曹瑋 陳蕾 吳毅平 馮幼平 黃立

·論著·

高脂飲食對(duì)小鼠皮膚創(chuàng)面修復(fù)影響的實(shí)驗(yàn)研究

曹瑋 陳蕾 吳毅平 馮幼平 黃立

目的 觀察長(zhǎng)期高脂飲食對(duì)小鼠皮膚創(chuàng)面愈合的影響并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法 10周齡C57BL/6J野生型小鼠16只，隨機(jī)分為2組，每組8只，分別采用高脂及普通膳食喂養(yǎng)8周后，在小鼠背部建立全層皮膚缺損模型。每日對(duì)創(chuàng)面愈合狀況進(jìn)行觀察，記錄創(chuàng)面愈合率及上皮化水平。于術(shù)后第14天處死所有小鼠并切取創(chuàng)面組織進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)，比較兩組創(chuàng)面新生表皮厚度、創(chuàng)面床內(nèi)膠原沉積率、新生血管數(shù)目、細(xì)胞增殖及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)水平。喂養(yǎng)前、喂養(yǎng)8周后及手術(shù)后第14天檢測(cè)體重。術(shù)后第14天禁食12 h后檢測(cè)外周血總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 高脂膳食組在高脂喂養(yǎng)8周后及手術(shù)后第14天平均體重［分別為（27.3±0.7）g和（28.8±0.7）g］顯著高于普通膳食組［分別為（21.2±0.6）g和（23.1±1.1）g］，兩組比較，t值分別為21.98和25.22，均P＜0.001。術(shù)后第14天，高脂膳食組TG及TC水平［分別為（1.35±0.32）mmol/L和（4.21±0.41）mmol/L］遠(yuǎn)高于普通膳食組［分別為（0.99±0.28）mmol/L和（2.71±0.31）mmol/L,兩組比較，t值分別為2.24和6.49，均P＜0.05］；高脂膳食組創(chuàng)面愈合時(shí)間明顯慢于普通膳食組［分別為（13.5±0.5）d和（12.6±1.1）d，t=1.99，P＜0.05］，創(chuàng)面新生表皮薄于普通膳食組［分別為（47.8±13.8）μm 和（95.7±13.7）μm，t=5.68，P＜0.001］，CD31陽(yáng)性血管數(shù)低于普通膳食組［分別為（8±1）個(gè)和（13±3）個(gè)，t=4.1，P＜0.001］，ki-67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目低于普通膳食組［分別為（21±4）個(gè)和（49±10）個(gè)，t=3.33，P＜0.001］，但巨噬細(xì)胞及肥大細(xì)胞浸潤(rùn)水平明顯高于普通膳食組（均P＜0.05），各組創(chuàng)面床內(nèi)膠原沉積率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 長(zhǎng)期高脂飲食會(huì)影響小鼠創(chuàng)面的愈合，延緩皮膚創(chuàng)面修復(fù)。

膳食，高脂；傷口愈合；疾病模型，動(dòng)物；膠原；肥大細(xì)胞；巨噬細(xì)胞；血管

皮膚創(chuàng)面的修復(fù)是從皮膚受到外傷開(kāi)始到瘢痕形成而結(jié)束的一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程，分為出血期、炎癥期、增生期及塑形期［1］。在愈合過(guò)程中，以上皮化、局部血管化、細(xì)胞遷移、膠原合成沉積為特征的增生性修復(fù)為創(chuàng)面提供新鮮的肉芽組織；同時(shí)創(chuàng)面邊緣受到牽拉收縮使創(chuàng)面變小。多種細(xì)胞及細(xì)胞因子參與此過(guò)程［2］，全身或局部微環(huán)境的改變均會(huì)干擾創(chuàng)傷的正常愈合［3］。高脂飲食會(huì)影響脂肪組織對(duì)外科手術(shù)或創(chuàng)傷的應(yīng)答［4］，增加手術(shù)并發(fā)癥發(fā)生的概率。據(jù)報(bào)道，長(zhǎng)期高脂飲食的患者行植皮手術(shù)的并發(fā)癥要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于普通人群，其手術(shù)的效果也顯著低于正常人群［5］。本研究建立高脂飲食喂養(yǎng)小鼠背部創(chuàng)面缺損模型，觀察并比較高脂飲食小鼠和普通膳食喂養(yǎng)小鼠背部創(chuàng)面愈合過(guò)程，從而明確高脂飲食對(duì)創(chuàng)面愈合的具體影響，探討其可能的機(jī)制。

