閻雪　高明　楊群　單紀(jì)平　徐剛

摘要 ：建立了在線衍生-液相微萃取技術(shù)測(cè)定水發(fā)產(chǎn)品中的甲醛的方法。對(duì)影響萃取效率的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化。采用Rtx-5MS毛細(xì)管柱進(jìn)行檢測(cè)，以混有衍生化試劑的十二烷為萃取溶劑，在40℃、攪拌速度為200r/min條件下對(duì)1mL水發(fā)產(chǎn)品樣品萃取30min。該方法對(duì)甲醛的富集倍數(shù)為102；線性關(guān)系良好。相關(guān)系數(shù)為0.9898；甲醛的檢出限為0.1mg/kg（S/N=3）。實(shí)際樣品的加標(biāo)回收率為97.3%～102.3%。

關(guān)鍵詞 ：液相微萃取 在線衍生 甲醛 水發(fā)產(chǎn)品

近些年來，一些不法商販和生產(chǎn)廠家在食品中添加國(guó)家嚴(yán)令禁止使用的化工原料——甲醛，以達(dá)到延長(zhǎng)保鮮時(shí)間和改善感官的目的[1]。食品中甲醛的殘留已成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。甲醛毒性是甲醇的30倍，對(duì)人的神經(jīng)系統(tǒng)、肺、肝臟都有損害，還會(huì)引起人體內(nèi)分泌功能紊亂，引發(fā)過敏性皮炎、過敏性哮喘等[2-4]。有關(guān)甲醛的檢測(cè)方法有比色法、電化學(xué)法、氣相色譜法及高效液相色譜法[5-12]。國(guó)內(nèi)檢測(cè)水產(chǎn)品中甲醛普遍使用的快速定性法、分光光度法。氣相色譜法操作簡(jiǎn)便，測(cè)定線性范圍寬，分離度好，干擾小。但是，由于甲醛分子太小，直接進(jìn)行GC分析時(shí)，出峰太快，因此食品中甲醛的測(cè)定一般先將甲醛衍生再用GC-MS進(jìn)行測(cè)定[13]。有文獻(xiàn)提出了2，4 -二硝基苯肼衍生-氣相色譜測(cè)定紡織品中甲醛的方法，有文獻(xiàn)描述了水產(chǎn)品中甲醛的衍生-液相色譜測(cè)定方法。但是在線衍生技術(shù)還未見報(bào)道。

液相微萃取是隨著近代環(huán)境分析技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展起來的一種快速、精確、靈敏度高、環(huán)境友好的新型樣品前處理技術(shù)。是在液-液萃取的基礎(chǔ)上提出來的，該技術(shù)集萃取、純化、濃縮于一體。在萃取過程僅需要極少量的有機(jī)溶劑（幾到幾十微升），其靈敏度與液-液萃取相當(dāng)，而對(duì)微量或痕量目標(biāo)物的富集作用是液-液萃取所不能比擬的。液相微萃取還可通過調(diào)節(jié)萃取溶劑的極性和酸堿性來達(dá)到對(duì)某一類目標(biāo)物的選擇性萃取，從而減少基質(zhì)中雜質(zhì)成分的干擾[14-20]。

因此，在水發(fā)產(chǎn)品中甲醛的檢測(cè)中發(fā)展一種快速、省時(shí)、在線的萃取技術(shù)，意義十分巨大。

1.實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑樣品

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（島津GCMS-QP2010，日本島津公司），微量進(jìn)樣器（10μL，美國(guó)hamilton公司）。甲醛（色標(biāo)，天津市津科精細(xì)化工研究所），鄰-（2，3，4，5，6-五氟芐基）羥胺鹽酸鹽（PFBHA·HCl，Sigma公司），十二烷（99%，德國(guó)產(chǎn)）水發(fā)產(chǎn)品樣品（通化市售）。

1.2 GC-MS分析條件

島津氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GCMS-QP2010）；30 m×0.25 mm×0.25？m Rtx-5MS毛細(xì)管柱；進(jìn)樣口溫度為260℃；載氣（He）流速1.05 mL/min；柱箱起始溫度為70℃，保持3min，然后以5℃/min的速度升溫到120℃然后以20℃/min的速度升溫到240℃。分流進(jìn)樣，分流比為1：30；進(jìn)樣2？L。分析時(shí)間為19 min。離子源溫度250℃；接口溫度280℃；電離方式EI；選擇離子模式SIM；電離能量70 Ev；切割溶劑時(shí)間5.0 min。甲醛的衍生物定量離子m/z 161。

