李世林 唐 梁 葉海霞 蒲小勇 王懷鵬

1.廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院泌尿外科（廣州 511457）； 2. 廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院中醫(yī)科；

3. 廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科； 4. 廣東省人民醫(yī)院泌尿外科

清濁祛毒丸聯(lián)合針刺對實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎的治療作用*

李世林1**唐 梁2葉海霞3蒲小勇4王懷鵬4

1.廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院泌尿外科（廣州 511457）； 2. 廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院中醫(yī)科；

3. 廣州市第一人民醫(yī)院南沙醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科； 4. 廣東省人民醫(yī)院泌尿外科

目的 探討清濁祛毒丸聯(lián)合針刺對實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎（CNP）的治療作用及分子機(jī)制。方法 選擇10月齡健康雄性Wistar大鼠72只，隨機(jī)分為正常對照組、安慰劑組、西藥組、中藥組、針刺組及聯(lián)合治療組（簡稱聯(lián)合組），每組各12只。采用去勢加大鼠后背皮下注射17β雌二醇（17β-E2）制作CNP模型，造模成功后除正常對照組及安慰劑組給予生理鹽水治療外，其他各組分別予坦索羅辛加塞來昔布膠囊、清濁祛毒丸、針刺、清濁祛毒丸加針刺治療。治療周期為30d。治療結(jié)束后處死大鼠，顯微鏡下觀察大鼠前列腺組織病變情況，采用ELISA法檢測前列腺液中 IL-1β/TNF-α的表達(dá)水平，Western blot 檢測MIF蛋白的表達(dá)情況，統(tǒng)計(jì)分析各組指標(biāo)的變化差異。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)各組均成功造模，6組在前列腺組織炎癥程度、前列腺液中 IL-1β/TNFα的表達(dá)水平、前列腺組織中MIF蛋白的表達(dá)水平等方面差異均有顯著性意義（P＜0.05）；各治療組與安慰劑組比較各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度的改善，各組間比較差異均有顯著性意義（P＜0.05）；治療組間比較顯示，聯(lián)合組大鼠前列腺組織炎癥程度較其他三組明顯減輕，且IL-1β/TNFα及MIF的表達(dá)水平也明顯降低，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 清濁祛毒丸聯(lián)合針刺對實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎有明顯的治療作用，可減輕前列腺炎癥程度，降低炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，是治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎的一種可行方法。

清濁祛毒丸； 針刺； 前列腺炎； 大鼠

慢性前列腺炎是泌尿男科門診常見疾病之一，因其癥狀多變、病因復(fù)雜導(dǎo)致治療效果欠佳。目前臨床尚缺乏針對該病的特效治療藥物。本研究擬采用慢性非細(xì)菌性前列腺炎動物模型，驗(yàn)證清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎的效果；通過檢測前列腺液中白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）的濃度變化及前列腺組織中巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）的表達(dá)情況，探討清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎的可能分子機(jī)制，闡明慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)病機(jī)制，為臨床治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎提供新的治療方法。

材料和方法

一、動物與分組

選擇10月齡健康雄性Wistar大鼠72只，體質(zhì)量250～300g，由廣東省實(shí)驗(yàn)動物中心提供。常規(guī)飼養(yǎng)7d后，隨機(jī)分為6組：（1）正常對照組；（2）安慰劑組；（3）西藥對照組 ；（4）中藥治療組；（5）針刺治療組；（6）中藥+針刺聯(lián)合治療組（簡稱聯(lián)合治療組），每組12只。6組大鼠均常規(guī)飼養(yǎng)，統(tǒng)一取材。

二、動物模型的制備與驗(yàn)證

造模方法參考文獻(xiàn)［1］，選擇10月齡Wistar大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，在乙醚麻醉下行手術(shù)去勢。術(shù)后第1天大鼠后背部皮下注射17β-E20. 25 mg/2 ml?kg-1，用芝麻油稀釋，連續(xù)30 d注射誘導(dǎo)，成功建立CNP大鼠模型。正常對照組皮下注射生理鹽水0.6mL。第31天時每組處死2只，取前列腺病理檢查，觀察到前列腺局部組織結(jié)構(gòu)損害，部分基膜被破壞，出現(xiàn)明顯炎性細(xì)胞浸潤的慢性炎癥病理改變，可判定造模成功。

