汪春年　陳潔　夏朝霞　吳曉英

1.浙江省寧波市臨床病理診斷中心，浙江寧波315031；2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410008

Pax-8在卵巢腺癌中的表達(dá)及其意義

汪春年1陳潔1夏朝霞1吳曉英2

1.浙江省寧波市臨床病理診斷中心，浙江寧波315031；2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410008

目的檢測(cè)Pax-8在卵巢腺癌組織中的表達(dá)狀況并分析Pax-8在卵巢腺癌中的診斷價(jià)值。方法收集2011年6月～2015年7月寧波市臨床病理診斷中心卵巢腺癌手術(shù)標(biāo)本蠟塊，其中卵巢原發(fā)性腺癌52例、卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌31例。采用免疫組化檢測(cè)癌組織中Pax-8的表達(dá)情況。結(jié)果卵巢原發(fā)性腺癌組織中Pax-8陽(yáng)性表達(dá)率為82.7%，Pax-8在漿液性腺癌、內(nèi)膜樣腺癌、透明細(xì)胞腺癌、黏液性腺癌中的陽(yáng)性率分別為96.8%、100.0%、100.0%、33.3%。卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8陽(yáng)性表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及腫瘤復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)（P＞0.05）。Pax-8在卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中均未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)，與原發(fā)性腺癌比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論P(yáng)ax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中高水平表達(dá)，表現(xiàn)出高敏感性和高特異性，可作為卵巢原發(fā)性腺癌的判斷指標(biāo)之一。

卵巢腺癌；Pax-8；原發(fā)性；轉(zhuǎn)移

卵巢腺癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，早期不容易發(fā)現(xiàn)，多數(shù)發(fā)現(xiàn)時(shí)已出現(xiàn)廣泛的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，預(yù)后差。臨床工作中，經(jīng)常碰到惡性腹水或淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移等晚期癌癥患者，為尋求最佳治療方案，需要依靠免疫標(biāo)記尋找癌的原發(fā)灶［1］。卵巢腺癌的常用的免疫標(biāo)志物包括ER、PR、CK7、WT-1等，但這些標(biāo)志物受敏感性及特異性的影響，有一定的局限性。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Pax-8在卵巢癌中的表達(dá)表現(xiàn)出高敏感性和特異性，除甲狀腺、腎臟外，在乳腺以及其他非婦科原發(fā)腫瘤中幾乎不表達(dá)［2］。目前國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)中，可見(jiàn)數(shù)篇有關(guān)Pax-8在卵巢漿液性腫瘤中的表達(dá)研究［3-4］，本研究采用免疫組化方法檢測(cè)Pax-8在卵巢腺癌中的表達(dá)，探討其在卵巢腺癌診斷中的價(jià)值。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集2011年6月～2015年7月寧波市臨床病理診斷中心卵巢腺癌52例患者的手術(shù)標(biāo)本蠟塊?；颊吣挲g29～81歲，平均（52±1）歲，術(shù)前均未接受化療或放療。其中漿液性腺癌31例，子宮內(nèi)膜樣腺癌4例，黏液性腺癌12例，透明細(xì)胞腺癌5例；按FIGO分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期13例，Ⅱ～Ⅳ期39例?；颊唠S訪至2015年4月（隨訪時(shí)間為3～44個(gè)月），8例出現(xiàn)復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移，其中2例因廣泛轉(zhuǎn)移死亡，44例未見(jiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌31例，年齡30～69歲，平均（46±1）歲，其中胃腸道21例，闌尾5例，乳腺2例，肺1例，膽囊/胰膽管2例。

1.2方法

所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋制片，Roche公司Benchmark XT全自動(dòng)免疫組化檢測(cè)儀進(jìn)行免疫組化染色。所有實(shí)驗(yàn)均設(shè)置陰性及已知陽(yáng)性對(duì)照。試劑一抗兔抗人Pax-8抗體購(gòu)于邁新生物技術(shù)有限公司，二抗及DAB均為Roche公司Benchmark XT配套試劑。