1.3 頂空液相微萃取

頂空液相微萃取包括以下幾個(gè)步驟： （1） 按照?qǐng)D1所示組裝液相微萃取裝置 （2） 取一支干凈的10 ？l 色譜進(jìn)樣針用萃取溶劑清洗至少20次，以確保針筒和針尖內(nèi)沒有氣泡殘留 （3） 用進(jìn)樣針吸2.2 ？L 萃取溶劑，針尖穿透樣品瓶的隔墊，小心按下進(jìn)樣器的活塞，使溶劑懸于針尖，在樣品上空1 cm 處形成一個(gè)小液滴 （4） 接通電源，攪拌樣品溶液，萃取30 min，確保水浴的溫度始終控制在40℃ （5） 收回萃取溶劑液滴到進(jìn)樣針內(nèi)，并將針移出樣品瓶，直接進(jìn)GC-MS進(jìn)行分析。

2.結(jié)果與討論

2.1 LPME條件的優(yōu)化

2.1.1 萃取溶劑的選擇

萃取溶劑在液相微萃取中對(duì)萃取效率的影響最大。本實(shí)驗(yàn)中考察了烷烴類、苯類、醇類對(duì)甲醛的萃取效率。選用正己烷、石油醚、乙酸乙酯、十二烷為萃取溶劑，分別在室溫，攪拌速度為200r/min的條件下萃取30min。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上看，十二烷的萃取效果最好。故確定十二烷為萃取溶劑。

2.1.2 萃取溫度的影響

升高萃取溫度有助于分析物從基體中脫離出來，也有利于提高分析物的擴(kuò)散速度，從而提高分析速度。本實(shí)驗(yàn)研究溫度從30到80℃范圍內(nèi)對(duì)萃取效率的影響。結(jié)果表明，溫度在40℃以后萃取效率的變化不大，而且40℃比較容易控制，重復(fù)性好。因此本實(shí)驗(yàn)采用40℃作為萃取溫度。

2.1.3 萃取時(shí)間的選擇

本實(shí)驗(yàn)考察了萃取時(shí)間分別為10到60min時(shí)對(duì)甲醛萃取效率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，60min時(shí)的萃取效率最高。但是考慮到實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)際情況，最終選擇了30min作為萃取時(shí)間。

2.1.4 攪拌速度的影響

在液相微萃取過程中，攪拌樣品，有利于被分析物的揮出，可縮短達(dá)到平衡的時(shí)間，從而提高萃取效率。但是如果攪拌速度過快，2mL樣品瓶?jī)?nèi)的樣品會(huì)產(chǎn)生很大的渦旋，影響萃取過程中懸掛液滴的穩(wěn)定性。因此，考察了攪拌速度從0～500r/min時(shí)對(duì)萃取效率的影響。最后確定攪拌速度為200r/min。

2.2 線性范圍、檢出限和富集倍數(shù)

分別配置甲醛的濃度為0.5、5、10、40、80 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液；用“1.3”節(jié)的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行萃取、測(cè)定。得到如表1的標(biāo)準(zhǔn)曲線。從表1可以看出，在所測(cè)定的濃度范圍內(nèi)甲醛的線性關(guān)系良好，符合檢測(cè)的要求。

2.3 加標(biāo)回收率及實(shí)際水發(fā)產(chǎn)品樣品的測(cè)定

選擇S/N=3時(shí)的濃度為最低檢測(cè)限。本方法對(duì)甲醛的檢測(cè)限均為0.1mg/kg。選取同一干魷魚片加標(biāo)后，分析測(cè)定其回收率，重復(fù)7次，得到的回收率為98.9%。

按照實(shí)驗(yàn)方法對(duì)未經(jīng)處理的10個(gè)水發(fā)產(chǎn)品樣品進(jìn)行液相微萃取、測(cè)定。測(cè)得甲醛的含量在4.1～83.3 mg/kg之間。

3. 結(jié)論

應(yīng)用在線衍生-液相微萃取法檢測(cè)水發(fā)產(chǎn)品中的甲醛，即快捷、省時(shí)，又需要樣品量少，在未來的檢測(cè)上有望普遍推廣。本研究建立了在線衍生-液相微萃取法檢測(cè)水發(fā)產(chǎn)品中的甲醛的方法?？煽焖?、靈敏地分析水發(fā)產(chǎn)品中甲醛的含量。

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基金項(xiàng)目：

吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012ZJK11）。

作者簡(jiǎn)介：

閻雪（1979～），女，吉林省通化人，研究生，主要從事色譜分析、質(zhì)譜分析。