三、藥物制備及給藥處理

清濁祛毒丸（廣西玉林大清藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號：國藥準(zhǔn)字Z20025347，生產(chǎn)批號為0810171，規(guī)格8g/包，8g×6包/盒）由金沙藤、大血藤、蒲公英、牡丹皮、虎杖、益母草等藥物組成（，根據(jù)人-大鼠體質(zhì)量比計(jì)算確定中藥實(shí)驗(yàn)組（中藥治療組、聯(lián)合治療組）給予生藥量0.48g/kg體重劑量灌胃。西藥對照組給予哈樂0.2mg+西樂葆0.2g，臨用時將藥搗碎，生理鹽水溶解稀釋成4.004 mg/kg體重劑量灌胃，qd。造模30 d后開始給藥，安慰劑組及正常對照組用生理鹽水灌胃。

于造模的第31天起，針刺治療組及聯(lián)合治療組與藥物治療同時開始進(jìn)行針刺治療。針具：0.40mm×15mm華佗牌無菌針灸針。取穴：關(guān)元、中極、三陰交（雙側(cè)）、腎俞穴（雙側(cè)）、會陽穴（雙側(cè)）。穴位定位主要參照林文注主編的《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［2］。 針刺方法：針刺治療組、聯(lián)合治療組各鼠每日均抓取、捆綁一次（30min/次）；穴位及針具用75%酒精消毒，選用0.40mm×15mm毫針，腎俞斜刺向脊柱方向6mm，會陽稍向內(nèi)前斜刺6mm，關(guān)元、中極直刺3mm，三陰交直刺3mm，行捻轉(zhuǎn)針法，頻率100次/min，捻轉(zhuǎn)角度90°～120°，每次捻轉(zhuǎn)3min，每隔10min捻轉(zhuǎn)1次，留針30min后出針。qd，5d為1個療程，療程間休息2d，共進(jìn)行4個療程。各組同時給藥及治療30 d后處死。

四、標(biāo)本取材

末次給藥及治療后24 h處死大鼠，剝離前列腺并稱重，1 /3組織經(jīng)勻漿后，提取總蛋白，其余2 /3組織入甲醛固定，石蠟包埋切片，HE染色。

五、光鏡觀察

將已固定好的前列腺組織從10%甲醛溶液中取出，石蠟切片，切片厚度5μm，常規(guī)蘇木素-伊紅（HE）染色，顯微鏡觀察。在200×光鏡下，每張切片觀察3個視野，按病變程度不同分為-、+/-、+、++、+++，無病變者為-，輕微病變者為±，病變占1/3者為+，占3/4為+++，兩者之間為++。

六、ELISA法檢測前列腺液中IL-1β/TNFα的表達(dá)水平

末次給藥后24h，剖取大鼠前列腺組織，部分腺體按1ml/100mg加生理鹽水作組織勻漿，離心后取上清液按ELISA法測定前列腺液中IL-1β/TNFα的表達(dá)水平。

七、Western blot 檢測MIF蛋白的表達(dá)

末次給藥后次日，剖取大鼠前列腺組織，經(jīng)勻漿后用蛋白提取液提取蛋白，用預(yù)冷的PBS洗2次，去上清，加4×SDS凝膠上樣緩沖液，沸水浴變性10min。常規(guī)制備SDS-PAGE凝膠，按分組點(diǎn)兩組相同樣品，120V電泳約3.5h后，切下其中一組按常規(guī)方法固定、考馬斯亮藍(lán)R-250染色和脫色，作為判斷Western blot的依據(jù)。另一組樣品切膠轉(zhuǎn)膜，硝酸纖維素膜按凝膠大小剪裁，并頭尾做好標(biāo)記，兩側(cè)各置濾紙3張，按膠負(fù)膜正放置，4℃、18V轉(zhuǎn)膜過夜。取出膜，用封閉液封閉至少2h，TBS液洗膜3次，每次10min；加入1:100稀釋的一抗，4℃作用2h；TBS液洗膜3次，每次10min；加入1:5000稀釋的羊抗兔IgG二抗，室溫作用1h；TBS液洗膜3次，每次10min；用反射顯影技術(shù)觀察條帶。用Gel Logia 200成像系統(tǒng)攝像并分析。

八、藥物安全性評估

實(shí)驗(yàn)大鼠分別于實(shí)驗(yàn)前后檢測以下項(xiàng)目：（1）一般體檢項(xiàng)目；（2）血、尿、便常規(guī)化驗(yàn)；（3）肝、腎功能檢查，以評估實(shí)驗(yàn)對大鼠軀體的影響。