1.3結(jié)果判定

Pax-8染色以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。每張切片選取10個(gè)高倍視野，每高倍視野計(jì)數(shù)200個(gè)癌細(xì)胞，按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比確定Pax-8表達(dá)情況：腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)＜10%為免疫反應(yīng)陰性（-），腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)≥10%為免疫反應(yīng)陽(yáng)性（+）。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩獨(dú)立樣本的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為82.7%（43/52），其中漿液性腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為96.8%（30/31）（圖1A），黏液性腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為33.3%（4/12）（圖1B），透明細(xì)胞腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為100.0%（5/5）（圖1C），子宮內(nèi)膜樣腺癌中陽(yáng)性表達(dá)率為100.0%（4/4）（圖1D）。Pax-8在31例卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中均未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)（圖1E）。原發(fā)性卵巢腺癌中Pax-8的表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及腫瘤復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移均無(wú)關(guān)（P＞0.05）（表1）。卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8的陽(yáng)性表達(dá)與轉(zhuǎn)移性腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)相比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）（表2）。

3　討論

Pax-8蛋白是轉(zhuǎn)錄因子的成對(duì)盒基因（PAX）家族成員之一，為核轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控甲狀腺、腎臟、副中腎管系統(tǒng)等的發(fā)育。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Pax-8與器官系統(tǒng)特異性標(biāo)記聯(lián)合，對(duì)于未知原發(fā)部位轉(zhuǎn)移癌原發(fā)灶的查找、或某些上皮性腫瘤的鑒別有一定的意義。Pax-8在甲狀腺、甲狀旁腺、胸腺、副中腎管、腎臟等上皮性腫瘤中表達(dá)［5-6］。但Pax-8在正常卵巢表面上皮、包涵囊腫上皮中不表達(dá)，輸卵管上皮中的分泌細(xì)胞表達(dá)Pax-8，這一現(xiàn)象更支持卵巢癌來(lái)源于苗勒系統(tǒng)，也支持高級(jí)別漿液性腺癌來(lái)源于輸卵管傘端這一假說(shuō)。

本研究的主要目的是探討Pax-8在卵巢腺癌中的表達(dá)情況。本研究發(fā)現(xiàn)Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.7%，在卵巢腺癌中的表達(dá)具有較高的敏感性。Pax-8在漿液性腺癌、內(nèi)膜樣腺癌及透明細(xì)胞腺癌中的陽(yáng)性率均高于95%，而黏液性腺癌中Pax-8陽(yáng)性表達(dá)率低。Pax-8的表達(dá)與卵巢原發(fā)性腺癌的分化程度、臨床分期、腫瘤復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移不相關(guān)。本研究結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相一致［3-4，7-8］。邢寶玲等［9］研究發(fā)現(xiàn)在卵巢輸卵管、宮體、子宮頸的漿液性腺癌、交界性漿液性腫瘤、子宮內(nèi)膜樣腺癌、透明細(xì)胞腺癌中的表達(dá)均為100%，推斷Pax-8是苗勒管腺上皮敏感且特異性的標(biāo)志物，對(duì)女性生殖道上皮性腫瘤的鑒別診斷起重要作用。

圖1　Pax-8在不同類(lèi)型卵巢癌組織中的表達(dá)情況（EnVision，200×）

表1　卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系（例）

表2　卵巢原發(fā)性腺癌與轉(zhuǎn)移性腺癌中Pax-8的表達(dá)情況（例）

Zhao等［10］收集了68例確診為卵巢癌轉(zhuǎn)移的惡性腹水病例，聯(lián)合運(yùn)用Pax-8和WT-1兩種免疫標(biāo)志物，發(fā)現(xiàn)Pax-8陽(yáng)性率為85%，WT-1陽(yáng)性率為82%，Pax-8/WT-1兩者的總陽(yáng)性率為94%，筆者認(rèn)為同時(shí)檢測(cè)惡性腹水細(xì)胞蠟塊中的Pax-8和WT-1的表達(dá)，可提高卵巢癌原發(fā)性檢測(cè)的敏感性。Pax-8在鑒別上皮樣間皮瘤與卵巢漿液性腺癌與其他腫瘤標(biāo)志物相比，具有較高的敏感性和特異性［11-13］。