材料與方法

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飲食喂養(yǎng)

健康雄性10周齡C57BL/6J小鼠16只（美國(guó)Jackson實(shí)驗(yàn)室提供），隨機(jī)分為普通膳食組及高脂膳食組，每組8只。普通膳食組給予基礎(chǔ)飼料；高脂膳食組給予高脂飼料，高脂飼料配方參考文獻(xiàn)［6］，其脂肪含量42%，碳水化合物43%，蛋白質(zhì)15%；兩組小鼠喂養(yǎng)8周［7］后立即行創(chuàng)面手術(shù)，手術(shù)后高脂膳食組繼續(xù)高脂飲食。喂養(yǎng)前、喂養(yǎng)8周后及手術(shù)2周后測(cè)量體重。

二、小鼠背部創(chuàng)面模型建立

小鼠吸入異氟醚全身麻醉，剃除背部毛發(fā)及消毒后，用皮膚鉆孔器（美國(guó)Miltex公司，AC61509-5000）在小鼠背面雙側(cè)肩胛下角間制造直徑8 mm的皮膚全層缺損創(chuàng)面；完全止血后，即刻使用Tegderm封閉膜（美國(guó)3M公司，PP2501）覆蓋創(chuàng)面。術(shù)后每日更換封閉膜，第4天去除封閉膜，創(chuàng)面裸露保持干燥。術(shù)后在動(dòng)物中心統(tǒng)一分籠飼養(yǎng)，每日測(cè)量體重并記錄。

三、創(chuàng)面觀察

術(shù)后第2天起開(kāi)始測(cè)量創(chuàng)面。采用透明膜面積稱重法記錄創(chuàng)面大小，并按（1-現(xiàn)創(chuàng)面面積/原創(chuàng)面面積）×100%計(jì)算每日創(chuàng)面閉合率；每日在同等光照條件下進(jìn)行創(chuàng)面拍照監(jiān)測(cè)。

四、血清指標(biāo)檢測(cè)

術(shù)后第14天禁食12 h后經(jīng)眼球取外周血，離心得血清，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)外周血總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）。所用試劑盒產(chǎn)自南京森貝伽生物科技有限公司。

五、創(chuàng)面組織學(xué)檢測(cè)

術(shù)后第14天小鼠創(chuàng)面均完全閉合后，切取創(chuàng)面新生組織及創(chuàng)周約5 mm正常皮膚，4%甲醛固定，石蠟包埋后切片（5 μm厚）、脫蠟，部分切片按試劑盒指示步驟行HE染色及Masson三色染色（美國(guó)Sigma-aldrich公司）。部分切片行甲苯胺藍(lán)染色。部分切片置3%過(guò)氧化氫溶液內(nèi)于室溫下孵育10 min，Tris緩沖液（TBST）洗片后以10mmol/L枸櫞酸在98℃下20 min熱修復(fù)，TBST沖洗，10%山羊血清（美國(guó)Vector Laboratories公司）封閉1 h，滴加相應(yīng)的一抗工作液染色，以抗體稀釋液代替一抗作為陰性對(duì)照，室溫下孵育1 h。一抗工作液包括：兔抗Ki67單克隆抗體（稀釋比例1∶400，美國(guó)Thermo Scientific公司）、兔抗CD31多克隆抗體（1∶200，美國(guó)Abcan公司）、鼠抗F4/80單克隆抗體（1∶1 500，美國(guó)eBioscience公司）。TBST洗片，加入相應(yīng)的生物素標(biāo)記的二抗工作液孵化。二抗工作液包括：羊抗兔IgG（1∶200，美國(guó)Vector Laboratories公司）、羊抗鼠IgG（1∶200，美國(guó)Vector Laboratories公司）。室溫下孵化30 min后繼續(xù)以親和素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物（ABC）免疫組化試劑（美國(guó)Vector Laboratories公司）復(fù)合物孵化30 min，DAB染色（丹麥Dako公司），蘇木紫復(fù)染。所有玻片染色后梯度乙醇脫水，二甲苯透明，樹(shù)膠封片。