九、統(tǒng)計(jì)分析

結(jié) 果

一、動物模型制備情況

實(shí)驗(yàn)大鼠常規(guī)飼養(yǎng)。模型組大鼠術(shù)后加強(qiáng)保暖，12 h 后自由飲水，每天兩次碘伏消毒切口，防止感染。于造模后第31天時每組處死2只大鼠，取前列腺組織行病理檢查， 200倍光鏡下觀察，可見模型組大鼠前列腺間質(zhì)結(jié)締組織明顯增生水腫， 血管增生充血，間質(zhì)及血管內(nèi)可見大量淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞浸潤，部分基膜被破壞，腺腔內(nèi)可見大量滲出物及淋巴細(xì)胞，出現(xiàn)明顯慢性炎癥病理改變，證實(shí)造模成功。正常對照組大鼠前列腺腺上皮細(xì)胞多排列規(guī)整，呈柱狀排列，腺腔形態(tài)不一，腺組織呈較規(guī)則的圓形或橢圓形，間質(zhì)及血管內(nèi)無炎性細(xì)胞浸潤或水腫。

二、實(shí)驗(yàn)大鼠前列腺組織中炎癥程度比較

各組大鼠前列腺組織中炎癥程度分布情況如表1所示。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，安慰劑組與正常對照組、西藥組、中藥組、針刺組及聯(lián)合組比較前列腺組織中炎癥程度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=33.751，P=0.031＜0.05）；西藥組、中藥組、針刺組及聯(lián)合組前列腺炎癥較安慰劑組明顯減輕，前后兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=9.614，P=0.047＜0.05；x2=9.823，P=0.041＜0.05；x2=9.556，P=0.048＜0.05；x2=10.973，P =0.028＜0.05）；聯(lián)合組與西藥組、中藥組及針刺組比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異均有顯著性意義（x2=14.967，P=0.004＜0.01；x2=12.173，P=0.021＜0.05； x2=11.014，P=0.027＜0.05），見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)大鼠前列腺組織中炎癥程度比較 （n/%）

三、大鼠前列腺液中IL-1β/TNF-α的表達(dá)水平

各組大鼠前列腺液中IL-1β/TNF-α的表達(dá)水平變化情況如表2所示。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，六組大鼠前列腺液中IL-1β、TNF-α的表達(dá)水平均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=3.526，P=0.032＜0.05；F=4.281，P=0.026＜0.05）；安慰劑組IL-1β、TNF-α的表達(dá)水平與正常對照組相比出現(xiàn)明顯升高，差異有顯著性意義（t=3.742，P=0.001＜0.01；t=2.954，P=0.007＜0.01）；西藥組、中藥組、針刺組及聯(lián)合組與安慰劑組比較均出現(xiàn)不同程度降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.253，P=0.041＜0.05；t=2.347，P=0.032＜0.05；t=2.715，P=0.019＜0.05；t=2.938，P=0.008＜0.01）；而聯(lián)合組與西藥組、中藥組及針刺組比較，差異均有顯著性意義（P＜0.05）。

四、大鼠前列腺組織中MIF蛋白的表達(dá)情況

各組大鼠前列腺組織中MIF的表達(dá)變化情況如圖1所示。統(tǒng)計(jì)分析顯示，6組大鼠前列腺組織中MIF的表達(dá)水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=4.372，P=0.023＜0.05）；安慰劑組MIF的表達(dá)水平與正常對照組相比出現(xiàn)明顯升高，差異有顯著性意義（t=3.836，P=0.001＜0.01）；西藥組、中藥組、針刺組及聯(lián)合組與安慰劑組比較均出現(xiàn)不同程度降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.298，P=0.039＜0.05；t=2.348，P=0.030＜0.05；t=2.823，P=0.015＜0.05；t=3.889，P=0.009＜0.01）；而聯(lián)合組與西藥組、中藥組及針刺組比較，差異均有顯著性意義（P＜0.05）。

五、藥物安全性評估

實(shí)驗(yàn)各組大鼠用藥前后檢測血、尿及大便常規(guī)、心電圖、肝腎功能均未見異常。60例大鼠中均未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)。出現(xiàn)輕度不良反應(yīng)共13例，其中西藥組有1例出現(xiàn)食欲不振，有2例輕度腹瀉；中藥組有2例出現(xiàn)食欲不振，4例輕度腹瀉；針刺組未見明顯不良反應(yīng)，1例出現(xiàn)皮下血腫；聯(lián)合組有2例輕度腹瀉。