為研究Pax-8蛋白在卵巢原發(fā)性腺癌中表達(dá)的特異性，本研究同時(shí)分析了31例卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中Pax-8蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果顯示Pax-8蛋白在常見(jiàn)的卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中不表達(dá)，與原發(fā)性腺癌中的表達(dá)相比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），表明Pax-8蛋白在卵巢原發(fā)性腺癌中的表達(dá)具有很高的特異性。

因?yàn)槊缋障到y(tǒng)的特殊性，Pax-8在卵巢腺癌鑒別診斷中有著重要的作用，特別是與進(jìn)展期乳腺癌、惡性間皮瘤等的鑒別。Pax-8陽(yáng)性支持卵巢原發(fā)，但Pax-8陰性不能完全排除卵巢來(lái)源。對(duì)于卵巢黏液性腺癌的診斷，臨床病理診斷特別注意要與卵巢的轉(zhuǎn)移性腺癌鑒別，以前常用的免疫組化鑒別指標(biāo)包括：ER、PR、CK7、CK20、Villin、CDX-2、WT-1等。結(jié)合本研究結(jié)果，建議加做Pax-8檢測(cè)，如果Pax-8陽(yáng)性更支持卵巢原發(fā)性黏液性腺癌的診斷［14-15］。Pax-8對(duì)苗勒管源性腫瘤具有很高的敏感性及特異性，可作為其診斷及鑒別診斷有用的標(biāo)志物［16-18］。

本研究結(jié)果顯示，Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中的表達(dá)具有較高的敏感性和特異性，盡管Pax-8的表達(dá)與腫瘤分化、FIGO分期及腫瘤復(fù)發(fā)/轉(zhuǎn)移沒(méi)有相關(guān)性，但在實(shí)際臨床病理診斷工作中有一定的應(yīng)用意義。對(duì)惡性腹水患者，Pax-8聯(lián)合其他免疫標(biāo)記對(duì)判斷腫瘤的來(lái)源有一定的價(jià)值［19］，這也是本研究組今后研究的方向。沉默卵巢腫瘤細(xì)胞系中Pax-8的表達(dá)可有效促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的死亡［20］，提示Pax-8在卵巢腫瘤中扮演著重要的促癌作用，可能為卵巢癌的生物治療提供新靶點(diǎn)。

［1］Wang Y，Wang Y，Li J，et al.PAX8：a sensitive and specific marker to identify cancer cells of ovarian origin for patients prior to neoadjuvant chemotherapy［J］.J Hematol Oncol，2013，6：60.

［2］胡文娟，王仁杰.PAX2、PAX8、P53蛋白在低級(jí)別、高級(jí)別漿液性卵巢癌中的表達(dá)研究［J］.醫(yī)學(xué)信息，2014，27（7）：668.

［3］王仁杰，熊麗芳，胡文娟，等.PAX2及PAX8在卵巢漿液性腺癌中的表達(dá)及其臨床意義［J］.長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)：自科版，2013，10（36）：22-23.

［4］徐兵，孫多祥，康永軍，等.卵巢漿液性腫瘤中Pax8和Tubulin的表達(dá)及意義［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014，30（7）：713-716.

［5］Ordonez NG.Value of PAX 8 immunostaining in tumor diagnosis：a review and update［J］.Adv Anat Pathol，2012，19（3）：140-151.

［6］Xiang L，Kong B.PAX8 is a novel marker for differentiating between various types of tumor，particularly ovarian epithelial carcinomas［J］.Oncol Lett，2013，5（3）：735-738.

［7］Liliac L，Carcangiu ML，Canevari S，et al.The value of PAX8 and WT1 molecules in ovarian cancer diagnosis［J］.Rom J Morphol Embryol，2013，54（1）：17-27.

［8］Laury AR，Perets R，Piao H，et al.A comprehensive analysis of PAX8 expression in human epithelial tumors［J］.Am J Surg Pathol，2011，35（6）：816-826.

［9］邢寶玲，葛素梅，劉孟璐，等.Pax8在女性生殖道腫瘤診斷與鑒別診斷中應(yīng)用價(jià)值［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2013，29（11）：1194-1197.

［10］Zhao L，Guo M，Sneige N，et al.Value of PAX8 and WT1 Immunostaining in confirming the ovarian origin of metastatic carcinoma in serous effusion specimens［J］. Am J Clin Pathol，2012，137（2）：304-309.