染色結(jié)果在同等條件下拍照。使用NIH ImageJ軟件測(cè)量創(chuàng)面新生表皮厚度；觀察5個(gè)視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)求均值分析細(xì)胞增殖、創(chuàng)面局部血管新生及巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞浸潤(rùn)情況；參考文獻(xiàn)［8］計(jì)算膠原沉積率。

六、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、小鼠體重及血脂比較

見(jiàn)表1。分組喂養(yǎng)前，兩組平均體重?zé)o明顯差異；分組喂養(yǎng)8周后，高脂膳食組平均體重顯著高于普通膳食組；創(chuàng)面愈合后，兩組平均體重仍存在顯著差異。在術(shù)后第14天，高脂膳食組TG和TC均遠(yuǎn)高于普通膳食組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、小鼠創(chuàng)面愈合比較

高脂膳食組創(chuàng)面開(kāi)始收縮及上皮化出現(xiàn)時(shí)間、創(chuàng)面完全愈合時(shí)間均晚于普通膳食組（t值分別為2.37、1.62、1.99，均P ＜ 0.05）。見(jiàn)圖 1。術(shù)后每天普通膳食組創(chuàng)面愈合率均低于高脂膳食組，其中術(shù)后第5天（t=1.49）、第 7～8天（t值分別為 1.84，2.34）、第 10 ～ 14 天 （t值分別為 3.31、1.94、2.84、1.84、2.18）兩組閉合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)圖2。

三、小鼠創(chuàng)面組織學(xué)結(jié)果比較

1.新生表皮的比較：HE染色，兩組均可見(jiàn)完整的新生表皮（圖3）。高脂膳食組新生表皮厚度［（47.8±13.8）μm］遠(yuǎn)低于普通膳食組［（95.7±13.7）μm，P＜0.001］。

2.膠原沉積率比較：從圖4可見(jiàn)，術(shù)后14 d，兩組創(chuàng)面床中均可見(jiàn)大量藍(lán)色的膠原蛋白沉積。普通膳食組膠原沉積率（0.54±0.04）與高脂膳食組（0.53±0.01）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.75，P ＞0.05）。

3.炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)比較：F4/80染色可見(jiàn)大量胞質(zhì)染為紅褐色的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)（圖5）。高脂膳食組每高倍視野（×400）下創(chuàng)面床中巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)目（55±4）高于普通膳食組（43±4，t=4.12，P＜0.05）。

甲苯胺藍(lán)染色示散在分布的藍(lán)色肥大細(xì)胞（圖6）。每高倍視野（×200）下肥大細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)目高脂膳食組（15±4）高于普通膳食組（3±1，t=5.21，P ＜ 0.05）。

表1 高脂膳食組與普通膳食組小鼠體重及血脂濃度對(duì)比（x±s）

圖1 兩組小鼠創(chuàng)面收縮出現(xiàn)時(shí)間、上皮化出現(xiàn)時(shí)間及完全愈合時(shí)間比較 所有數(shù)據(jù)為± s；n=8；兩組比較，均 P＜0.05

圖2 兩組小鼠術(shù)后每天創(chuàng)面愈合率比較 所有數(shù)據(jù)為± s；n=8；a：兩組比較，P ＜ 0.05

4.新生血管水平比較：CD31免疫組化染色顯示，兩組創(chuàng)面組織內(nèi)均可見(jiàn)褐色陽(yáng)性血管（圖7）。每高倍鏡視野（×400）下陽(yáng)性血管數(shù)高脂膳食組為（8±1）個(gè)，普通膳食組為（13±3）個(gè)，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.1，P＜0.001）。