表2 實(shí)驗(yàn)大鼠前列腺液中IL-1β/TNF-α的表達(dá)變化（s）

表2 實(shí)驗(yàn)大鼠前列腺液中IL-1β/TNF-α的表達(dá)變化（s）

與其他五組比較，#P＜0.05；與安慰劑組比較，△P＜0.05；與聯(lián)合組比較，★P＜0.05

組別 n IL-1β TNF-α（ρ/pg?mL-1） （ρ/pg?mL-1）正常組 10 78.14±46.27 81.43±13.21安慰劑組 10 456.25±67.53# 387.14±62.45#西藥組 10 347.53±55.42△★ 218.45±25.54△★中藥組 10 159.38±19.18△★ 172.78±45.62△★針刺組 10 134.29±14.56△★ 148.34±24.38△★聯(lián)合組 10 79.58±25.89△ 121.52±17.52△

圖1 各組MIF蛋白表達(dá)比較與其他五組比較， #P＜0.05；同安慰劑組比較， △P＜0.05； 與聯(lián)合組比較， ★P＜0.05

討 論

慢性前列腺炎的病因?qū)W十分復(fù)雜，盡管對其眾多的發(fā)病機(jī)制有了相當(dāng)程度的認(rèn)識，但均沒有突破性進(jìn)展。近年來研究發(fā)現(xiàn)，前列腺炎患者前列腺液中常常可以出現(xiàn)某些細(xì)胞因子水平的變化，例如白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、IL-6、IL-8、IL-10等［3-5］，且其表達(dá)與癥狀及治療反應(yīng)均有一定的相關(guān)性，表明免疫反應(yīng)參與了慢性前列腺炎的發(fā)病機(jī)制。

目前研究顯示，免疫反應(yīng)在慢性前列腺炎的發(fā)病過程中起重要作用。在此過程中細(xì)胞因子起介導(dǎo)作用，主要通過免疫細(xì)胞自分泌或旁分泌方式完成其功能，同時參與復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)作用。機(jī)體在病原生物或其他抗原刺激下，巨噬細(xì)胞被激活，一方面巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的促炎性細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-6、MIF 等，另一方面巨噬細(xì)胞將抗原呈遞給T 細(xì)胞，激活T 細(xì)胞，產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，使免疫反應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大。MIF 可促進(jìn)巨噬細(xì)胞的活化，從而形成正性反饋環(huán)路，并可通過多種途徑完成炎癥細(xì)胞的招募，促進(jìn)IL-6、IL-1β、TNF-α 、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）等一系列炎性因子的釋放，同時拮抗抗炎物質(zhì)（如糖皮質(zhì)激素）的作用。IL-6、IL-1β、TNF-α 、MCP-1等作為促炎因子，可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞向炎癥部位聚集和調(diào)節(jié)白細(xì)胞黏附分子的表達(dá)， 誘導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)中白細(xì)胞的趨化活性， 引起局部組織炎癥和損傷并導(dǎo)致疼痛，從而產(chǎn)生前列腺炎的各種臨床癥狀［6］。

中醫(yī)中藥是中華民族的燦爛瑰寶，對治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎也有其獨(dú)特的療效。臨床研究顯示，清濁祛毒丸能明顯改善患者臨床癥狀，降低臨床總有效率為86.7%［7］。研究還表明，清濁祛毒丸可通過減少前列腺液中白細(xì)胞數(shù)量，增加卵磷脂小體密度， 降低前列腺組織中IgG表達(dá)，減輕前列腺腺體的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)前列腺生理功能的恢復(fù)，對實(shí)驗(yàn)性急性細(xì)菌性前列腺炎及慢性非細(xì)菌性前列腺炎均有抑制作用［8］。針刺對慢性非細(xì)菌性前列腺炎也有明顯治療效果。最新研究顯示，針刺能調(diào)節(jié)慢性非細(xì)菌性前列腺炎患者TNF-α、IL-1β 水平，減輕炎性細(xì)胞的趨化，從而緩解前列腺炎所致的會陰部不適，對治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎有明確療效［9］。清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎尚未見報道。因此，本研究采用中成藥制劑清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎，觀察其治療效果并探討慢性非細(xì)菌性前列腺炎的可能發(fā)病機(jī)制。

