結(jié)果還表明，同時添加3種菌的試驗(yàn)4組，粗蛋白表觀消化率提高幅度最大，明顯高于其他3個試驗(yàn)組（P<0.05），原因可能是3種不同的菌產(chǎn)生的蛋白酶種類更豐富、酶解系統(tǒng)較完善的緣故。

丁祥力等^[20]采用乳桿菌與酵母菌組成的復(fù)合制劑飼喂生長豬，能提高對粗脂肪和總磷的表觀糞消化率，而該試驗(yàn)中添加的芽孢桿菌復(fù)合制劑對粗脂肪和總磷的消化吸收無影響，這可能與試驗(yàn)菌劑、試驗(yàn)條件和試驗(yàn)豬種的不同有關(guān);此外，微生態(tài)益生菌產(chǎn)生的過量酶有可能抑制機(jī)體內(nèi)源性脂肪酶、磷代謝酶的活性和分泌等，從而整體上降低對這些營養(yǎng)物質(zhì)的分解作用。

3.4 今后研究方向

據(jù)報道，芽孢桿菌的作用效果與使用劑量有關(guān)，有一個最適添加量^[21]。筆者僅考察了一種添加劑量（0.2%）對斷奶仔豬的影響，結(jié)果表明能夠促進(jìn)仔豬的生長、降低飼料系數(shù)和腹瀉率、提高飼料消化吸收率。下一步的工作是進(jìn)一步考察不同添加量芽孢桿菌復(fù)合制劑制劑對斷奶仔豬以及其他養(yǎng)殖動物的影響，建立制劑的標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖管理操作規(guī)程。

作為新型的復(fù)合型微生態(tài)制劑，筆者僅研究了它們對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響，下一步應(yīng)深入研究對斷奶仔豬生理生化特性指標(biāo)、腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)、腸道微生物區(qū)系和氨氣排放的影響，以進(jìn)一步弄清楚這些制劑的功能和作用機(jī)理。此外，還需要對這些制劑的生產(chǎn)工藝、拮抗性和安全性等方面進(jìn)行深入研究。

筆者以不同組合的芽孢桿菌復(fù)合制劑飼喂斷奶仔豬，根據(jù)養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)果并結(jié)合經(jīng)濟(jì)效益分析，證明“凝結(jié)芽孢桿菌+酪酸菌+巨大芽孢桿菌”的復(fù)合制劑養(yǎng)殖效果最好，經(jīng)濟(jì)效益最為顯著，該制劑及其使用方式對我國的飼料工業(yè)和綠色養(yǎng)殖業(yè)具有一定的推廣運(yùn)用價值。

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