5.細(xì)胞增殖水平的比較：兩組小鼠Ki67染色可見(jiàn)大量黃褐色染色的陽(yáng)性細(xì)胞分布（圖8）。高脂膳食組每高倍視野下（×400）創(chuàng)面床中Ki67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)平均為21±4，普通膳食組為49±10，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.33，P＜0.001）。

討 論

長(zhǎng)期高脂飲食會(huì)導(dǎo)致肥胖及血脂升高。在本研究中，我們參考文獻(xiàn)［6-7］報(bào)道的高脂飲食喂養(yǎng)方法建模，喂養(yǎng)8周后，高脂膳食組平均體重遠(yuǎn)超普通膳食組；在皮膚造創(chuàng)手術(shù)后2周，高脂膳食組體重仍較普通膳食組增長(zhǎng)約24.5%。除超重外，高脂膳食組外周血TG、TC水平分別較普通膳食組升高約36.4%和55.4%，處于代謝紊亂狀態(tài)。

高脂飲食導(dǎo)致血脂升高和肥胖，二者均是創(chuàng)傷愈合的重要不利因素［2］。術(shù)前進(jìn)行短期的飲食結(jié)構(gòu)控制可以提高機(jī)體對(duì)創(chuàng)傷的急性應(yīng)激性［9］，對(duì)創(chuàng)傷愈合具有促進(jìn)作用。但二者的具體作用機(jī)制目前尚未明確［10］。Nascimento 和 Costa［11］觀察肥胖大鼠背部創(chuàng)面愈合過(guò)程發(fā)現(xiàn)，背部創(chuàng)面在術(shù)后14 d時(shí)比正常大鼠大19%，術(shù)后21 d時(shí)大21%；同時(shí)，他們還觀察到直至創(chuàng)傷后21 d，肥胖大鼠背部創(chuàng)面上皮化程度比正常大鼠低11%。而肥胖Zucker大鼠背部創(chuàng)傷術(shù)后28 d，其創(chuàng)面明顯大于對(duì)照組，創(chuàng)緣的張力遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于對(duì)照組［10］。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中也觀察到，高脂膳食組創(chuàng)面愈合速度減慢，上皮化出現(xiàn)時(shí)間推遲，創(chuàng)面完全愈合時(shí)間延長(zhǎng)，這一結(jié)果與以上報(bào)道相符合。

圖3 小鼠新生上皮厚度比較（HE×400） 創(chuàng)面床中高脂膳食組小鼠新生表皮厚度小于普通膳食組（箭頭所示為新生上皮）

圖4 小鼠膠原沉積比較（Masson三色染色×200） 兩組小鼠術(shù)后14 d創(chuàng)面床中膠原沉積無(wú)明顯差別

圖5 小鼠巨噬細(xì)胞密度比較（F4/80染色×400） 高脂膳食組創(chuàng)面床中的巨噬細(xì)胞密度明顯高于普通膳食組（箭頭所指的形狀不規(guī)則的細(xì)胞為紅褐色的巨噬細(xì)胞）

圖6 小鼠肥大細(xì)胞數(shù)目比較（甲苯胺藍(lán)染色×200） 高脂膳食組肥大細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)目較普通膳食組多（箭頭所指為藍(lán)色的肥大細(xì)胞）

圖7 小鼠新生血管數(shù)目比較（CD31染色×400） 普通膳食組創(chuàng)面新生血管數(shù)目多于高脂膳食組（箭頭所指為CD31陽(yáng)性新生血管）

圖8 小鼠細(xì)胞增殖水平比較（Ki67染色×400） 高脂膳食組創(chuàng)面增殖細(xì)胞數(shù)目明顯低于普通膳食組（箭頭示Ki67染色陽(yáng)性的增殖細(xì)胞）。圖4A~9A均為高脂膳食組，4B~9B均為普通膳食組