本研究采用清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎，觀察大鼠前列腺組織中炎癥變化情況，并通過檢測前列腺液中白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）的濃度變化及前列腺組織中巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）的表達(dá)情況，探討清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎的可能分子機(jī)制。本研究發(fā)現(xiàn)，清濁祛毒丸聯(lián)合針刺可明顯改善實(shí)驗(yàn)大鼠前列腺組織的炎癥程度。研究還發(fā)現(xiàn)，清濁祛毒丸聯(lián)合針刺治療實(shí)驗(yàn)性大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎可明顯降低患者前列腺液中IL-1β、TNF-α及MIF的表達(dá)水平，提示清濁祛毒丸及針刺治療可能通過調(diào)節(jié)前列腺組織中IL-1β、TNF-α及MIF的表達(dá)水平，從而改善大鼠前列腺組織的炎癥程度。這與國內(nèi)葉剛、朱愛茹等［10，11］研究結(jié)果相似。

本研究證實(shí)清濁祛毒丸聯(lián)合針刺可明顯改善慢性非細(xì)菌性前列腺炎大鼠前列腺組織的炎癥程度，且安全性好，無明顯毒副作用，是治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎的一種比較理想的方法。盡管清濁祛毒丸及針刺治療單獨(dú)應(yīng)用治療慢性前列腺炎均顯示一定的治療效果，但聯(lián)合治療療效更佳，且不良反應(yīng)未見明顯增加。本研究將為臨床治療慢性非細(xì)菌性前列腺炎提供一種新的治療方法及理論依據(jù)，尚需進(jìn)一步臨床試驗(yàn)以證實(shí)本研究結(jié)論。

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11 朱愛茹， 亓興亮. 針刺對慢性非細(xì)菌性前列腺炎前列腺液中IL-1β的影響. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報 2007； 31（5） : 397-398

（2015-09-05收稿）

The effects of Qingzhuo Qudu Wan combined with acupuncture on experimental rats with chronic nonbacterial prostatitis*

Li Shilin1**， Tang Liang2， Ye Haixia3， Pu Xiaoyong4， Wang Huaipeng4
1. Department of Urology， Nansha Hospital of Guangzhou First people's Hospital， Guangzhou 511457， China； 2. Department of Traditional Chinese Medicine， Nansha Hospital of Guangzhou First People's Hospital； 3. Department of Neurology，Nansha Hospital of Guangzhou First People's Hospital； Department of Urology， Guangdong Provincial People's Hospital
Corresponding author: Li Shilin， E-mail: Androstar2008@163.com

Objective To investigate the effects of Qingzhuo Qudu Wan combined with acupuncture on experimental rats with chronic nonbacterial prostatitis （CNP） and discuss its molecular mechanisms. Methods Total of 72 10-month-old healthy male Wistar rats were randomly divided into the control group， the placebo group， western medicine group， TCM group， acupuncture group and combined treatment group （combined group）， each group 12 rats. Rat model with CNP was induced by castration and injecting 17β-estradiol （17β-E2） production into subcutaneous of rats' back. After the models were successfully made， rats in the normal control group and the placebo group

saline treatment， rats in the other groups were treated with tamsulosin and celecoxib capsules， Qingzhuo Qudu Wan， acupuncture， Qingzhuo Qudu Wan plus acupuncture respectively. Treatment period was 30 days. After treatment， the rats were sacrificed and the lesions of rat prostate tissue were observed under a microscope， the expression levels of IL-1β/ TNF-α in prostatic fi uid were detected by ELISA and the expression levels of MIF in prostate tissue were detected by Western Blot. The differences of indexes among groups were analyzed by statistical analysis. Results The models were successfully established in each group. There were signifi cant differences in prostate tissue infi ammation， level of prostatic fi uid IL-1β/TNF-α or expression of MIF in prostate tissue among six groups （P＜0.05）； Compared with those of the placebo group， all indexes in each treatment group were all improved in varying degrees， differences among groups were statistically signifi cant （P＜0.05）； Compared with that of the other three groups among the treatment groups， rat prostate tissue infi ammation of the combined group was signifi cantly decreased， and the expression level of IL-1β / TNF-α/ MIF was signifi cantly reduced， differences among the two groups were statistically signifi cant （P＜0.05）. Conclusion Qingzhuo Qudu Wan combined with acupuncture has obvious therapeutic effects on experimental rats with chronic bacterial prostatitis， it can lessen prostatitis extent， reduce the expression of infi ammatory cytokines； it may be a possible ways in the treatment of chronic non-bacterial prostatitis.

Qingzhuo Qudu Wan； acupuncture； prostatitis； rats

10.3969/j.issn.1008-0848.2015.11.008

R 697.33

資助: 廣東省中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥課題項(xiàng)目（N0.20132002）

**通訊作者， E-mail: Androstar2008@163.com