［11］Tong GX，Devaraj K，Hamele-Bena D，et al.Pax8：a marker for carcinoma of Müllerian origin in serous effusions［J］. Diagn Cytopathol，2011，39（8）：567-574.

［12］Ordonez NG.Value of PAX8，PAX2，claudin-4，and hcaldesmon immunostaining in distinguishing peritoneal epithelioid mesotheliomas from serous carcinomas［J］. Mod Pathol，2013，26（4）：553-562.

［13］Wiseman W，Michael CW，Roh MH.Diagnostic utility of PAX8 and PAX2 immunohistochemistry in the identification of metastatic Müllerian carcinoma in effusions［J］. Diagn Cytopathol，2011，39（9）：651-656.

［14］孫多祥，徐兵，田園，等.卵巢黏液性腫瘤和卵巢透明細(xì)胞癌PAX8、Tubulin和Calretinin的表達(dá)［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014，30（6）：637-640.

［15］Hu A，Li H，Zhang L，et al.Differentiating primary and extragenital metastatic mucinous ovarian tumours：an algorithm combining PAX8 with tumour size and laterality［J］. J Clin Pathol，2015，68（7）：522-528.

［16］劉玉艷，姜乃光，趙青亮，等.漿膜腔積液中Napsin A和Pax-8的表達(dá)及臨床意義［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2015，31（4）：452-454.

［17］Xiang L，Zheng W，Kong B.Detection of PAX8 and p53 is beneficial in recognizing metastatic carcinomas in pelvic washings，especially in cases with suspicious cytology［J］.Gynecologic Oncology，2012，127（3）：595-600.

［18］Heidarpour M，Tavanafar Z.Diagnostic utility of PAX8 in differentiation of mullerian from non-mullerian tumors［J］. Adv Biomed Res，2014，3：96.

［19］WatersL，CrumleyS，TruongL，etal.PAX2andPAX8：useful markers for metastatic effusions［J］.Acta Cytol，2014，58（1）：60-66.

［20］Cheung HW，Cowley GS，Weir BA，et al.Systematic investigation of genetic vulnerabilities across cancer cell lines reveals lineage-specific dependencies in ovarian cancer［J］. Proc Natl Acad Sci USA，2011，108（30）：12372-12377.

Expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma and its significance

WANG Chunnian1CHEN Jie1XIA Zhaoxia1WU Xiaoying2
1.Ningbo Diagnostic Pathology Center，Zhejiang Province，Ningbo315031，China；2.Xiangya School of Medicine，Central South University，Hu'nan Province，Changsha410008，China

Objective To investigate the expression of Pax-8 in human ovarian adenocarcinoma and analyze the diagnostic values of Pax-8 expression.Methods From June 2011 to July 2015，in Ningbo Diagnostic Pathology Center，the paraffin blocks of ovarian adenocarcinoma were collected，52 cases were ovarian primary adenocarcinoma and 31 cases were metastatic adenocarcinoma.The expression of Pax-8 was measured by immunohistochemical technique. Results The positive expression rates of Pax-8 in ovarian cancer were 82.7%，the positive expression rates of Pax-8 in ovarian serous，mucinous，clear cell adenocarcinoma，endometrioid adenocarcinoma were 96.8%，100.0%，100.0%，33.3%respectively.There were no relationship between the expression of Pax-8 and pathological grades，clinical stage and tumor recurrence/metastasis（P＞0.05）.There was no positive expression of Pax-8 in ovarian metastatic adenocarcinoma，compared with ovarian primary，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Conclusion The expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma has show high sensibility and specificity，which may have a definite value in judging primary ovarian carcinoma.

Ovarian adenocarcinoma；Pax-8；Primary；Metastatic

R737.31

A

1673-7210（2015）12（b）-0068-03

2015-08-12本文編輯：蘇暢）

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81172469）；浙江省寧波市自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2013A610227）

汪春年（1977-），女，碩士，副主任醫(yī)師；研究方向：婦科腫瘤、肝膽胰腫瘤。

吳曉英（1966-），女，教授，博士研究生導(dǎo)師；研究方向：婦科腫瘤。