研究認(rèn)為，脂肪組織不僅是機(jī)體最大的能量庫(kù)，還具有內(nèi)分泌功能，能分泌多種前炎癥細(xì)胞因子和炎癥細(xì)胞趨化因子；同時(shí)，體內(nèi)過(guò)高的血脂還會(huì)激活一種恒定的自然殺傷T細(xì)胞（invariant natural killer t cell,iNKT），激活的iNKT會(huì)引起多種前炎癥細(xì)胞因子水平不斷增高［12］。這些升高的炎癥生物因子對(duì)免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)均有促進(jìn)作用，并可延長(zhǎng)炎癥反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間。研究顯示，脂肪堆積可以持續(xù)誘發(fā)低水平的慢性炎癥反應(yīng)［13］。在創(chuàng)傷愈合過(guò)程中，長(zhǎng)期低水平的炎癥反應(yīng)會(huì)延緩創(chuàng)傷的愈合時(shí)間，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成創(chuàng)面遷延不愈。國(guó)外研究報(bào)道如果巨噬細(xì)胞狀態(tài)在創(chuàng)傷愈合過(guò)程中發(fā)生改變，異常的創(chuàng)傷愈合將會(huì)發(fā)生，如延遲愈合、增生性瘢痕形成等［14］。我們研究發(fā)現(xiàn)，高脂膳食組創(chuàng)面床中巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)目均顯著多于普通膳食組，提示前者炎癥反應(yīng)水平存在異常，而這可能是其創(chuàng)面愈合延遲的重要原因。

創(chuàng)面床中新生表皮的厚度、細(xì)胞增殖水平及局部血管化程度均可以反映創(chuàng)面的增殖情況。在創(chuàng)傷愈合過(guò)程中，以巨噬細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞可清除細(xì)胞及壞死組織碎片，還可分泌如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1等調(diào)控成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增生轉(zhuǎn)化及遷移，對(duì)增生及組織塑形期中細(xì)胞外基質(zhì)合成、膠原沉積和成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化起重要作用。在高脂膳食組背部創(chuàng)面床中，炎癥細(xì)胞過(guò)度活化，數(shù)量異常增多，這些變化將會(huì)影響創(chuàng)面的正常愈合，抑制創(chuàng)面的增殖修復(fù)。如本研究結(jié)果所示，雖然兩組在創(chuàng)面內(nèi)膠原沉積程度上無(wú)明顯差異，但高脂膳食組創(chuàng)面內(nèi)新生表皮厚度、細(xì)胞增殖水平、血管新生程度明顯低于普通膳食組。這些結(jié)果也和以往報(bào)道相符［15-16］。

總之，本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，在創(chuàng)面愈合過(guò)程中，高脂飲食不僅會(huì)影響創(chuàng)面的收縮，還可通過(guò)抑制創(chuàng)面上皮化、細(xì)胞增殖及血管新生延緩皮膚創(chuàng)面修復(fù)。而這種情況可能是由高脂飲食引起的機(jī)體代謝及脂肪旁分泌紊亂、巨噬細(xì)胞及肥大細(xì)胞的過(guò)度浸潤(rùn)和激活引起的炎癥反應(yīng)失調(diào)所致。但是，當(dāng)前的發(fā)現(xiàn)是建立在小鼠模型之上的，由于人類和小鼠皮膚構(gòu)造及創(chuàng)傷愈合機(jī)制方面的差異，該結(jié)果還需進(jìn)一步驗(yàn)證；同時(shí)，高脂飲食發(fā)揮影響的具體機(jī)制亦需要更深入的研究。

［1］Witte MB,Barbul A.General principles of wound healing［J］.Surg Clin North Am,1997,77（3）:509-528.

［2］艾俊俊,宋為民,查偉鋒,等.外用細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)點(diǎn)陣超脈沖CO2激光術(shù)后創(chuàng)傷修復(fù)的研究［J］.中華皮膚科雜志,2012,45（4）:255-288.

［3］Guo S,Dipietro LA.Factors affecting wound healing ［J］.J Dent Res,2010,89（3）:219-229.

［4］Nguyen B,Tao M,Yu P,et al.Preoperative diet impacts the adipose tissue response to surgical trauma［J］.Surgery,2013,153（4）:584-593.

［5］Goutos I,Sadideen H,Pandya AA,et al.Obesity and burns［J］.J Burn Care Res，2012,33（4）:471-482.

［6］Keren P,George J,Keren G,et al.Non-obese diabetic（NOD）mice exhibit an increased cellular immune response to glycated-LDL but are resistantto high fatdietinduced atherosclerosis［J］.Atherosclerosis,2001,157（2）:285-292.

［7］張國(guó)俠,蓋國(guó)忠,曲墨.高脂飲食對(duì)小鼠血脂的影響［J］.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,29（5）:776-777.

［8］Olbrich KC,Meade R,Bruno W,et al.Halofuginone inhibits collagen deposition in fibrous capsules around implants［J］.Ann Plast Surg,2005,54（3）:293-296.

［9］van Ginhoven TM,Dik WA,Mitchell JR,et al.Dietary restriction modifies certain aspects of the postoperative acute phase response［J］.J Surg Res,2011，171（2）:582-589.

［10］Xing L,Culbertson EJ,Wen Y,et al.Impaired laparotomy wound healing in obese rats［J］.Obes Surg,2011,21（12）:1937-1946.

［11］Nascimento AP,Costa AM.Overweight induced by high-fat diet delays rat cutaneous wound healing［J］.Br J Nutr,2006,96（6）:1069-1077.

［12］Lynch L.Adipose invariant natural killer T cells［J］.Immunology,2014,142（3）:337-346.

［13］Cildir G,Ak?nc?lar SC,Tergaonkar V.Chronic adipose tissue inflammation:all immune cells on the stage［J］.Trends Mol Med,2013,19（8）:487-500.

［14］Schildmeyer LA,Braun R,Taffet G,et al.Impaired vascular contractility and blood pressure homeostasis in the smooth muscle alpha-actin null mouse［J］.FASEB J,2000,14（14）:2213-2220.

［15］Gurtner GC,Werner S,Barrandon Y,et al.Wound repair and regeneration［J］.Nature,2008,453（7193）:314-321.

［16］Wagner IJ,Szpalski C,Allen RJ Jr,et al.Obesity impairs wound closure through a vasculogenic mechanism ［J］.Wound Repair Regen,2012,20（4）:512-522.

復(fù)方甘草酸苷膠囊（甘樂(lè)）征文通知

皮炎濕疹與蕁麻疹是皮膚科常見(jiàn)病，病情常反復(fù)，復(fù)方甘草酸苷膠囊（甘樂(lè)）是治療該類皮膚病的有效藥物之一。為了更好地發(fā)揮甘樂(lè)在皮膚病治療中的作用，中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)與北京凱因科技股份有限公司共同開(kāi)展2015年度凱因甘樂(lè)有獎(jiǎng)?wù)魑幕顒?dòng)，歡迎各級(jí)皮膚科醫(yī)師積極參與。

征文范圍：不同劑量復(fù)方甘草酸苷膠囊治療皮炎濕疹療效觀察；復(fù)方甘草酸苷治療急性蕁麻疹療效觀察。

活動(dòng)內(nèi)容：本次征文活動(dòng)將在2016年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)年會(huì)上進(jìn)行評(píng)比。前3名將分別獲得3萬(wàn)元、2萬(wàn)元、1萬(wàn)元臨床研究基金并頒發(fā)中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)皮膚性病專業(yè)委員會(huì)環(huán)境與職業(yè)性皮膚病學(xué)組研究基金及獲獎(jiǎng)證書(shū)；優(yōu)秀獎(jiǎng)4名，獲得5 000元獎(jiǎng)勵(lì)；入圍獎(jiǎng)10名，獲得1 000元獎(jiǎng)勵(lì)。參加者請(qǐng)將論文電子版發(fā)至電子郵箱annlingchen@126.com，并注明“學(xué)會(huì)征文”。

論文提交截止日期：2015年12月30日。

北京凱因科技股份有限公司對(duì)本次活動(dòng)擁有最終解釋權(quán)。

皮膚美容化妝品制劑研修班通知及共建掌上皮膚科

①舉辦全國(guó)皮膚美容化妝品制劑研修班，皮膚、美容外用制劑及化妝品制備的教學(xué)及實(shí)習(xí)（2015年10月27-31日，蘇州）；授課教授：王玉璽、艾儒棣、鄧丙戌、王伯亞、張寶元、馬振友；②供應(yīng)皮膚美容外用制劑原料，有求必復(fù)；③轉(zhuǎn)讓馬振友發(fā)明的生發(fā)和養(yǎng)發(fā)外用藥國(guó)家專利（201210387061.9）；④陳洪鐸、廖萬(wàn)清、張學(xué)軍策劃，馬振友、張建中、鄭懷林主編的《中國(guó)皮膚科學(xué)史》，600元/冊(cè)，歡迎同仁使用該書(shū)資料和照片；⑤《中國(guó)皮膚性病學(xué)書(shū)目摘要及著者傳略》征文；⑥共建掌上皮膚科APP，簽約會(huì)診專家贈(zèng)送《中國(guó)皮膚科學(xué)史》1冊(cè)，簽約終端單位和醫(yī)師個(gè)人贈(zèng)送《皮膚美容化妝品制劑手冊(cè)》1冊(cè)。聯(lián)系人：馬振友，QQ：386966727，手機(jī)：13379033002。

Effects of high-fat diet on skin wound repair in mice:an experimental study

Cao Wei*,Chen Lei,Wu Yiping,Feng Youping,Huang Li.*Department of Plastic and Aesthetic Surgery,Tongji Hospital,Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China

ObjectiveTo evaluate the effects of long-term high-fat diet on skin wound repair in mice,and to explore its related mechanism.MethodsA total of 16 ten-week-old C57BL/6J wild-type mice were randomly and equally divided into two groups to be fed a high-fat diet（HFD group）and a standard diet（SD group）respectively for 8 weeks.Then,an 8-mm full-thickness skin wound was created on the back of each mouse by using a biopsy punch.The degree of wound healing was observed,wound healing rate and epithelialization level were evaluated every day.The weight of mice was measured before feeding,after 8-week feeding and on day 14 after the operation.Peripheral blood samples were obtained from these mice for the determination of total cholesterol（TC）and triglyceride（TG）levels after a 12-hour fast on day 14 after the operation.Then,all the mice were sacrificed,and wound tissues were resected from the dorsal skin of mice for a histological study.The two-samplettest was used to compare the thickness of new epidermis in the wound surface,collagen deposition rate in the wound bed,count of new vessels,levels of cell proliferation and degree of inflammatory cell infiltration between the two groups.ResultsThe average weight of mice was significantly higher in the HFD group than in the SD group after 8-week feeding（27.3±0.7 g vs.21.2±0.6 g,t=21.98,P＜0.001）and on day 14 after the operation（28.8±0.7 g vs.23.1±1.1 g,t=25.22,P＜0.001）.Similarly,there was a significant increase in the levels of TC（1.35±0.32 mmol/L vs.0.99±0.28 mmol/L,t=2.24,P＜0.05）and TG（4.21±0.41 mmol/L vs.2.71±0.31 mmol/L,t=6.49,P＜0.05）in the HFD group compared with the SD group 14 days after the operation.Compared with the SD group,the HFD group showed shorter healing time（13.5±0.5 days vs.12.6±1.1 days,t=1.99,P＜0.05）,lower thickness of newborn epidermis on the wound surface （47.8 ± 13.8 μm vs.95.7 ± 13.7 μm,t=5.68,P ＜ 0.001）,decreased number of CD31-positive vessels（8±1 vs.13±3,t=4.1,P＜0.001）and count of ki-67-positive cells（21±4 vs.49±10,t=3.33,P＜0.001）,but increased count of infiltrating macrophages and mast cells（bothP＜0.05）.No significant difference was found in collagen deposition rate in the wound bed between the two groups （P ＞ 0.05）.ConclusionLong-term high-fat diet can affect wound healing and delay skin wound repair in mice.

Diet,high-fat;Wound healing;Disease models,animal;Collagen;Mast cells;Macrophages;Blood vessels

Huang Li,Email:hli1212@163.com

作者單位：430030武漢，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院整形美容外科（曹瑋、吳毅平、馮幼平、黃立）；中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院燒傷外科（陳蕾）

10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.08.006

湖北省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（2013CFB139）

黃立，Email：hli1212@163.com

2014-10-09）

（本文編輯：尚淑賢）